成惠
(南京中医药大学 210046)
【摘要】目的 对不同来源的金银花类药材的抗氧化活性进行研究,比较金银花和山银花的活性,根据研究结果为临床用药和以山银花为原料的新药开发提供依据。方法 采用比色法对不同来源的金银花类药材提取液的抗氧化活性进行测定。结果 抗氧化活性:山银花 >金银花 。
【关键词】 金银花 山银花 抗氧化活性
【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)02-0164-01
1. 实验部分
1.1 仪器与材料
酶标仪,数据采集采用Gen5软件,96孔板,移液器,KH-500DB型超声波提取器,百万分之一电子天平。DPPH,甲醇为色谱纯
金银花类药材:红腺忍冬,华南忍冬,灰毡毛忍冬,忍冬和黄褐毛忍冬。
1.2 金银花类药材样品制备
精密称取经恒温干燥的金银花类药材粉末0.5 g,用70%甲醇15 mL浸渍1 h,然后于避光处超声提取45 min,13000 r/min离心8 min,取出上清500μL,于45℃,氮吹至干,加入1 mL甲醇超声溶解即得,于-70℃避光保存,用时各储备液用甲醇稀释至所需浓度。
1.3 溶液配制
DPPH溶液配制:精密称取3.94 mg DPPH粉末于50 mL棕色容量瓶,定容即得0.2 mmol/L溶液,该溶液每天现用现配,暂时于-20℃下避光保存备用。
1.4 金银花类药材总提物抗氧化活性测定
于96孔板上按要求依次加入各种溶液使终体积为200 μl,样品组(sample):100 μL样品溶液+ 100 μL DPPH溶液;DPPH阴性对照组(blank):以甲醇代替DPPH溶液以扣除供试品溶液本身颜色对实验的干扰;甲醇对照组组(control):以甲醇代替样品溶液(即浓度为0)作为空白。将96孔板放入酶标仪震荡5 min,充分反应,30 min后于517 nm测吸光值A,每组平行设3个复孔。重复测定3次,取平均值。L-ascorbic acid 作为试验的阳性对照
反应前DPPH的A值与反应后DPPH的A值的变化值可以用下列公式来计算自由基清除率:
自由基清除率=[Acontrol-(Asample-Ablank)]/ Acontrol×100%
测定不同来源的金银花类药材总提物的抗氧化活性,计算IC50值。
2. 结果与讨论
2.1 金银花类药材抗氧化活性测定
本实验收集的药材样本提取液抗氧化活性测定结果如表1所示,所收集的的金银花类药材样品均有较好的抗氧化活性。我们将活性最佳的黄褐毛忍冬的IC50值与其余各个种的值做t检验,相比较,发现不同来源的金银花类药材样品的抗氧化活性存在显著差异(p<0.005)。
表1不同来源金银花类药材提取液抗氧化活性IC50的测定结果
本次实验中不同来源的金银花类药材活性顺序依次为黄褐毛忍冬>灰毡毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬>忍冬,即山银花>金银花。
2.2 结论
对黄褐毛忍冬,华南忍冬,红腺忍冬,灰毡毛忍冬,忍冬五中金银花类药材的主要抗氧化活性成分进行研究,阐明不同来源药材抗氧化活性的差异。科学、准确的评断中药的抗氧化活性,更清楚地区分不同金银花类药材药用目的。从实验结果可得出山银花的抗氧化活性优于金银花,为临床和市场开发以山银花为主要原料的抗氧化性药物提供有利依据。
论文作者:成惠
论文发表刊物:《医药前沿》2014年第2期供稿
论文发表时间:2014-4-2
标签:忍冬论文; 活性论文; 抗氧化论文; 溶液论文; 类药论文; 甲醇论文; 黄褐论文; 《医药前沿》2014年第2期供稿论文;