景颖, 郑兴, 陈少萍, 吴弘, 张静[1]2006年在《强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:观察强力霉素对损伤动脉组织中基质金属蛋白酶(MMP)活性的抑制作用,并探讨强力霉素对血管平滑肌细胞增殖、动脉内膜增生、管腔重构的影响。方法:球囊导管扩张动脉的方法建立大鼠颈总动脉损伤模型。治疗组用强力霉素30mg·kg-1·d-1干预。明胶酶谱法测定损伤动脉组织中MMPs的活性。用HE染色、VVG染色、免疫组化标记α-actin和增殖细胞核抗原的方法观察损伤动脉内膜厚度、管腔重构及平滑肌细胞增殖的情况。结果:①强力霉素治疗组MMP-9活性在术后24h、3d分别比对照组低26·3%、34·5%(P<0·01);MMP-2活性在术后7d比对照组低40·0%(P<0·01)。②强力霉素治疗使术后7d内膜平滑肌细胞增殖率(43·23%±1·06%)显着低于对照组(62·76%±1·02%)(P<0·01);使术后14d、28d新生内膜厚度比对照组分别少32·0%、38·8%(P<0·01),而管腔面积比对照组多58·0%、90·4%(P<0·01)。结论:强力霉素可以显着降低血管损伤后MMPs活性,抑制内膜平滑肌细胞的增殖、新生内膜增生以及管腔重构,提示它可能具有防治PTCA术后再狭窄的作用。
景颖, 郑兴, 陈少萍, 吴弘[2]2004年在《强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究》文中研究表明目的观察强力霉素对损伤动脉组织中基质金属蛋白酶(MMP)活性的抑制作用,并探讨强力霉素对血管平滑肌细胞增殖、动脉内膜增生、管腔重构的影响,以期对再狭窄的临床治疗提供新的线索和启示。方法用2F球囊导管扩张动脉的方法建立大鼠颈总动脉损伤模型。用强力霉素30mg·kg-1·d-1干预治疗。采用明胶酶谱法测定损伤动脉组织中MMPs的活性。采用HE染色、VVG染色、免疫组化标记α-肌动蛋白和增殖细胞核抗原的方法观察损伤动脉内膜厚度、管腔重构及平滑肌细胞增殖的情况。结果MMP-9在术后24h即出现,然后其活性逐渐降低。强力霉素治疗组与对照组比较术后24h、3d分别降低了26.3%、34.5%(P<0.01)。MMP-2在正常组织中即存在,其活性于术后7d达高峰,治疗组比较对照组降低了40.0%(P<0.01)。病理组织学分析显示,血管损伤后7d新生内膜出现并逐渐增厚,管腔面积逐渐减少。强力霉素治疗组与对照组比较新生内膜厚度在术后14d、28d分别减少了32.0%、38.8%(P<0.01),管腔面积增加了58.0%、90.4%(P<0.01)。内膜平滑肌细胞于术后3d出现,术后7d增殖率达高峰,强力霉素治疗可显着降低内膜平滑肌细胞增殖率[从对照组的(62.76±1.02)%降低到(43.23±1.06)%,P<0.01]。中膜平滑肌细胞增殖率在两组之间无显着差别。结论强力霉素可以显着降低血管损伤后MMPs活性,抑制内膜平滑肌细胞的增殖、新生内膜增生以及后期的管腔重构,提过它可能具有防治PTCA术后再狭窄的作用。
景颖[3]2004年在《强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究》文中进行了进一步梳理目的: 建立大鼠颈总动脉球囊扩张损伤模型。在此基础上,观察强力霉素(Doxy)对损伤动脉组织中基质金属蛋白酶(MMPs)活性的抑制作用,并探讨 Doxy 对血管平滑肌细胞(SMC)增殖、内膜增生、管腔重构的影响,以期对再狭窄的临床治疗提供新的线索和启示。 方法: 1、用 2F 球囊导管扩张动脉的方法建立大鼠颈总动脉损伤模型。测定血管壁损伤评分和新生内膜厚度来判断模型建立成功与否。 2、用 Doxy 30mg/kg/d 干预治疗。于颈总动脉球囊损伤术后 24h、3d、7d、14d取颈动脉标本冻存。用明胶酶谱法测定损伤动脉组织中 MMPs 的活性。 3、于术后 24h、3d、7d、14d、28d 原位灌注固定颈动脉后取标本,采用 HE 染色、VVG 染色、免疫组化标记 a-actin 和增殖细胞核抗原以及透射电镜的方法观察损伤动脉内膜厚度、管腔重构及 SMC 增殖的情况。观察 Doxy(30mg/kg/d)对上述过程的影响。 结果: 1、手术组损伤评分与对照组比较有显着统计学意义(P<0.01);手术组术后 14d动脉内膜明显增厚,管腔面积明显减小。 2、Doxy 治疗组 MMP-9 活性比较对照组在术后 24h、3d 分别降低了 26.3%、34.5%(P<0.01);MMP-2 活性在术后 7d 比对照组降低了 40.0%(P<0.01)。 3、Doxy治疗可使术后7d内膜SMC增殖率从对照组的62.76±1.02%降低到43.23±1.06%(P<0.01);Doxy 治疗组与对照组比较新生内膜厚度在术后 14d、28d 分别减少了 32.0%、38.8%(P<0.01),而管腔面积增加了 58.0%、90.4%(P<0.01)。 结论: 用球囊扩张法可成功建立大鼠颈总动脉损伤膜型;Doxy 可以显着降低血管损伤后 MMPs 活性,抑制内膜 SMCs 的增殖、新生内膜增生以及后期的管腔重构,提示它可能具有防治 PTCA 术后再狭窄的作用。
李波[4]2014年在《金属蛋白酶ADAMTS-7在肺动脉高压发病机制中的作用研究》文中进行了进一步梳理背景：肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension,PAH)在临床是一种多因素参与的病理生理过程,可由多种疾病引起共有的常见综合征,是严重的、具有潜在破坏力的慢性肺循环疾病,是以肺小动脉的血管痉挛、内膜及中膜增生和重构为主要特征的一种疾病。临床表现主要有劳力性呼吸困难、气促、乏力、胸痛、晕厥等,患者最终往往死于右心衰竭。目前尚缺乏有效治疗方法,确诊后患者平均生存时间与恶性肿瘤不相上下,自然存活时间2.8年,预后极差。虽然近年来细胞分子生物学和遗传学的高速前进促进了肺动脉高压发病机制的研究,取得了一系列的研究成果,但目前认为,肺动脉高压的发病机制非常复杂,至今没有一个完整的阐述。到目前为止,其发生机制研究得出主要为：1、与Ⅱ型骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Protein, BMP)受体(BMPR2)有关的基因异常突变；2、内皮系统受损及异常分泌；3、钾离子通道异常；4、炎症细胞的作用；5、基质金属蛋自酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的上调。基质金属蛋白酶及其特异性抑制物(tissue inhibitor of metallo-proteinases, TIMPs)在细胞处基质合成与降解的动态平衡中起着关键作用。在主动脉和冠状动脉壁病变中,基质金属蛋白酶的作用是研究热点。在肺动脉高压的研究中,早有专家研究显示MMP-1和MMP-2通过降解血管基底膜的胶原及变性胶原,后者又拮抗其它基质金属蛋白酶的降解,促进肺血管平滑肌的增殖与迁移,从而影响肺血管的结构重塑,参与各种肺动脉高压的形成。而TIMP-1是活性基质金属蛋白酶-1和-2的特异性抑制物,其可特异性的阻断后者与底物相结合,从而抑制相关胶原的降解过程,正常情况下,二者平衡维持稳态。布朗等证实一氧化氮的充分供给可以使基质金属蛋白酶抑制物质的分泌减少。动物研究显示,一氧化氮可通过TIMP-1/MMP-1平衡的调节来减少胶原的堆积,加强胶原的降解,从而影响肺血管重构。有人研究发现抑制基质金属蛋白酶可以明显降低肺动脉高压患者的肺动脉压力。肺动脉高压时平滑肌细胞增生,无肌化肺小动脉出现有肌化现象；严重肺动脉高压的肺动脉内皮细胞与内弹力板之间出现“新生内膜”,后者由肌纤维细胞及细胞外基质构成；内皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞增殖与凋亡出现失平衡状态,导致肺动脉结构重构,最终形成肺动脉高压。在肺动脉高压血管重构过程中,首先是外膜成纤维细胞被激活增殖并合成基质成分；之后MMP2、MMP9等基质金属蛋白酶上调并介导成纤维细胞由外膜迁移进入血管中膜和内膜,再之出现肺血管中膜及内膜增生增殖、血管重构形成。含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素和金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs,ADAMTS)家族是一类新近被克隆的Zn依赖的分泌型金属蛋白酶家族,这个家族与基质金属蛋白酶家族及解聚蛋白样金属蛋白酶同属于金属蛋白酶家族,但由于其发现时间较晚(1997年),我们对它的了解远远不如后两个家族那么深入。该家族成员与基质金属蛋白酶家族一样,同样具有降解细胞外基质的能力。其于其它两个家族结构的主要不同点是羧基端含有至少一个TSP重复序列(又称之为TSP基序)。ADAMTS家族属于分泌型蛋白酶,可由体内多种细胞合成与分泌,如平滑肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等,其通常与基质相结合。其一共有19个家族成员组成,目前了解的较多是ADAMTS-1、ADAMTS-2、ADAMTS-4、ADAMTS-5、ADAMTS-9及ADAMTS-13这几个成员,它们通过对细胞外基质蛋白的降解或调节而参与了一系列的正常生理学功能,如发育、血管新生和凝血等。而它们的异常表达与细胞外基质蛋白相互作用后通常会引发各种疾病,如癌症、关节炎、动脉粥样硬化、皮肤脆性相关的疾病、凝血功能障碍性紫癜等疾病。而其更多的家族其它成员的功能仍不清楚,有待研究。其中ADAMTS家族的第七个成员——ADAMTS-7对血管方面的精细调节随着人们的深入研究而逐渐让人所知,通过其底物软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)精细调控血管稳态。ADAMTS-7是1999年由Hurskainen TL团队首先报道,其结构包括一个锌离子催化结构域和其他几个非催化结构域,包括：1个disintegrin结构域、1个thrombospondin结构域、1个cysteine-rich结构域(cysteine-rich domain, CRD)、1个spacer-1结构域、3个thrombospondin motifs、1个spacer-2结构域和C-末端4个thrombospondin motifs。ADAMTS-7其与家族成员ADAMTS-12同属ADAMTS家族一个亚型,可直接结合并降解软骨基质蛋白。近十年来国际上研究其较多的有刘传聚教授(现在美国纽约大学医学院系)和北京大学医学部的王利教授研究团队,其中刘教授对其研究主要是从关节炎及软骨发育这一领域,如其研究显示通过体外试验,发现在风湿性软骨滑膜炎病人过表达与降解COMP相关的ADAMTS-7明显升高。在关节炎病人中发现的COMP降解碎片与ADAMTS-7降解COMP的碎片相同。另外,通过应用ADAMTS-7的抗体则可明显的抑制软骨培养中的肿瘤坏死因子和白介素-1β诱导的COMP降解。用siRNA沉默技术抑制ADAMTS-7也可明显的阻止COMP的降解。王利研究团队研究ADAMTS-7从血管出发,这其中也涉及到从COMP入手,发现ADAMT-7可以通过调节COMP的降解而有可能促进血管平滑肌细胞钙化的作用,其发现miRNA-29可干预ADAMTS-7的下游反应,从而调节血管钙化；另外其还通过球囊损伤大鼠颈动脉模型发现ADAMT-7在血管平滑肌细胞的增殖与迁移中起重要作用；其研究认为ADAMTS-7可能参与了动脉粥样硬化中血管基质的降解和重塑,从而加速了动脉粥样硬化的进程。也有研究报道ADAMTS-7其还参与了血管损伤后内膜的增生。国内有专家对非ST段抬高型心肌梗死的血液进行了相关检测,显示ADAMTS-7的水平与NSTEMI患者远期预后密切相关。ADAMTS-7的信使RNA之前报道称其是由人THP-1的单核/巨噬细胞中的TNF-α上调的,但其调节的精细机制仍不清楚；在王利等的研究认为其可能的机制是通过转录因子NF-κB和AP-1来让TNF-α上调而刺激ADAMTS-7诱导大鼠平滑肌增殖。据研究报道,在成人样本中,通过检测分析ADAMTS-7,发现在心脏、胰腺、肾、骨骼肌和肝脏具有最高水平的表达,在大鼠肝脏、睾丸、肺、卵巢、肾、胚胎、心脏和胸腺组织中是均有不同程度地表达。在骨骼肌、半月板和脂肪也可较低水平的被检测到。但是在肺动脉高压疾病相关的肺组织中其表达情况暂时未见报道。基于以上资料,我们已明确肺动脉高压的发病机制非常复杂,具体机制仍不是很清楚,但可以肯定的是基质金属蛋白酶的异常表达是肺动脉高压重要发病机制之一,而ADAMTS这一家族金属蛋白酶与基质金属蛋白酶一样,同样具有降解细胞外基质的能力,同时又广泛分布于哺乳动物的大部分脏器内；而既往研究资料显示其中ADAMTS-7与血管发育关系密切,特别是与体循环的动脉粥样硬化关系密切,我们推测ADAMTS-7可能与肺循环也有密切联系,如能加以证实有望成为肺动脉高压治疗的新靶点。本课题拟先在成人肺动脉高压肺组织和正常肺动脉压力肺组织行ADAMTS-7检测,以明确ADAMTS-7有无在肺组织中表达,有无在肺动脉高压患者肺组织中表达。再进行肺动脉平滑肌细胞培养,进行TNF-α干预后检测ADAMTS-7在其中的表达,以及相关增殖、凋亡、炎症指标的变化。最后,我们在肺动脉高压大鼠中再进行相关检测验证。本研究叁部分分述如下：第一部分轻中度肺动脉高压患者肺组织中的ADAMTS-7的表达情况目的：为明确ADAMTS-7在肺组织中的表达及肺动脉高压患者肺组织中的表达情况。方法：采用病例对照研究,随机选取在广东医学院附属医院住院并拟开胸手术患者,其中20例患者经右心导管测压显示有轻中度肺动脉高压,另20例患者肺动脉压力经右心导管检测正常。两组患者在手术中取1cm3肺组织,进行免疫组织化学法及免疫荧光RT-PCR法检测两组患者肺组织中ADAMTS-7的表达。结果：免疫组织化学法显示在正常压力对照组肺组织中可见少许ADAMTS-7的阳性表达,在肺动脉高压组肺组织中可见大量ADAMTS-7阳性表达,经图像分析软件计算并统计得出病例组IOD值明显高于对照组(P<0.05)。免疫荧光RT-PCR法测两组肺组织中的ADAMTS-7显示两组与空白组(规定其Folds值为1)比较均有统计学差异(P<0.05)；对照组与肺动脉高压组比较,两者具有统计学差异(P<0.05)。结论：ADAMTS-7可能参与肺动脉高压的发病过程。第二部分ADAMTS-7在肺动脉平滑肌细胞中的表达及可能作用机制研究目的：为明确ADAMTS-7在肺动脉平滑肌细胞中的表达及可能的作用机制。方法：培养人原代肺动脉平滑肌细胞,先用免疫荧光细胞化学进行了ADAMTS-7在肺动脉平滑肌细胞中的表达的检测；再用CCK-8法检测不同时间、浓度的TNF-α处理肺动脉平滑肌细胞,以明确其增殖的最佳时间及浓度。后进行分组,分为空白组、TNF-α25ug/L干预组、ADAMTS-7siRNA沉默组,分别培养12小时、24小时、48小时、72小时,再用RT-PCR法检测各组肺动脉平滑肌细胞中ADAMTS-7、PCNA、NF-κB、PI3K、VEGF、MARKK4、ERK1、IL-1、IL-6等因子的表达相对含量。取其中干预组24小时点用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测ADAMTS-7、Bcl-2、COMP等因子的mRNA含量。结果：(1)通过细胞免疫荧光显示ADAMTS-7在肺动脉平滑肌细胞中丰富表达于平滑肌细胞胞浆内。(2)CCK-8法筛选出TNF-α在浓度为25μg/L,时间为24小时时对人肺动脉平滑肌细胞增殖的浓度时间为最优。(3)RT-PCR检测显示TNF-α25ug/L干预组ADAMTS-7、 PI3K、PCNA、VEGF、IL-1、IL-6等因子的mRNA表达量在各个时间点均明显高于siRNA沉默组(P<0.05);ADAMTS-7在TNF-α干预后24小时其表达量最高,PI3K、PCNA、IL-1等因子的mRNA在TNF-α干预后48小时其表达量最高,VEGF、IL-6等因子的mRNA在TNF-α干预后72小时其表达量最高；另显示TNF-α25ug/L干预组NF-κB、MARKK4等因子的mRNA表达量除第12小时段无统计学意义外(P>0.05),其它各个时间段(24小时、48小时、72小时)表达明显高于siRNA组,两者差异具有统计学意义(P<0.05),其中NF-κB等因子的mRNA在TNF-α干预后24小时其表达量最高,MARKK4等因子的mRNA在TNF-α干预后48小时其表达量最高;ERK1因子的mRNA在两组各个时间点均无统计学差异(P<0.05)。(4)免疫印迹检测结果显示TNF-α干预组其ADAMTS-7表达量明显高于siRNA沉默组及对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),对照组表达量高于siRNA沉默组,差异具有统计学意义(P<0.05)；而COMP表达含量在siRNA沉默组及对照组明显高于TNF-α干预组,其差异具有统计学意义(P<0.05),siRNA沉默组及对照组相比较,二者无统计学差异(P>0.05)；在Bcl-2表达在叁组相当,结果无统计学差异(P>0.05)。结论：(1)ADAMTS-7可能通过P13K、NF-κB、TNF-α、JNK等途径调节肺动脉平滑肌细胞的增殖或凋亡；(2)ADAMTS-7可能没有通过ERK、Bcl-2参与肺动脉平滑肌细胞的凋亡；(3)ADAMTS-7可能促进肺动脉平滑肌细胞COMP的降解及VEGF的表达。第叁部分ADAMTS-7在野百合碱诱导肺动脉高压大鼠中的表达情况目的：通过干预野百碱诱导肺动脉高压大鼠,检测ADAMTS-7的表达情况及其对肺动脉平滑肌的增殖及炎症反应情况。方法：SD大鼠30只,随机分为正常对照组(对照组)、MCT诱导的肺动脉高压组(MCT组)、强力霉素组。21天后进行了平均肺动脉压力(mPAP)测定,右心肥大指数(RVHI)测定,并对大鼠肺组织进行ADAMTS-7免疫组织化学检测及TNF-α、NF-κB、IL-1、IL-6、PI3K、MARKK4等因子RT-PCR法检测,免疫印迹法检测各组ADAMTS-7、PCNA、Bcl-2的mRNA表达情况。结果：(1)MCT组及强力霉素组大鼠的mPAP和RVHI均高于对照组(P<0.05),强力霉素组mPAP比MCT组大鼠的mPAP低,但无统计学意义(P>0.05),其RVHI比MCT组RVHI低,并具有统计学意义(P<0.05)。(2)大鼠肺组织ADAMTS-7免疫组织化学显示MCT组明显高于对照组及强力霉素组(P<0.05),强力霉素组与对照组相比,前者高于后者,差值具有统计学差异(P<0.05)。(3)RT-PCR法测各因子mRNA示(规定对照组Folds值为1) TNF-α、NF-κB>、IL-1、 IL-6、PI3K、MARKK4的mRNA表达在MCT组与强力霉素组均明显高于对照组,两者差异具有统计学意义(P<0.05)；各因子在MCT组明显高于强力霉素组,其差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫印迹法结果显示：MCT组ADAMTS-7、PCNA、Bcl-2的mRNA表达高于对照组及强力霉素组,P<0.05；强力霉素组PCNA、Bcl-2的mRNA表达高于对照组,P<0.05；其ADAMTS-7的mRNA表达与对照组相当,无统计学意义,P>0.05。结论：强力霉素可能通过抑制ADAMTS-7来调节肺动脉平滑肌的增殖及炎症反应。单一强力霉素通过抑制ADAMTS-7等金属蛋白酶的作用机制来降低肺动脉压力效果不明显。
方李鸿[5]2010年在《大鼠脑出血后MMP-2、MMP-9、VEGF表达对微血管的影响及强力霉素的作用》文中研究说明背景及目的脑出血具有高死亡率和致残率的特点,给家庭和社会造成沉重负担,目前仍然缺乏有效治疗手段。研究发现,脑出血后存在“缺血半暗带”,脑组织缺血缺氧及脑血管完整性的破坏,且有可能血管生成。在血管生成的过程中,血管细胞外基质层(extracellular matrix,ECM)的降解,内皮细胞与ECM分离导致内皮细胞增值、移行。研究表明,基质金属蛋白酶-2(matrix metallopmteinases-2,MMP-2)、MMP-9可降解ECM的Ⅳ型胶原蛋白；血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)具有促进血管生成及促血管通透性作用。在肿瘤的研究中认为MMP-2、MMP-9及VEGF可能与血管生成有关,由于新生血管可改善微循环促进血肿吸收及神经功能恢复,另一方面其结构功能不全,可能加重脑出血早期脑水肿。因此,研究各时间段血管生成情况及机制对脑出血的治疗有重要意义。本研究用广谱基质金属蛋白酶抑制剂强力霉素对脑出血大鼠模型进行干预,观察MMP-2、MMP-9及VEGF的表达变化及脑出血后微血管生成情况,为脑出血后的病理机制及治疗提供实验依据。材料与方法：1.实验动物分组及给药方法健康成年雌性SD大鼠,共66只,体重340±30g。随机分为对照组、模型组、干预1组和干预2组；并按处死时间分3个亚组：3d、7d和12d(干预2组为7d和12d),每个亚组6只大鼠。造模成功后,对照组、模型组每只大鼠用生理盐水1次/d灌胃。干预1组用强力霉素悬浊液按30mg/kg.d灌胃,5d后改用生理盐水；干预2组第5d改用强力霉素悬浊液,方法同模型组。直至处死前24h。2.模型制作大鼠经10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉后,用微量进样器将80μl自体未凝尾动脉血缓慢注入大鼠左侧尾状核。对照组注入等量生理盐水。动物麻醉清醒后,参照Zea-longa等评分标准, 1～3分为模型成功。3.脑组织切片的制备及指标检测大鼠断头取脑后,常规固定、脱水、石蜡包埋、制成3μm切片,用兔抗鼠MMP-2、MMP-9、VEGF及CD34抗体采用SP法进行免疫组化染色,阳性者为棕黄色。每张片选取5个不同区域进行高倍镜(×200)观察,应用图象分析系统测其阳性区平均灰度值,取均值。CD34阳性血管计数是先用低倍镜寻找阳性血管较密集区,选取5个高倍镜视野直接统计阳性血管数,取均值。4.统计学方法所有数据均以x±s表示,使用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析,采用t检验和t’检验。取α=0.05作为检验水准。结果：1. MMP-2、MMP-9及VEGF的表达3种因子在各组的阳性区平均灰度值均随着时间的推移逐渐减少,除了MMP-2在模型组的7d和3d时表达差别无统计学意义(P>0.05)外,其他各组的差别均有统计学意义(P<0.05)。同时间点,对照组、干预1组和干预2组较模型组减少,差别有统计学意义(P<0.05)2.CD34阳性血管计数对照组和模型组的阳性血管计数在3d时最多,随着时间推移逐渐减少,且与模型组相比,对照组减少的速度快,两组的差别有统计学意义(P<0.05)；干预1组3d时较模型组少,但7d时较多,减少速度慢,且各时间点与模型组差别有统计学意义(P<0.05)；干预2组较同时间点模型组明显减少,差别有统计学意义(P<0.05)。结论1.脑出血后MMP-2、MMP-9、VEGF过度表达。2.脑出血后脑组织有血管生成。3. MMP-2、MMP-9与VEGF可能与血管生成有关。4.强力霉素通过抑制MMP-2、MMP-9的表达,影响VEGF的表达及血管生成；可能是潜在的脑出血理想的治疗药物。
张沛[6]2002年在《强力霉素、氯沙坦及其合用防治大鼠急性心肌梗塞后左室重构以及对MMP/TIMP表达影响的对比研究》文中指出强力霉素、氯沙坦及其合用防治大鼠急性心肌梗塞后左室重构的作用对比目的：通过对强力霉素、氯沙坦及其合用对大鼠急性心肌梗塞(AMI)左室重构的防治作用，评价：(1)金属蛋白酶(MMP)抑制剂强力霉素防治大鼠AMI左室重构的作用，(2)对比强力霉素和氯沙坦及合用对左室重构的防治效果。方法：461雌性SD大鼠，其中431行冠脉前降支结扎致AMI，术后24小时存活254只随机分入下列各组：(1)AMI组64只，(2)强力霉素组(30mg·kg~(-1)·d~(-1))63只，(3)氯沙坦组(10mg·kg~(-1)·d~(-1))62只，(4)强力霉素(30mg·kg~(-1)·d~(-1))和氯沙坦(10mg·kg~(-1)·d~(-1))合用组65只；另30只均设为假手术组。将上述各组大鼠再依治疗观察时间的不同，均分为一周、二周和四周叁个亚组。强力霉素和氯沙坦均以直接灌胃法给药。治疗满疗程后各组大鼠均以导管法行血流动力学测定，然后离体心脏。垂直于长轴，沿其中点切取2-3mm厚度的心脏左室截面，固定后对其进行相关病理分析。去除舒张不良及梗塞面积＜35％或＞45％的心脏标本(假手术组除外)。 结果：最终获得完整实验指标测定的大鼠共157只，其中一周观察疗程大鼠53只，各实验组数目分别如下：(1)假手术组10只，(2)AMI对照组10只，(3)强力霉素组11只，(4)氯沙坦组11只，(5)合用组11只；二周观察疗程大鼠52只，在上述各实验组的数目分别为：10、12、9、9和12只；四周观察疗程大鼠52只，在上述各实验组的数目分别为：10、11、11、10和10只。AMI各组平均梗塞面积分别为42％—48％，组间对比均无显着差异(P均＞0.05)。 LVEDP在假手术组于各时间点间均无显着差异。与假后术组相比，AMI组的LVEDP在心梗后一周、二周和四周时显着升高(10.1±2.8mmHg对3.1±1.4mmHg、9.8±1.8mmHg对3.4±2.3mmHg和16.7±6.2mmHg对4.3±1.5mmHg，P均＜0.001)，且在四周比一周和二周时增加梗显着(16.7±6.2mmHg对10.1±2.8mmHg和9.8±1.8mmHg，P均＜0.01)。与AMI组相比，强力霉素、氯沙坦及合用叁治疗组的LVEDP于各时间点均显着降低(一周：6.1±1.6mmHg、5.7±1.1mmHg和5.4±2.7mmHg对10.1±2.8mmHg，P均＜0.001；二周：7.3±2.2mmHg、6.8±1.3mmHg和6.8±2.5mmHg对9.8±1.8mmHg，P均＜0.05；四周：10.1±3.8
姚振涛[7]2013年在《兔下腔静脉球囊损伤后血管重塑相关因子的变化及G-CSF对其的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨兔下腔静脉损伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的变化规律以及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对它们表达水平的影响。方法制作48只兔下腔静脉损伤模型,术后随机分为2组：实验组(术后应用G-CSF)和对照组(术后应用生理盐水),分别于术后3d、7d、14d、28d取血管损伤段,应用免疫组化染色,光镜下检测各因子在不同时间点的表达情况。结果术后3天,血管内膜各因子的阳性表达率均有不同程度增多,第7天达到高峰,期间两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。第14天至第28天,对照组各因子阳性表达率仍在高水平,实验组则逐渐下降,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论下腔静脉损伤后,MMP-2,MMP-9及TGF-β1在受损静脉段的局部表达增加,G-CSF可以对MMP-2、MMP-9、转化生长因子的表达造成不同程度的影响,从而抑制血管平滑肌和内皮细胞的过度增殖,防止血管内皮损伤后再狭窄的发生。
池元龙[8]2006年在《强力霉素抑制结肠癌增殖、转移的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨强力霉素(Doxycycline,DC)抑制结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制和对明胶酶(MMP-2、MMP-9)表达的影响。方法:采用四氮唑蓝比色还原法检测DC对LoVo细胞增殖的影响,应用流式细胞仪AnnexinV-PI双染法检测LoVo细胞凋亡,同时利用流式细胞仪测定细胞线粒体跨膜电位,采用免疫组织化学法检测细胞表达MMP-2,9。结果:(1) DC抑制LoVo细胞的增殖:5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml DC作用24h后,生长抑制率分别为16.4%、37.0%、44.6%(P<0.01;P<0.01;P<0.01),作用48h后,生长抑制率分别18.6%、39.7%、49.2%(P<0.01;P<0.01;P<0.01),呈剂量、时间依赖性;(2) DC诱导LoVo细胞凋亡:在作用24h后,5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml DC诱导LoVo细胞凋亡比率分别为7.79±0.07%、16.05±0.25%、17.42±0.08%,与对照组1.04±0.05%相比差异有显着意义(P<0.01;P<0.01;P<0.01);(3) LoVo细胞线粒体跨膜电位:DC作用24h后,5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml组细胞线粒体跨膜电位下降比率分别为6.53±0.06%、23.28±0.47%、26.08±0.39%,与对照组1.51±0.03%相比差异有显着意义(P<0.01;P<0.01;P<0.01);(4) LoVo细胞表达MMP-2,9:DC作用24h后,LoVo细胞表达MMP-2、9量下降,并呈剂量依赖性。结论:(1)体外实验证实强力霉素通过线粒体通路诱导细胞凋亡,从而抑制结肠癌LoVo细胞增殖;(2)体外实验还证实强力霉素抑制结肠癌LoVo细胞MMP-2和MMP-9的表达。
范军[9]2006年在《升主动脉缩窄鼠动脉瘤的形态学与基质金属蛋白酶表达水平实验研究》文中研究表明实验目的 升主动脉瘤是大动脉瘤,其发病凶险,易形成夹层动脉瘤和破裂,死亡率极高。为更好的研究临床升主动脉瘤的发病机理,进行升主动脉瘤的治疗,必须建立一个与临床发病过程相似的病理模型。 1988年Brophy CM等曾采用遗传诱导X染色体突变,造成动脉壁连接胶原纤维与弹力纤维之间的基质合成障碍,导致动脉扩张形成动脉瘤,但此种方法没有特异性。目前关于动脉瘤的研究模型大多集中于腹主动脉瘤的研究,还没有理想的升主动脉瘤研究模型。本实验的动脉瘤模型是对幼年Wistar大鼠行升主动脉缩窄形成的。迄今为止,采用此种方法制作动脉瘤模型国内外未见报道。此模型的动脉瘤形成是一个慢性过程,与临床动脉瘤的形成有较大的相似性,能更为准确的进行临床动脉瘤的研究。 本实验通过观察升主动脉缩窄鼠升主动脉瘤的形态特征,探讨基质金属蛋白酶2、3、9(MMP-2、MMP-3、MMP-9)在升主动脉瘤发病机制中的作用,进一步研究升主动脉缩窄术后升主动脉瘤形态学和形成原因。为动脉瘤的临床和实验研究提供资料,对临床大动脉瘤的诊治具有重要的参考价值。 材料与方法 1 动物分组及标本采集 将幼年雌性Wistar大鼠40只,体重100-120克(中国医科大学实验动物部提供),随机分为两组:对照组(10只)和实验组(30只)。按照本实验室的方法制作升主动脉缩窄模型。术后3-5个月左右进行升主动脉功能检测后,取动脉瘤标本。 2.观察指标及检测方法
胡少东[10]2005年在《缬沙坦和安体舒通对急性心肌梗死后基质金属蛋白酶和胶原代谢以及心功能的影响》文中进行了进一步梳理急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)后发生左室进行性扩张进而发生左室重构,并最终可能进展至心力衰竭。心梗后细胞和细胞外基质发生的变化引起心室几何构型变化和梗死扩展,但AMI 过程发生左室重构的机制仍不清楚,至今如何阻抑AMI 后左室重构仍是关注的焦点。心肌梗死后左室重构涉及心肌细胞肥厚和间质纤维胶原的聚积。研究证实,梗死扩展中决定心肌结构的因素是细胞间基质的重构。细胞外基质的完整有着极为重要的作用,其决定梗死后重构的范围。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族促进基质降解,基质金属蛋白酶和其抑制物共同调节细胞外基质的代谢,并在细胞外基质和左室重构中起着重要作用。然而,外源性基质金属蛋白酶抑制对梗死扩展的作用尚不清楚。大量实验和临床资料证实肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS,renin-angiotensin-aldosterone system)在左室重构中发挥重要作用。血管紧张素Ⅱ可在局部心肌内形成,刺激胶原生成和心肌成纤维细胞增殖。有研究表明,合用ACEI 和血管紧张素受体拮抗剂在限制胶原沉积方面优于单独用药。醛固酮是RAAS 另一种重要成员,可通过多种途径诱导心血管系统纤维化。体外实验证实醛固酮诱导心肌成纤维细胞合成胶原。RALES实验证实安体舒通对心衰患者有显着的治疗效果,死亡率降低30%,作用机制和抑制心肌纤维化有关。已发现血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂影响胶原沉积,但对基质金属蛋白酶的活性有无影响尚无定论,是否安体舒通有此作用尚不清楚。本课题通过研究缬沙坦和安体舒通对急性心肌梗死大鼠基质金属蛋白酶、胶原代谢和心功能的影响,并观察对急性心肌梗死伴室壁瘤胶原代谢和心功能的影响,为临床应用该类药物,阻抑左室重构治疗提供可行性依据。本研究内容及结果如下:第一部分缬沙坦和安体舒通对大鼠急性心肌梗死后基质金属蛋白酶表达
参考文献：
[1]. 强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究[J]. 景颖, 郑兴, 陈少萍, 吴弘, 张静. 中国病理生理杂志. 2006
[2]. 强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究[C]. 景颖, 郑兴, 陈少萍, 吴弘. 中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编. 2004
[3]. 强力霉素影响基质金属蛋白酶活性和血管重构的实验研究[D]. 景颖. 第二军医大学. 2004
[4]. 金属蛋白酶ADAMTS-7在肺动脉高压发病机制中的作用研究[D]. 李波. 南方医科大学. 2014
[5]. 大鼠脑出血后MMP-2、MMP-9、VEGF表达对微血管的影响及强力霉素的作用[D]. 方李鸿. 郑州大学. 2010
[6]. 强力霉素、氯沙坦及其合用防治大鼠急性心肌梗塞后左室重构以及对MMP/TIMP表达影响的对比研究[D]. 张沛. 中国协和医科大学. 2002
[7]. 兔下腔静脉球囊损伤后血管重塑相关因子的变化及G-CSF对其的影响[D]. 姚振涛. 郑州大学. 2013
[8]. 强力霉素抑制结肠癌增殖、转移的实验研究[D]. 池元龙. 苏州大学. 2006
[9]. 升主动脉缩窄鼠动脉瘤的形态学与基质金属蛋白酶表达水平实验研究[D]. 范军. 中国医科大学. 2006
[10]. 缬沙坦和安体舒通对急性心肌梗死后基质金属蛋白酶和胶原代谢以及心功能的影响[D]. 胡少东. 河北医科大学. 2005
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