刘婧媛 (辽阳市疾病预防控制中心质量管理科 辽宁辽阳 111000）
【摘要a
刘喜萍 (奎屯市计划生育宣传技术指导站 新疆奎屯 833200)
【摘要】目的 分析质量控制在临床免疫检验中的应用效果。方法 随机选取2012年3月至2013年3月在我站门诊部接受治疗的50例患者，所有患者均进行免疫检验，对患者的临床资料进行回顾和总结，从免疫检验各个环节，分析免疫检验影响因素，并提出针对性措施，严格控制免疫检验质量，观察质量控制对免疫检验的作用。结果 影响免疫检验的因素较多，包括检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等因素。结论 对临床免疫检验进行质量控制，可有效提高检验准确性，为临床提供更可靠的诊疗信息。
【关键词】临床 免疫检验 质量控制
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）39-0180-02
免疫检验对临床诊断和治疗具有重要指导作用，检验结果的准确性直接关系到患者的疾病治疗，因此，应加强免疫检验质量管理，采用质量控制，确保免疫检验的准确性。本文对我站免疫检验影响因素进行了探讨，分析质量控制应用于免疫检验中的作用，现总结如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
随机选择2012年3月至2013年在我院门诊接受治疗、并进行免疫检验的50例患者，对患者的临床资料进行回顾性分析。从各方面分析免疫检验影响因素，如实验室卫生情况、湿度及温度变化，检验人员专业水平、工作经验、检验技术、检验操作、质量管理，检验仪器和设备维修、故障、保养、操作及计量校准等情况，找出免疫检验影响因素，通过质量控制措施，保证检验结果的准确性。
1.2质量控制方法
1.2.1标本质量控制
标本质量直接影响检验结果，因此，应重视免疫检验标本采集工作，严格控制标本采集时间，采用标准姿势采血，合理选择稳定剂及抗凝剂，并在进行标本采集前，告知患者相关注意事项，如标本采集前14d保持规律作息和饮食，前24h避免饮酒，空腹12h后再进行抽血[1]。标本采集完成后，应做好标本保存工作，详细记录患者的检测项目、标本采集时间以及基本资料等，以免出现混淆现象，根据检测项目和检测标本，选择合适的保存方式。标本采集后应尽快进行检测，以免保存时间过长，导致标本变质，影响检验结果的准确性。
1.2.2检验设备和仪器管理
检验设备和仪器在免疫检验中十分重要，对检验结果具有直接影响作用，因此，应提高检验设备仪器管理力度，做好维修保养工作，定期进行检验设备仪器检查，一旦出现设备故障或仪器故障，应立即进行更换，避免检验误差现象。定时进行仪器校正，确保检验设备和仪器良好工作状态，尤其进行仪器维修后，应及时进行矫正处理，以免影响检验结果。
1.2.3选择合适的检验试剂
在进行免疫检验时，应做好试剂准备工作，根据检验项目特点选择合适的检验试剂，对试剂的生产日期和有效期进行详细检查。另外，为了确保检验准确性，应尽量选择质量好、信誉高的试剂生产厂家，并避免频繁更换厂家，以免由于检验试剂差异，影响检验结果。
1.2.4加强检验人员和检验环境管理
检验人员的专业水平、操作技能以及职业素质等，也会对检验结果造成影响，因此，应定期开展检验培训，不断提高检验人员的专业能力，并通过考核制度，确保检验结果的可靠性[2]。由于免疫检验属于精密性、微量实验，对检验环境要求较高，应定期进行消毒和杀菌处理，保持实验室清洁，确保生物污染、通风、湿度、温度以及照明等与免疫检验环境要求相符。
2.结果
通过分析得出，影响免疫检验结果的因素较多，包括检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等因素。本站采用质量控制进行免疫检验管理后，检验结果的可靠性和准确性得到了进一步的提高。
3.讨论
免疫检验是临床诊治的重要依据，对免疫检验进行质量控制，是确保检验结果可靠性的重要前提。但在检验过程中，存在许多影响因素，标本是免疫检验最常见影响因素，在进行检验前，应对标本进行稀释，尽量降低标本干扰。标本凝固不全、出现细菌感染、储存时间过长或出现溶血现象等，均会对检验结果造成干扰影响，采血不当是导致溶血的主要原因，因此，检验人员应做好标本采集工作，避免检验受到干扰影响[3]。免疫检验步骤较多，应将质量控制贯穿于整个检验过程中，工作人员应做好交接工作，密切配合，确保检验结果的可靠性和准确性。检验完成后，应仔细审查检验结果，若出现异议，应通过核对来确保检验结果的准确性。另外，检验人员还要加强与医生的沟通，对于错误现象应及时改进，不断提高免疫检验质量，为临床诊治提供可靠信息。在本研究中，通过对我院50例患者免疫检验的临床资料分析发现，检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等均是影响免疫检验结果的重要原因，在免疫检验过程中进行质量控制，可提高检验人员的综合素质，提高检验质量。
综上所述，采用质量控制进行免疫检验质量管理，可有效提高检验结果的可靠性，为临床诊断和治疗提供重要参考。
参考文献
[1] 张智英,朱瑞敏.临床免疫测定中存在的问题及对策[J].中国现代药物应用,2011,12(09):124-125.
[2] 任国庆.影响检验结果的因素分析及质量控制[J].临床合理用药杂志,2011,10(06):218-219.
[3] 马洪滨,王晗,刘立明.质量控制在临床免疫检验中的作用[J].医疗卫生装备,2012,16(04):162-163.】流行性感冒病毒是引起急性呼吸道感染的重要病原，传播迅速,常会引起暴发，甚至造成世界大流行。上世纪流感病毒就引起四次世界大流行，造成相当严重的损失[1]。目的 为了探究流感病毒流行和变异规律，了解其根据流感病毒核蛋白（NP），M1蛋白抗原性和基因特性的不同分为甲（A）乙（B）丙（C）三型[2],病毒具有抗原性变异的特性,提供控制流行的科学依据,对 2011—2013年度辽阳市流行性感冒的病原学监测结果进行分析。方法 采集流感样病例的咽拭子标本,采用real time-PCR进行核酸检测，分别用人红细胞、狗肾细胞(MDCK)进行病毒分离,采用血凝抑制方法(HAI)进行流感病毒型别鉴定。结果 2011年4月~2012年3月共检测辽阳市流感哨点医院咽拭子标本388份,核酸检测PCR阳性13例，分离到流感病毒10株,阳性分离率为2.58%,经分型鉴定A型H3N2亚型2株(20%),B型Victoria5株(50%),B型Yamagata3株(30%),A型H1N1亚型、新H1N1未检出；2012年4月~2013年3月共检测辽阳市流感哨点医院咽拭子标本593份,核酸检测PCR阳性40例，分离到流感病毒30株,阳性分离率为5.06%,经分型鉴定A型H1N1亚型2株(6.67%)，A型H3N2亚型,15株(50%),新H1N112株(40%)，B型Yamagata,1株(3.33%)，B型Victoria未检出。结论:2011~2012年度流感流行季节中辽阳市有流感流行,流行的优势毒株为B型,同时有A型H3N2亚型毒株的存在；2012~2013年度流感流行季节中辽阳市有流感流行,流行的优势毒株为A型H3N2亚型和新H1N1,同时有A型H1N1亚型、B型Yamagata毒株的存在。
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）39-0179-02
1.材料和方法
1.1标本
2011年4月1日-2012年3月31日采集的辽阳市中心医院咽拭标本388份；2012年4月1日-2013年3月31日采集的辽阳市中心医院咽拭标本593份。
1.2流感病毒核酸 real time-PCR
1.2.1采用Quant One step RT-PCR kit RNA 提取试剂盒提取流感病毒样本核酸。
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1.2.2QIAGEN real time (荧光定量PCR法)检测试剂盒扩增病毒核酸，反应体系见表1
组分 体积（μl） 2×QuantiText Probe RT-PCR Master Mix 12.5× 上游引物（40μM） 0.5× 下游引物（40μM） 0.5× Probe（10μM） 0.5× QuantiText RT Mix 0.25× Rneasy Free Water UP to 25 病毒核酸RNA 5.0×
1.2.3将上述加好的反应体系的反应管放于PCR仪进行反应，反应程序如下：见表2
步骤 反应温度(℃) 时间(min) 是否采集荧光 循环数 逆转录酶 60 5 否 1 50 30 否 1 预扩增 95 15 否 1 95 0.25 否 45 扩增及荧光收集 55 0.5 否 45 72 0.5 是 45 72 5 否 1
1.2.4结果判定及标准
对照：阴性对照无CT值或CT值为零，阳性对照CT值＜30。
样品：CT值≤35报告为阳性。
样品：37≤CT值≤40为灰区，需重新采样检测。
样品：无CT值或CT值为零报告为阴性。
1.3流感病毒分离
上述PCR结果为阳性的样本接种培养好的MDCK细胞生长液，观察细胞病变情况。
1.3.1将已长成单成的MDCK细胞生长液，用DPBS液洗两遍。
1.3.2每瓶接种标本0.5ml，每个标本接种1瓶，轻摇，使标本完全覆盖细胞，置35℃吸附2小时。
1.3.3倒掉感染液，用DPBS液洗两遍，每瓶加入含2μg/ml胰酶的病毒维持液10ml，35℃培养。
1.3.4次日起每天观察有无细胞病变（CPE）并记录，如病变明显细胞脱落可收获并做血凝，如未有病变，继续观察7日收获做血凝。
1.4血凝实验
1.4.1取聚乙烯96孔板。
1.4.2从第二排起每孔加50μL生理盐水。
1.4.3第一排每孔加入待测物100μL。
1.4.4从一排取50μL向后微倍比稀释至最后一排50μL，弃去。
1.4.5每孔加1.5%豚鼠血球50μL，混匀，置室温1小时看结果。
2.结果
2011年4月~2012年3月共检测咽拭子标本388份,核酸检测PCR阳性13例，分离到流感病毒10株,阳性分离率为2.58%；2012年4月~2013年3月共检测辽阳市咽拭子标本593份,核酸检测PCR阳性40例，分离到流感病毒30株,阳性分离率为5.06%。2011~2013年度流感流行季节中辽阳市均有流感流行,流行的优势毒株不同，2011~2012流行的优势毒株为B型,同时有A型H3N2亚型毒株的存在；2012~2013年度流行的优势毒株为A型H3N2亚型和新H1N1,同时有A型H1N1亚型、B型Yamagata毒株的存在。详细情况见表3：
年份 标本数 量(份) PCR结果 分离毒株数 分离率 型别 甲1 甲3 新H1N1 BV BY 株 % 株 % 株 % 株 % 株 % 11-12 388 13 10 2.58% 0 0 2 20% 0 0 5 50% 3 30% 12-13 593 40 30 5.06% 2 6.67% 15 50% 12 40% 0 0 1 3.33% 3.讨论
2011-2013年两年间辽阳市均有流感病毒流行,通过实验室检测得知两年的流行病毒毒株型别不同,证实了流感病毒抗原性变异的特性。2011年-2012年采用人红细胞做的血抑实验，分离率为2.58%；2012年-2013年采用豚鼠红细胞做的血抑实验，分离率为5.06%。两年分析比较得出，采用豚鼠血做血抑实验明显优于人红细胞做血抑实验。
参考文献
[1] Lamb R, Krug RM. Orthomyxoviridae; the Viruses and their replication[M]. In: Fields BN.3rd ed. Philadelphia; Lippincott,2001:1487-1532 .
[2] WS285-2008流行性感冒诊断标准 2.1
论文作者:刘喜萍
论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年第39期供稿
论文发表时间:2014-4-9
标签：标本论文; 免疫论文; 辽阳市论文; 流感论文; 质量控制论文; 病毒论文; 阳性论文; 《中外健康文摘》2013年第39期供稿论文;