湖南省慈利县疾病预防控制中心 湖南张家界 427200
【摘 要】目的：探讨大肠埃希菌的微生物检验方法与临床价值。方法：选择某院2017年12月-2018年12月期间送来的检验标本51例为研究对象，按照《中国药典》中的相关要求检验大肠埃希菌，并且分析检验结果。结果：在本次研究中，共检出31例大肠埃希菌菌落，检出率为60.78%（31/51）；同时，大肠埃希菌在MacA平板上的形态学表现为：①表面光滑、湿润，且边缘整齐；②形状比较扁平，主要为圆形；③菌落颜色主要为鲜桃红色，大多数菌落中心为深桃红色，但是一些为微红色。结论：临床上在检验大肠埃希菌时，按照《中国药典》2015年版中的相关要求，能够使准确性提高。
【关键词】《中国药典》；微生物检验；大肠埃希菌
在人体肠道菌群中，大肠埃希菌是比较重要的一个组成部分，具有复杂的发病机制，一般为人体的抵抗力和免疫力降低后，使大肠埃希菌的寄居条件发生了改变，从而诱发机会感染或二重感染，临床上多见于肠道感染、败血症以及伤口感染等[1]。有研究发现，通过对大肠埃希菌进行微生物检验，能够明确判断患者病情，在一定程度上有助于临床方案的制定。
因此，本文对大肠埃希菌的微生物检验方法与临床效果进行了探讨，现报道如下。
1.资料和方法
1.1一般资料
选择2017年12月-2018年12月期间某院送来的51例检验标本为研究对象，并且选择[CMCC（B）44102]大肠埃希菌，提供者为中国食品药品检定研究院。
1.2方法
1.2.1试剂和仪器
本次研究仪器包括CP-ST200电热恒温培养箱、VITEK2全自动微生物分析仪；而试剂则包括以下3种：①TSB。胰蛋白胨大豆汤培养基100ml；②MacA。麦康凯琼脂培养基；③MacB。麦康凯肉汤培养基。
1.2.2方法
对大肠埃希菌进行微生物检验时，根据《中国药典》2015年版的相关要求进行，操作如下：在无菌操作台上，在TSB培养基中接种10ml样品供试液，在另一TSB培养基中接种pH=7.0的10ml氯化钠蛋白胨缓冲液，将其作为阴性对照组。然后在第3个TSB培养基中接种供试液10ml，再加入大肠埃希菌菌悬液，并将其作为阳性对照组。同时，将3个培养基分别放入恒温箱中培养，掌握好时间，一般为18h，再在MacB培养基中接种1ml培养物，并且在恒温条件下培养24h。最后，再运用接种环对培养物进行沾取，在MacA平板上接种，然后在33°C恒温条件下进行18h倒置培养。
1.3观察指标
分别检查平板内的菌落类别，如果没有出现菌落或生长菌落鉴定结果为阴性，则说明没有发现大肠埃希菌；如果发现菌落生长，且经鉴定后显示为阳性，则提示检出大肠埃希菌。
2.结果
2.1检验效果
本次研究的51例样品中，共检出大肠埃希菌菌落31例，占60.78%，其中阳性对照组可见大肠埃希菌生长，并且具有较好的纯度；而阴性对照组则没有出现菌落生长。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
2.2大肠埃希菌的表现形态
大肠埃希菌在MacA平板上的形态学表现为：①表面光滑、湿润，且边缘整齐；②形状比较扁平，主要为圆形；③菌落颜色主要为鲜桃红色，大多数菌落中心为深桃红色，但是一些为微红色。
3.讨论
3.1大肠埃希菌的主要特征
3.1.1形态特征
根据大肠埃希菌的大小可以将其分为3种类型：①染色菌。1.0-3.0&mu.m；②干菌。0.40-0.70&mu.m；③活菌。2.0-6.0&mu.m或者1.1-4.8&mu.m。同时，大部分大肠埃希菌有周身鞭毛，可以运动，无芽孢，周身还有菌毛，一些菌株存在胞膜，且主要为单个存在，少部分成对。
3.1.2培养特征
大肠埃希菌的最适宜pH值为7.4-7.6，生长温度为37°C，在普通培养液上可以良好生长，形成直径2-3cm，且湿润、圆形、半透明、光滑、灰白色、整齐边缘且凸起的菌落。但是有研究发现，在不同培养平板上，其表现也存在着一定的区别：①SS琼脂平板。大部分被抑制，生长菌落呈现出红色，且均匀生长在营养肉汤内；②伊红-亚甲蓝琼脂平板。菌落呈现出蓝紫色，但是在中国蓝琼脂平板上则表现为蓝色；③血琼脂平板。一些菌株可出现&beta-溶血环。
3.2大肠埃希菌的微生物检验价值
近年来，随着抗生素在临床上的广泛运用，感染性病原菌也随之出现变异，增加了耐药情况，在一定程度上增加了感染性菌株的临床诊断和治疗难度。有研究发现，在呼吸系统、泌尿系统等出现细菌感染的部位，大部分可以分离出大肠埃希菌，如果控制不及时，容易出现超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），从而诱发院内感染[2]。临床上在对大肠埃希菌进行检验时，通常以微生物检验为主，其准确性较高，并且临床医生根据微生物检验结果，选择合适的治疗药物，能够避免抗生素滥用，从而确保治疗效果[3]。在本次研究中，首次预增菌在TSB培养基上进行，再在42°C条件下运用MacB平板培养培养物，然后接种在MacA平板上，不仅能够使受伤菌株的复壮培养效果增强，还能将处于休眠期或半休眠期的大肠埃希菌检出，增加大肠埃希菌的检出率，从而提高检验准确度 [4]。本次研究结果显示，51例样品中，共检出大肠埃希菌菌落31例，占60.78%，其中阳性对照组可见大肠埃希菌生长，并且具有较好的纯度；而阴性对照组则没有出现菌落生长，这一结果与王春玲[5]等研究报道一致。
综上所述，根据《中国药典》中的相关规定，对大肠埃希菌进行微生物检验，一方面可以提高大肠埃希菌的检出率，另一方面还能准确判断患者病情，为制定针对性治疗方案提供有效依据，值得推广。
参考文献：
[1]林高平，肖勍，邹立新.大肠埃希菌的微生物检验方法及临床意义[J].基层医学论坛，2017，21（11）：1369-1370.
[2]郑卫东，陈萍，田彩霞.1124株中段尿分离病原微生物耐药性监测结果[J].中国抗生素杂志，2012，37（02）：158-162.
[3]陆春光.大肠埃希菌的微生物检验分析[J].心理医生，2015，21（16）：235-236.
[4]孙胜平.王群林.关于发用类化妆品微生物检验方法适用性探究[J].大家健康（下旬刊），2016，10（4）：84.
[5]王春玲.张圣颖.大肠埃希菌的微生物检验分析[J].医药前沿，2016，6（14）：376-377.
论文作者:唐友凤
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2019年3期
论文发表时间:2019/5/15
标签：大肠论文; 菌落论文; 微生物论文; 培养基论文; 平板论文; 检出论文; 生长论文; 《中国结合医学杂志》2019年3期论文;