(驻马店市中心医院血液科 河南 驻马店 463000)
【摘要】 目的：比较分析儿童CD20阳性及CD20阴性急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的临床特点及预后。方法：回顾性分析120例急性B淋巴细胞白血病患儿的临床资料、相关检查结果及预后特点。流式细胞检测确定58例急性淋巴细胞患儿为CD20阳性（男30例，女28例），62例急性淋巴细胞患儿为CD20阴性（男32例，女30例），比较分析两组患儿的临床特点及预后。结果：初诊中位白细胞计数:CD20阳性患儿组(19.2×109/L)明显高于CD20阴性患儿组(6.93×109／L)，差异有统计学意义(P＜0.05)；CD20阳性患儿组及CD20阴性患儿组均治疗4周，临床完全缓解率分别为78.6％和76.9％，差异无统计学意义(P＞0.05)。CD20阳性患儿组及CD20阴性患儿组在性别、年龄、贫血、Ph染色体阳性、血小板减少、淋巴结肿大、肝脾肿大、免疫表型分期、危险分层、早期死亡等方面差异均无统计学意义(P＞0.05)。CD20阳性患儿组3年累积复发率为59.3％；CD20阴性患儿组3年累积复发率为42.5％，差异有统计学意义(P＜0.05)；CD20阳性患儿组总生存率明显低于CD20阴性患儿组(P＜0.05)。结论：B-ALL患儿CD20阳性表达者临床预后不良，降低B-ALL患儿总生存率。
【关键词】 急性淋巴细胞白血病；CD20；总生存率
【中图分类号】R720.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）02-0186-02
急性淋巴细胞白血病是恶性肿瘤性疾病，其起源于B系淋巴细胞或T系淋巴细胞，肿瘤细胞在骨髓内异常增生，并抑制骨髓正常造血功能，也可侵及骨髓外组织[1]。在我国ALL的发病高峰为0～9岁的儿童期，占儿童白血病的70%以上。由于流式细胞和疫标记技术的进步，ALL免疫表型的研究得到长足发展，其可准确区分白血病细胞来源及分化阶段，为ALL预后监测和临床治疗提供支持。CD20抗原是B细胞分化抗原，它在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，研究显示[2]，CD20阳性表达与急性淋巴细胞性白血病患儿临床治愈及预后关系密切；因此，本研究将回顾性分析CD20阳性患儿临床预后及生存率，进一步研究CD20在儿童B-ALL中的表达及其临床意义。
1.病例和方法
1.1 研究对象
研究对象均来自2012.1—2015.5在我院住院或门诊初诊急性淋巴细胞白血病的患儿120例。流式细胞检测确定58例急性淋巴细胞患儿为CD20阳性（男30例，女28例，年龄5～10岁，平均6±1.21，中位年龄6岁），对照组62例急性淋巴细胞患儿为CD20阴性（男32例，女30例，年龄2～11岁，平均7±1.56，中位年龄7岁）；患儿均经临床相关检查确诊。所有患儿均应用流式细胞仪进行初诊时的免疫分型、微小残留病变（MRD）
1.2 筛选、FISH 和染色体检测
实验方法：流式细胞学检测：应用CellQuest(version3.3)收集并进行数据分析，MRD筛选，免疫分型每管收集104个细胞，收集每管中的所有细胞进行MRD监测。
细胞遗传学检测和免疫分型检测：取骨髓利用肝素抗凝，应用三色免疫荧光法直接标记，每试管细胞数控制在5×105～1×106个，利用流式细胞仪进行标准化检测。所用单抗包括髓系：CD13、CD14、CD33、CD117；B淋系：CD10、CD19、CD20；T淋系：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8；胞浆抗原CD3、MPO、79a；干/祖系细胞标志CD34；规定20％阳性为各抗体阳性百分比，超过20％为各抗体阳性；FISH检测及染色体核型在所有患儿中同时检测。
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MRD筛选和监测：利用FICOLL淋巴细胞分离液将所有初发B-ALL的患儿骨髓标本分离出单个核细胞，抗原表达为CD58、CD21、CD22强表达，CD38、CD45弱表达，染色体相关抗原CD66C表达，CD34 和CU同时表达的进行四色抗体组合检测。选择的四色抗体组合在双参数点图上位置不出现重叠，并且四色抗体组合位置有别于正常骨髓相应抗体位置，则检测认定该组合抗体为有效的筛选标记，可用于后续MRD监测；如果患儿抗原表达与上述改变不符，说明该患儿缺乏合适筛选指标。
1.3 数据统计及分析
采用SPSS统计软件16.0进行统计分析，组间比较应用方差分析，独立样本计数资料比较采用f检验，预后单因素分析采用Kaplan-Meier分析、Log-rank检验，多因素分析采用COX回归模型。P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 一般结果
58例急性淋巴细胞患儿为CD20阳性（男30例，女28例），62例急性淋巴细胞患儿为CD20阴性（男32例，女30例），男女比例分别为1.3：1和0.87：1，在性别分布方面两组患者差异无统计学意义。CD20阳性组中位年龄4(1～8)岁，CD20阴性组中位年龄3.5(3月～7)岁，年龄段分布差异无统计学意义；CD20阳性患儿组及CD20阴性患儿组均治疗4周，临床完全缓解率分别为79.3％和77.4％，差异无统计学意义(P＞0.05)。
2.2 CD20与免疫分型的关系
所有初诊患儿入院均进行免疫分型分期，其中CD20阴性组中Early-preB 50例，PreB 22例，Mature-B(Burkitt-B) 5例；CD20阳性组中Early-preB 28例，PreB 15例，Mature-B(Burkitt-B)5例；2组间差异无统计学意义（χ2=3.241 P=0.683）。
2.3 CD20表达与MRD及危险分层的相关性
CD20阴性组和阳性组在诱导缓解治疗第35天时MRD≥0.01例数分别为13例（16.9％）和17例（35.4％），差异有统计学意义（χ2=2.134 P=0.003）。
3.讨论
急性淋巴细胞白血病是一种恶性肿瘤性疾病，其起源于B系或T系淋巴细胞，该细胞在骨髓内异常增殖，导致该病的发生[3]。骨髓中原始细胞异常增殖，并在骨髓内大量聚集，最终抑制骨髓正常造血功能，同时肿瘤细胞可侵及脑膜、淋巴结、性腺、肝等髓外组织[4]。CD20分子在B淋巴细胞表面，是其特有抗原，CD20分子可以表达于恶性B淋巴细胞和正常B淋巴细胞的各个分化阶段。CD20分子具有钙离子通道的功能，是跨膜糖蛋白，CD20分子能够通过调节细胞内钙离子的转运影响凋亡蛋白的活性，如SERCA3和Bax／Bak凋亡蛋白[5]。CD20分子也可以引起耐药的发生，其相关机制是，CD20分子通过活化ERKl／2和NF—KB通路，最终导致Bcl-2和Bcl-2相关基因过表达[6]。有研究发现，儿童CD20阳性B-ALL与不良的细胞学、高白细胞计数、分子学异常无明显的相关性。部分CD20阳性B-ALL组患儿的5年生存率甚至高于CD20阴性组；也有研究报道CD20阳性和CD20阴性的B-ALL患儿的临床特征以及远期疗效差异均无统计学意义。
本研究显示，58例急性淋巴细胞患儿为CD20阳性（男30例，女28例），62例急性淋巴细胞患儿为CD20阴性。CD20阳性患儿组及CD20阴性患儿组在性别、年龄、贫血、Ph染色体阳性、血小板减少、淋巴结肿大、肝脾肿大、免疫表型分期、危险分层、早期死亡等方面差异均无统计学意义(P＞0.05)。
【参考文献】
[1]郭冬芳.72例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型分析[J]. 中国伤残医学，2015，4(7):33-34.
[2]夏敏，杨静薇，高原等.C D20在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及与预后的关系[J].中华检验医学杂志，2014，6(8):447-450.
[3]陈晓曦，张鸽，万朝敏等.儿童急性B前体淋巴细胞白血病CD20表达与临床特征及预后的相关性研究[J].四川大学学报（医学版），2014，45(4):658-663.
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论文作者:徐玉秀,张勇刚,冯云云
论文发表刊物:《医药前沿》2017年1月第2期
论文发表时间:2017/2/7
标签：淋巴细胞论文; 患儿论文; 阳性论文; 阴性论文; 白血病论文; 细胞论文; 统计学论文; 《医药前沿》2017年1月第2期论文;