广西横县妇幼保健院 广西横县 530300
摘要：淋病是临床常见的泌尿生殖系统传染性疾病，致病菌为淋病奈瑟氏菌，性传播是其主要传播途径，正确诊断并给予积极治疗是保障患者疗效及预后的关键因素。以往临床主要根据患者临床表现、病史及生活史判断其是否患有淋病，但由于患者间存在个体差异，部分患者并无典型临床表现，为诊断及治疗工作带来一定困难。直接涂片法是以往应用较广的淋病奈瑟氏菌诊断方法，但误诊、漏诊率则较高，不利于患者获得正确诊断。本文将分别研究细菌培养、荧光定量聚合酶链反应、单克隆抗体免疫荧光技术应用于淋病奈瑟氏菌实验室检测优缺点，探讨淋病奈瑟氏菌三种检测方法应用效果，为提高淋病检出率提供可靠依据。
关键词：淋病奈瑟氏菌；检测方法；应用效果
淋病是临床常见的泌尿生殖系统传染性疾病，致病菌为淋病奈瑟氏菌（neisseria gonorrhoeae，NG），性传播是其主要传播途径，正确诊断并给予积极治疗是保障患者疗效及预后的关键因素[1]。本文将探讨淋病奈瑟氏菌三种检测方法及应用效果，为提高淋病检出率提供可靠依据，现总结如下。
1 概述
近年来，由于多种因素（生活习惯、结构、环境等）不断变化，淋病发生率呈显著上升趋势，已引起广大医务工作者高度重视。研究表明，以往临床主要根据患者临床表现、病史及生活史判断其是否患有淋病，但由于患者间存在个体差异，部分患者并无典型临床表现，为诊断及治疗工作带来一定困难。
直接涂片法（革兰氏染色，Gram）操作简单、使用方便，是以往应用较广的淋病奈瑟氏菌诊断方法，经镜检可见多形核白细胞内存在格兰仕阴性双球菌即为阳性，但女性患者由于特殊解剖结构因此阴道分泌物标本污染率较高，因此应用此法检测淋病奈瑟氏菌阳性检出率较低，误诊、漏诊率则较高，不利于患者获得正确诊断。研究表明[2]，因淋病奈瑟氏菌感染所致淋病具有合并感染特点，即一种病原体感染可作为危险因素增加另一种病原体感染几率，因此尽早诊断对患者治疗及预后均具有显著重要性。随着临床医学水平不断提高，实验室细菌学检查技术已广泛应用于疾病诊断及治疗过程中并获得显著效果。
2 淋病奈瑟氏菌实验室检测方法
2.1 细菌培养
细菌培养（germiculture）是临床用于诊断淋病的“金标准”，目前已在各级医疗机构推广使用并为医生提供准确诊断依据。标本取女性阴道分泌物或宫颈粘液、男性尿道分泌物或前列腺液，将样本采集后放置于无菌试管中根据相关操作规程完成淋病奈瑟氏菌细菌培养工作，于相应培养基中接种标本后经分离培养，根据菌落形态及涂片染色给予初步判断。临床实践证明，细菌培养对于无任何临床表现或表现轻微的轻度淋病患者（男性或女性）也具有较高敏感性。
但有研究显示，经细菌培养检测淋病奈瑟氏菌准确率仍较低，分析原因可能为[3]：①由于淋病奈瑟氏菌具有较低的外界抵抗力，且对生长环境要求较高，经细菌培养后敏感性将受到多种因素制约，易由于培养过程中条件未达标而导致假阴性；②疑似淋病患者于本次检查前已接受抗生素药物非正规治疗，对淋病奈瑟氏菌检出率将造成较大影响，假阴性发生率较高。此外有研究显示，临床实验室对淋病奈瑟氏菌进行检测时所需步骤繁琐，获得结果需经历较长时间，不利于淋病患者尽快确诊并给予积极救治，易贻误患者治疗时机造成严重后果。
2.2 荧光定量聚合酶链反应
荧光定量聚合酶链反应（realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ PCR）属于体外DNA扩增试验，通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。
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RTFQ PCR优点：①对标本品质要求较低，标本中细菌无论活性如何均可准确检出，有效避免细菌培养检测淋病奈瑟氏菌过程中对标本及培养环境依赖性；②对标本量要求较低，利用放大作用仅需少量标本即可完成检验，克服因标本采集量过少导致检测结果不准确情况；③具有较高的敏感性及特异性，淋病奈瑟氏菌检出率较高。
研究显示，虽然RTFQ PCR具有上述较多优点，是继细菌培养后应用于淋病奈瑟氏菌较为理想的检测方法，但其仍然具有如下不足之处[4]：①对实验所需仪器要求较高，不利于各级医疗机构推广使用；②无法完成药敏实验，不利于医生选择合适抗菌药物进行治疗；③实验时需同时给予阴性、阳性对照，待阴性及阳性检测结果符合要求后方可提供相关报告，实验所需时间较长；④成本高，对患者造成一定经济负担；⑤操作步骤复杂，易出现错误操作造成假阴性或假阳性。
2.3 单克隆抗体免疫荧光技术
单克隆抗体免疫荧光技术（Monoclonal Antibody Immunofluorescence Assay，Maby IFA）属于标记检验技术，是结合生物化学、免疫学、荧光显微镜技术等学科的综合性微生物检测方法。研究表明，单克隆抗体免疫荧光技术检测原理为将对抗原抗体活性未产生影响的荧光素直接于抗体上标记，待其与标本中抗原（相应）相结合后于荧光显微镜下将观察出特异性荧光成像，根据成像结果即可获得准确判断。
单克隆抗体免疫荧光技术优点如下[5]：①对标本中菌体活力要求较低甚至无要求；②无需经周期性孵育工作显著缩短检测时间；③具有较为理想的敏感性及特异性；④操作简单、使用方便、成本低廉，有效降低患者及医疗机构经济压力；⑤对实验条件及设备要求较低，利于临床普及使用。有研究显示，目前临床常用的单克隆抗体免疫荧光技术包括包括Protocal法、Marsshall法、透析标记法等多种方法，其中Protocal法相较于其他两种方法具有更为简便的操作过程、获得检测结果所需时间最短、利于对批间差进行有效控制等因素，是更为理想的淋病奈瑟氏菌检测方法。
3 小结
研究表明[6]，实验室检测是用于临床诊断疾病的主要依据，其检测结果准确性将直接对患者治疗及预后效果造成影响，也是导致医患纠纷的主要原因。随着临床医学水平逐渐提高、人们自我保护意识逐渐增强、医生对实验室检测结果要求上升等多因素作用，直接涂片法已不再适用于现今医学领域对淋病奈瑟氏菌检测工作，逐渐被细菌培养、荧光定量聚合酶链反应、单克隆抗体免疫荧光技术等先进检测技术所取代。本文研究可知，淋病奈瑟氏菌经单克隆抗体免疫荧光技术相较于细菌培养具有更为理想的检出正确率，且较荧光定量聚合酶链反应具有更为优越的经济价值，已逐渐成为临床用于淋病奈瑟氏菌实验室检测的首选方法。
综上所述，临床医生应准确掌握淋病奈瑟氏菌各类检测方法优缺点，根据实验室自身及患者实际情况选择合适的方法进行准确检测，提高疑似患者临床诊断正确率使其获得尽早救治，保障患者生活质量及生命安全，值得今后应用。
参考文献：
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[2]Csaki A，Moiler R，Fritzsche W.Nanoparticle-based optical detection of molecular interactions for DNA-chip technology[J]．Proceeding of SPIE，2012，46（26）：17-22.
[3]Tabrizi SN，Chen S，Tapsall J，et a1．Epidemiology of sexually transrnitted infections，HIV，and related highrisk behaviors among female sex workers in Guangxi autonomous region，China[J]．Japanese journal of infectious diseases，2012，65（1）：75-78.
[4]蒋丽芳，乔玉慧，胡晶莹．52例细菌性阴道病的检测结果分析[J].中原医刊，2014，31（7）：23-24.
[5]莫俊銮，张畸君，杨慧，等．1010例性病门诊患者泌尿牛殖道病原体感染分析[J].中国艾滋病性病，2012，18（12）：871-873.
[6]徐新蓉，马 萍，龚同富，等．不同症状淋球菌感染患者实验室检测方法选择与比较[J]．国际检验医学杂志，2012，33（21）：2637-2638.
论文作者:莫鸿健
论文发表刊物:《健康世界》2015年4期
论文发表时间:2015/10/26
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