刘胜楠[1]2012年在《Toll样受体2、4及核因子-κB在溃疡性结肠炎黏膜组织中的表达及临床意义》文中研究表明目的：探讨Toll样受体2、4(TLR2、TLR4)与核因子-κB (NF-κB)在溃疡性结肠炎(UC)黏膜组织中的表达,以及叁者在UC发病机制中的作用。方法：收集山东大学齐鲁医院明确诊断的UC患者70例及非UC对照组44例。采用免疫组化法检测70例UC患者结肠黏膜组织TLR2、TLR4与NF-κB的表达水平,并与44例非UC正常黏膜组织进行对比。采用χ2检验比较UC组、正常对照组结肠黏膜组织TLR2、TLR4和NF-κB的表达有无差别,比较UC组不同病变程度的结肠黏膜TLR2、TLR4和NF-κB的表达,采用Pearson秩相关分析TLR2和NF-κB、TLR4和NF-κB的相关性。结果：UC组与对照组中TLR2、TLR4和NF-κB蛋白均表达于细胞质和细胞核,阳性染色为黄色颗粒,在UC组叁者主要在结肠黏膜表面上皮细胞、隐窝上皮、固有层单个核细胞上显着表达,在对照组结肠黏膜表面上皮细胞、固有层内散在的炎性细胞叁者只微弱表达或不表达。叁者在UC和正常组织中的表达均存在统计学差异(P<0.01)。活动期UC黏膜组织中TLR2、TLR4和NF-κB蛋白阳性表达率分别为100%、92.9%和100%,而非活动期分别为28.6%、38.1%和38.1%。两组差异均有统计学意义(P值<0.01)。且随UC内镜分级增高,TLR2、TLR4和NF-κB的表达阳性细胞数均呈逐渐增加,Ⅲ级、Ⅱ级高于Ⅰ级(P<0.05,P<0.05),III级高于II级(P<0.05)。70例UC患者中TLR2、TLR4和NF-κB蛋白表达均阳性者34例,均阴性者22例,Pearson相关分析显示,UC组织中NF-κB与TLR2、TLR4表达均呈正相关(r=O.823,P<0.01；r=0.752,P<0.01)。结论：UC是一种累及直肠和结肠黏膜的炎症性疾病。目前多数学者认为,机体免疫系统对肠道正常菌群的免疫反应异常是其发病的主要因素。TLRs是启动天然免疫防御反应的关键因素,其通过识别PAMPs及其相应的配体来启动天然免疫反应。TLRs选择性结合配体后,通过信号转导介导肠道黏膜的免疫反应。具体过程包含多条相互联系的信号转导通路,其中有关TLRs-MyD88-IRAK-NF-κB转导途径的研究较深入。TLRs与相应配体结合后,通过此途径激活各种致炎因子(如TNF-α和IL-12)的转录,介导肠道黏膜的天然免疫反应。对照组肠黏膜肠上皮细胞只微量表达或不表达TLR2、TLR4和NF-B,而UC患者肠黏膜IECs叁者显着表达,两组差异有统计学意义。UC组TLR2、TLR4和NF-κB的表达在内镜分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间差异有统计学意义,且其表达水平与UC内镜分级及病情活动度密切相关。TLR2、TLR4均与NF-κB呈正相关,提示TLR2、TLR4均通过一系列信号转导激活NF-κB,从而介导肠道黏膜的免疫反应。
张露艺[2]2014年在《TOLL样受体7及TOLL样受体9在脂多糖诱导的AR42J细胞炎症效应中的表达及作用》文中研究指明目的观察TOLL样受体7(Toll Like Receptor7, TLR7)、TOLL样受体9(Toll Like Receptor9, TLR9)、核因子-κB P65（Nuclear Factor-κB P65, NF-κBP65）、肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）在脂多糖诱导的AR42J细胞急性胰腺炎模型中的表达变化，探讨TLR7、TLR9在急性胰腺炎发病机制中的作用及可能的作用机制。方法取对数生长期的AR42J细胞用6孔细胞培养板传代培养24小时后，分别用含脂多糖浓度为0mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L的培养液刺激AR42J细胞，构建体外急性胰腺炎细胞模型,孵育24小时后，收集细胞培养上清液，离心留取上清，用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α的含量；收集细胞，提取细胞总RNA，用RT-PCR法分别检测细胞中TLR7、TLR9、NF-κB P65mRNA的表达量变化；提取细胞总蛋白，用Western Blot法分别检测细胞中TLR7、TLR9、NF-κB P65蛋白质表达水平变化。结果与脂多糖浓度为0mg/L的空白对照组相比，其余各组TLR7、TLR9、NF-κB P65的mRNA和蛋白表达量都随着脂多糖浓度升高而增加，脂多糖浓度为100mg/L时达到最大值，各组间的差异有统计学意义（均P＜0.05）。TLR7、TLR9与NF-κB P65在mRNA、蛋白的表达水平上皆有正相关性（mRNA：r=0.786，0.762；蛋白：r=0.801，0.720；均P＜0.05）。细胞培养上清液中TNF-α的含量呈脂多糖浓度依赖性增加，当脂多糖浓度为100mg/L时达到最大值，各组间的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论（1）脂多糖诱导的AR42J细胞急性胰腺炎模型中，TLR7及TLR9表达明显上调，提示两者可能在急性胰腺炎疾病发展中发挥重要作用。（2）TLR7、TLR9可能通过作用于NF-κB上调下游炎症因子的产生，而参与急性胰腺炎的炎症反应。
刘朝霞[3]2009年在《肠愈宁对溃疡性结肠炎大鼠模型细胞因子网络调控的研究》文中认为目的探讨溃疡性结肠炎(UC)的基本病机，研究以清热解毒、健脾燥湿为立法原则所创立的经验方剂肠愈宁对活动期UC细胞网络因子TLR4，NF-κB，TNF-α的调控作用，阐明肠愈宁治疗活动期溃疡性结肠的作用机制。方法采用改良复合法(2，4二硝基氯苯(DNCB)、乙酸+高脂饮食)造模方法制作符合湿热蕴结型的UC大鼠模型，并采用具有清热解毒、健脾燥湿功效的中药肠愈宁颗粒进行治疗。治疗时，分别给予低剂量(1 0g／kg·d)和高剂量(20g／kg·d)的肠愈宁颗粒灌胃，并以西药SAS P(0．5g／k g·d)作为阳性对照药，同时设模型组和空白组进行对照。造模时间为1 6天，造模成功后给予治疗4周。造模期间及治疗结束后分别观察炎症活动指数(DAI)。并于治疗结束后处死大鼠，进行炎症大体形态损伤评分，组织学损伤评分，观察肠黏膜病理变化情况，以及对组织TNF-α、TLR 4，NF-κB的影响。结果统计学分析认为西药组、中药低剂量组、中药高剂量组与模型对照组比较有显着性差异(P＜0．01)，而西药组、中药低剂量组、中药高剂量组叁组无明显差异，说明肠愈宁颗粒与柳氮磺胺吡啶对UC大鼠均具有治疗作用；西药组、中药低剂量组、中药高剂量组与模型对照组比较有显着性差异(P＜0．01)，说明肠愈宁对UC细胞网络因子TLR 4，NF-κB，TNF-α有调节作用。结论1．活动期UC的中医病机主要为湿热蕴结兼有脾虚，湿热蕴结是UC活动期的病理特点，脾虚是UC的发病基础和必然转归。2．大鼠结肠黏膜的细胞网络因子TLR 4、NF-κB、TN F-α在UC活动期处于高表达，可能是UC发病的重要机制。3．肠愈宁对活动期UC大鼠模型有治疗作用，对于DAI评分、大体评分及炎症评分都有显着的降低作用。4．肠愈宁对活动期溃疡性结肠炎大鼠黏膜中的TNF-α的表达有抑制作用。5．肠愈宁对活动期溃疡性结肠炎大鼠黏膜中的TLR 4的表达有抑制作用。6．肠愈宁对活动期溃疡性结肠炎大鼠黏膜中的NF-κB的表达有抑制作用。7．肠愈宁对活动期UC大鼠结肠黏膜的细胞网络因子有调控作用，该作用可能是肠愈宁颗粒治疗UC的主要机制之一。
钟宇, 郑学宝, 叶华, 郭蒙, 吴琼[4]2019年在《白头翁汤对溃疡性结肠炎大鼠的疗效及免疫机制的影响》文中认为目的:探讨白头翁汤对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的治疗效果及免疫机制。方法:采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)加醋酸/乙醇复合法建立UC大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成模型组、美沙拉嗪组和白头翁汤高、中、低剂量组,正常大鼠为对照组。美沙拉嗪组给予美沙拉嗪(0. 5 g·kg-1)灌胃,白头翁汤高、中、低剂量组分别给予白头翁汤(10,5,2. 5 g·kg-1)灌胃,其余各组给予双蒸水。连续给药7 d后,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数;大鼠麻醉后腹主动脉取血,处死大鼠,取结肠测长度,肉眼观察结肠黏膜损伤程度及大体评分;光镜下观察结肠组织病理形态学变化及病理评分;采用分光光度计比色法检测血清和结肠组织匀浆液中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清和结肠组织匀浆液P-选择素、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和血栓素B2(TXB2)水平;免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测结肠组织Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组出现稀便、腹泻及血便等症状,DAI,结肠大体评分及病理学评分显着增高(P <0. 01);白头翁汤组明显改善UC症状,DAI,结肠大体形态及病理学评分显着下降(P <0. 01)。模型组血清和结肠组织中MPO,P-选择素,MIF和TXB2的含量较正常组显着升高;白头翁汤高、中剂量组能显着降低MPO,P-选择素,MIF和TXB2的水平。模型组结肠组织中TLR4和NF-κB蛋白表达量均显着高于正常组;高、中、低剂量组均能明显抑制TLR4和NF-κB的表达。结论:白头翁汤可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,下调P-选择素,MPO,MIF,TXB2的水平,促进肠道黏膜的的修复,减轻结肠炎症反应。
参考文献：
[1]. Toll样受体2、4及核因子-κB在溃疡性结肠炎黏膜组织中的表达及临床意义[D]. 刘胜楠. 山东大学. 2012
[2]. TOLL样受体7及TOLL样受体9在脂多糖诱导的AR42J细胞炎症效应中的表达及作用[D]. 张露艺. 广西医科大学. 2014
[3]. 肠愈宁对溃疡性结肠炎大鼠模型细胞因子网络调控的研究[D]. 刘朝霞. 黑龙江中医药大学. 2009
[4]. 白头翁汤对溃疡性结肠炎大鼠的疗效及免疫机制的影响[J]. 钟宇, 郑学宝, 叶华, 郭蒙, 吴琼. 中国实验方剂学杂志. 2019