兰州大学基础医学院药理学研究所 甘肃兰州 730000
摘要：通过对大鼠进行饮食诱导性肥胖造模得到DIO（Diet Induced Obesity）鼠，观察给T-A药28d期间DIO鼠每天体重变化率，饲料消耗率，以及处死大鼠后得到的体脂，肌肉，血清Insulin浓度。结果表明：T-A可降低大鼠体重，减少饲料消耗量，降低大鼠腹腔内脂肪，皮下脂肪及总体脂，其中浓度为0.1 mg/kg时效果最佳。
关键词：；T-A；DIO；西布曲明
Abstract：Through the diet induced obesity in rats model，Get DIO（Diet Induced Obesity）rats，give the rats medicine for 28 days，The main observation indexes is the rate of weight change every day of the rats and the Feed consumption rate Body fat，muscle，serum Insulin concentration obtain from The rats were killed.the Preliminary conclusion is：T-A can reduce the body weight feed consumption，intra-abdominal fat，subcutaneous fat and total fat of the rat，when the concentration is 0.1 mg/kg The T-A can get the best effect.
Key words：T-A；Diet Induced Obesity；sibutramine
引言
肥胖可引起许多相关疾病的产生，由于发病率的逐年升高已越来越受到人们的重视。目前市场的减肥药有两大类，胰脂肪酶抑制剂和作用于中枢神经系统的食欲抑制剂。食欲抑制剂由于可引起神经系统不良反应而被限制使用，胰脂肪酶抑制剂奥利司他通过抑制胰脂肪酶活性，进而抑制食物中脂肪的分解吸收而减肥。但因其会引起脂肪泻，可造成脂溶性维生素缺乏。最近还有报道其可引起肝功能损害。尽管中枢神经系统食欲抑制剂 lorcaserin 和 Qsymia 成为了 FDA 13 年来首次批准的减肥药，但其仍然存在大脑中枢和心血管系统等方面的安全不确定性。目前减肥药市场的选择屈指可数。如能出现疗效好而不良反应低的减肥药，其市场将会得到显著扩张。本项目首先进行肥胖模型的制备，DIO即饮食诱导性肥胖，利用高脂饲料和高糖饮水诱导使正常大鼠增重，再将造模合格的动物分组，分别是正常对照组、赋形剂组、饮食结构调整组和阳性药物对照组和实验组，实验组按不同的剂量梯度分为0.025 mg/kg，0.05mg/kg，0.1 mg/kg，和0.2mg/kg分别给予相应的处理，观察研究T-A对大鼠的减肥作用。
1 材料和方法
1.1 动物饲料及饮水概况
断乳1-3天雄性SD大鼠100只，体重63-92 g，SPF级，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。普通饲料以及高脂饲料（40%脂肪供能高脂饲料）购于上海斯莱克实验动物有限公司。饮水分普通饮水和含糖饮水，含糖饮水为10 %果糖溶液（果糖为市售食品级）[8]。
1.2 药品和试剂概况
盐酸西布曲明为浙江海正药业股份有限公司产品，临用前以无菌生理盐水混悬。血清Leptin和胰岛素酶联免疫吸附法试剂盒，购自南京建成生物科技有限公司。
1.3 实验方法
1.3.1饮食诱导性肥胖（DIO）模型制备
从100只雄性断乳1-3天SD大鼠中随机取出12-15只作为正常对照组，喂以普通饲料及普通饮水；其它大鼠喂高脂饲料，6周后再将普通饮水改为含糖饮水（10%果糖溶液）6周建立DIO模型，以造模组大鼠体重比正常对照组增加≥20 %且体重与正常对照组相比具有统计学差异，认为DIO造模体重合格；造模结束后，从正常大鼠中选出10只作为正常对照，其余分为赋形剂对照组、配对饲养对照组和饮食结构调整对照组，阳性对照组以及药物受试组，每组10只。
1.3.2 分组及给药
第1组（正常对照组）：正常对照组+普通饲料+普通饮水；
第2组（DIO赋形剂组）：DIO+赋形剂+高脂饲料+ 10%果糖溶液；
第3组（饮食结构调整组）：DIO+普通饲料+普通饮水，自由摄取；
第4组（阳性对照组）：DIO+盐酸西布曲明4 mg/kg i.g.+高脂饲料+ 10%果糖；
第5组（T-A1组）：DIO+T-A 0.025 mg/kg s.c.+ 高脂饲料 + 10%果糖；
第6组（T-A2组）：DIO+ T-A 0.05 mg/kg s.c.+ 高脂饲料 + 10%果糖；
第7组（T-A3组）：DIO+ T-A 0.1 mg/kg，s.c.+ 高脂饲料 + 10%果糖。
第8组（T-A4组）：DIO+ T-A 0.2 mg/kg，s.c.+ 高脂饲料 + 10%果糖。
饮食结构调整组在实验期间以普通饲料普通饮水喂养，自由摄取；s.c.不同浓度的受试药1次；赋形剂组同时间s.c.等量赋形剂生理盐水溶液，每次 2 ml/kg；共给药28天，每天下午4时左右给药。
1.3.3 指标测定
在给药期间，每天或数天定时测定体重及饲料消耗量。实验终点时，所有大鼠在禁食、禁含糖饮水（改饮普通饮水）14小时后称重，以1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，10 ml/kg。测定体长用于计算肥胖指数；腹主动脉取血，3000转/分离心10分钟取血清，用于血清生化insulin测定；取肝，右后肢小腿三头肌和睾丸周围、腹腔及皮下脂肪称重。
（1）体重、体重变化率、摄食量、摄食量变化率给药当天计为0天，给药期间定时测量体重及摄食量。摄食量测定方法为：测定前一日放入的饲料重量，24 h后定量测定残余饲料重量，以放入饲料重量减去残余饲料重量，求出24 h饲料消耗量，以饲料消耗量作为大鼠的摄食量。体重变化率和摄食量变化率公式分别为（1）、（2）：
1.3.3 统计学处理
所有数据均采用SPSS20.0统计软件处理，计量资料用均数标准差（）表示，组间比较用t检验，P<0.05代表差异有统计学意义。
2 实验结果及分析
2.1 对DIO大鼠肥胖指数的影响
T-A 0.1mg/kg的大鼠Lee’s指数属于实验组中最低的，Lee’s指数=300.0（P<0.05），低于阳性对照组Lee’s指数=300.1（P<0.05），但高于饮食结构调整组Lee’s指数=299.8（P<0.05）和正常对照组Lee’s指数=290.8（P<0.01）。T-A 0.1mg/kg的大鼠体脂指数7.5（P<0.01）也属于实验组中最低的，但高于正常对照组体脂指数6.7（P<0.05）。
2.2 对DIO大鼠体脂重量的影响
T-A 0.1mg/kg的大鼠DIO大鼠皮下脂肪12.57g（p<0.05）属于实验组中最低的，但高于正常对照组皮下脂肪6.95g（P<0.01）和饮食结构调整组腹腔内脂肪10.46g（P<0.05）。T-A 0.1mg/kg组大鼠腹腔内脂肪34.44g（P<0.05）高于T-A 0.05mg/kg腹腔内脂肪34.14g（p<0.05），T-A 0.1mg/kg组腹腔内脂肪高于正常对照组腹腔内脂肪13.14g（P<0.05），低于阳性对照组腹腔内脂肪37.44g（p<0.05）。T-A 0.1mg/kg组大鼠总体脂脂47.01g（P<0.05）属于实验组中最低的，且低于阳性对照组总体脂脂肪50.71g（P<0.05）。高于正常对照组总体脂脂肪20.09g（P<0.05）。
2.3对DIO大鼠骨骼肌重量指数及肝湿重的影响
T-A 0.1mg/kg组大鼠的骨骼肌重量指数0.57（p<0.5），低于T-A 0.1mg/kg组大鼠的骨骼肌重量指数0.58（p<0.5），且低于正常对照组0.63（p<0.5）和阳性药物对照组0.58（p<0.5）。T-A 0.1mg/kg组大鼠的肝湿重（g）17.56（p<0.5）在实验组中最低。且低于阳性药物对照组16.39（p<0.5），高于正常对照组12.56（p<0.5）。
T-A 0.1mg/kg的大鼠胰岛素浓度（nIU/L）36.7（P<0.05）最低，且空腹血糖值在正常范围。3.4 对DIO大鼠体重变化的影响正常对照组大鼠在前4天有小幅度的波动，以后呈缓慢增长的趋势。赋形剂组的DIO大鼠体重处于持续增长的状态，饮食结构调整组的DIO大鼠体重在给药16天前有小幅度的增长，在16d后则维持在稳定的水平。西布曲明组的DIO大鼠体重在给药的前6天内下降幅度最大，第6天至第20天大鼠体重下降的幅度逐渐减小，给药20天后大鼠的体重维持稳定水平。T-A0.025mg/kg组大鼠体重持续平稳增长。T-A0.05mg/kg组大鼠体重在给药的前23天保持稳定，仅在第8到11天有小幅度下降，在给药第24天到第28天此组大鼠的体重开始增长。T-A0.1mg/kg组大鼠的体重在给药的前10天下降幅度最大，11天后大鼠体重缓慢反弹增长。T-A0.2mg/kg组大鼠体重给药的前6天下降幅度较大，第7天至给药终点大鼠体重增长较快。
正常对照组大鼠饲料消耗保持相对稳定，赋形剂组偶有波动，饮食结构调整组的饲料消耗量增长幅度较大且平稳。西布曲明组大鼠的饲料消耗变化率波动较大。T-A0.025mg/kg组大鼠饲料消耗变化率在给药第3天最高，以后下降并保持相对稳定。T-A0.025mg/kg组大鼠饲料消耗变化率始终相对稳定。T-A0.1mg/kg组大鼠饲料消耗变化率下降幅度较前两个实验组大。T-A0.2mg/kg组大鼠饲料消耗变化率在给药前3天下降明显，第4天道第8天回升，第9天以后保持平稳。
3 结论
（1）T-A0.1mg/kg可以有效地降低DIO大鼠的体重，有一定的减少摄食量的作用。
（2）T-A0.1mg/kg降低腹腔内脂肪，皮下脂肪，总体脂的作用均强于T-A0.025mg/kg组和T-A0.05mg/kg组以及T-A0.2mg/kg组。与阳性药物对照组即西布曲明组相比，T-A0.1mg/kg 降低体重、控制摄食量的作用均较强，降低腹腔内脂肪、皮下脂肪和总体脂的作用也较强，对蛋白质的消耗高于西布曲明。与正常对照组以及饮食结构调整组相比，T-A0.1mg/kg组对大鼠腹腔内脂肪、皮下脂肪、总体脂控制较强。说明控制饮食的减肥作用优于减肥药物且T-A0.1mg/kg是有效浓度。
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论文作者:王燕
论文发表刊物:《健康世界》2015年15期
论文发表时间:2016/5/27
标签：大鼠论文; 饲料论文; 对照组论文; 体重论文; 脂肪论文; 给药论文; 饮水论文; 《健康世界》2015年15期论文;