周晋华, 张安成[1]2003年在《流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞的免疫变化》文中研究指明目的 研究肺癌及肺部一般炎症患者外周血细胞免疫的变化及临床意义。方法 采用流式细胞术 (FCM)对 35例原发性肺癌、38例肺部一般炎症患者的外周血CD3 、CD4、CD8、CD16+ 56进行定量检测。结果 恶性肿瘤患者外周血CD4、CD4/CD8、CD3 、CD56+ 16均显着性低于健康对照组 (P <0 0 1) ;而CD8则上升 (P <0 0 5 ) ,均有统计学意义。肺部一般炎症患者外周血CD3 、CD4、CD4/CD8较健康人降低 ,CD8则升高 ,但无显着性差异 (P >0 0 5 ) ;而CD56+ 16较健康人也降低 ,但 (0 0 1<P <0 0 5 )。肺癌患者外周血CD3 、CD4、CD4/CD8、CD56+ 16较肺部一般炎症患者显着性降低 (P <0 0 1) ;而CD8则升高 (0 0 1<P <0 0 5 )。结论 流式细胞术可作为检测免疫功能的有效方法。肺癌患者存在细胞免疫功能降低 ;CD8上升 ,可能与TS及肿瘤刺激TC同时增高所致 ;肺癌患者的免疫抑制远较肺部一般炎症强 ;肺癌患者NK细胞的降低较肺部一般炎症患者明显的多 ;在临床中动态地观察各项细胞免疫指标 ,对判断病情、疗效和预后及提供肺癌的免疫治疗依据都具有一定的意义
周晋华[2]2001年在《流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞免疫变化及意义》文中指出目的：研究肺癌及肺部一般炎症患者外周血细胞免疫的变化及临床意义。方法：采用流式细胞术（FCM）对35例原发性肺癌38例肺部一般炎症患者的外周血CD_3、CD_4、CD_8、CD_(16+56)进行定量检测。结果：恶性肿瘤患者外周血CD_4、CD_4/CD_8、CD_3、CD_(56+16)均显着性低于健康对照组（P＜0.01）；而CD_8则上升（P＜0.05），均有统计学意义。肺部一般炎症患者外周血CD_3、CD_4、CD_(4/)CD_8较健康人降低，CD_8则升高，但无显着性差异（P＞0.05），而CD_(16+56)较健康人也降低，但（0.01＜P＜0.05）。肺癌患者外周血CD_3、CD_4、CD_(4/)CD_8、CD_(16+56)较肺部一般炎症患者着性降低（P＜0.01），而CD_8则升高（0.01＜P＜0.05）。结论：流式细胞术可作为检测免疫功能的有效方法。肺癌患者存在细胞免疫功能降低；CD_8上升，可能与T_s及肿瘤刺激T_c同时增高所致；肺癌患者的免疫抑制远较肺部一般炎症强；肺癌患者NK细胞的降低较肺部一般炎症患者明显的多；在临床中动态地观察各项细胞免疫指标，对判断病情，疗效和预后及提供肺癌的免疫治疗依据都具有一定的意义。
周晋华[3]2001年在《流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞的免疫变化》文中研究指明目的 :研究肺癌及肺部一般炎症患者外周血细胞免疫的变化及临床意义。方法 :采用流式细胞术 (FCM )对35例原发性肺癌、38例肺部一般炎症患者的外周血CD3、CD4 、CD8、CD16+ 56进行定量检测。结果 :恶性肿瘤患者外周血CD4 、CD4 /CD8、CD3、CD15+ 16均显着性低于健康对照组 (P <0 0 1) ;而CD8则上升 (P <0 0 5 ) ,均有统计学意义。肺部一般炎症患者外周血CD3、CD4 、CD4 /CD8较健康人降低 ,CD8则升高 ,但无显着性差异 (P >0 0 5 ) ,而CD16+ 56较健康人也降低 ,但 ( 0 0 1<P <0 0 5 )。肺癌患者外周血CD3、CD4 、CD4 /CD8、CD16+ 56较肺部一般炎症患者着性降低 (P <0 0 1) ,而CD8则升高 ( 0 0 1<P <0 0 5 )。结论 :流式细胞术可作为检测免疫功能的有效方法。肺癌患者存在细胞免疫功能降低 ;CD8上升 ,可能与Ts及肿瘤刺激Tc同时增高所致 ;肺癌患者的免疫抑制远较肺部一般炎症强 ;肺癌患者NK细胞的降低较肺部一般炎症患者明显的多 ;在临床中动态地观察各项细胞免疫指标 ,对判断病情、疗效和预后及提供肺癌的免疫治疗依据都具有一定的意义
汪珺[4]2017年在《肺癌围手术期免疫功能变化及其与肿瘤转移相关性研究》文中认为[目的]探讨肺癌患者围手术期细胞免疫、髓系抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)及其亚群以及调节性 T 细胞(Regulatory T cells,Treg)的变化;手术诱导MDSCs对肿瘤生长和肿瘤血管生成的影响;围手术期MDSCs变化与手术后肿瘤转移的相关性以及骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对手术诱导MDSCs和手术后肿瘤转移的影响;围手术期MDSCs及其单核样MDSCs(Monocytic MDSCs,M-MDSCs)、粒细胞样 MDSCs(Granulocytic MDSCs,G-MDSCs)亚群与 Treg 变化的相关性。[方法]对111例肺癌患者,分别于术前(T1)、术中(T2)、术后第1天(T3)、第3天(T4)和第7天(T5)采用血细胞分析和流式细胞术(Flow cytometry,FCM)测定外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中淋巴细胞各亚群、CDl1b+CD33+HLA-DR-MDSCs及其亚群M-MDSCs和G-MDSCs、Treg的浓度和百分比。ELISA法和流式液相多重蛋白定量技术检测血清VEGF和Th1/Th2细胞因子浓度。围手术期CD11b+CD33+HLA-DR-细胞与人肺癌细胞A549接种至裸鼠皮下观察其对肿瘤生长和肿瘤血管生成的影响。C57BL/6小鼠经尾静脉注射路易斯肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞后分为4组:对照组(C组)、麻醉组(A组)、麻醉后开腹组(AL组)以及麻醉后开腹并肝叶切除组(ALH组)。AL组小鼠手术后分为两组:术后无治疗组(AL组)和术后给予同系BMSCs治疗组(ALB组)。FCM检测小鼠PBMCs中Gr-1+CD11b+MDSCs细胞的含量;第14天时计数小鼠肺表面转移灶。小鼠骨髓细胞体外诱导MDSCs体系中加入BMSCs共培养的方法探讨BMSCs对MDSCs生成的影响。分析肺癌患者围手术期MDSCs及其亚群M-MDSCs、G-MDSCs与Treg相关性,FCM和免疫磁珠法分别分选T1-T5时MDSCs与T1时CD4+细胞,将MDSCs与CD4+细胞混合培养至第5天时FCM检测Treg。[结果]肺癌患者CD3+ T细胞、NK细胞浓度术后较术前均显着降低(P<0.05);NKT细胞及CD4/CD8比值术后与术前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。血清中Th2类细胞因子IL-5和IL-10浓度术后较术前均显着升高(P<0.05)。肺癌患者 T3-T5 时 PBMCs 中 CDllb+CD33+HLA-DR-MDSCs 细胞及M-MDSCs亚群百分比及浓度较T1均显着升高(P<0.01);T5时Treg浓度较T1显着升高(P<0.05);T3-T5时外周血清VEGF浓度较T1均显着升高(P<0.05)。裸鼠致瘤实验结果显示,术后MDSCs促肿瘤生长和肿瘤血管生成能力较术前MDSCs增强。与C组相比,AL和ALH组小鼠肺转移灶均显着增多(P<0.05);且ALH组较A组显着增多(P<0.05)。手术后A、AL和ALH组小鼠PBMCs中Gr-1+CD11b+细胞与C组相比均显着升高(P<0.05)。第14天时,AL 及 ALB 组小鼠肺转移灶分别为(15.38±1.12)和(4.38±0.73)(P<0.01)。ALB组小鼠PBMCs中Gr-1+CD11b+细胞与AL组相比显着降低(P<0.01)。小鼠骨髓细胞体外诱导MDSCs体系中加入BMSCs可显着抑制MDSCs增殖。T3-T5时 MDSCs、M-MDSCs 与 Treg 均呈正相关(P<0.05)。T3-T5 时 M-MDSCs 体外诱导Treg细胞数较T1时均显着增多(P<0.01)。[结论]肺癌患者术后细胞免疫功能抑制,Th1/Th2平衡向Th2偏移;手术诱导MDSCs、M-MDSCs较术前升高且其促肿瘤血管生成和肿瘤生长作用增强。手术诱导MDSCs促小鼠肿瘤肺转移形成,BMSCs可以抑制MDSCs的生成进而抑制小鼠手术后肺转移形成。肺癌患者术后MDSCs中M-MDSCs亚群诱导Treg生成。
乐涵波, 张永奎, 韩辉, 王朝晔, 陈志军[5]2004年在《肺癌患者外周血细胞免疫功能检测及其临床意义》文中进行了进一步梳理肿瘤患者有免疫功能状态紊乱和低下,而免疫功能状态在一定程度上可预示肿瘤的发展与预后[1]。作者应用流式细胞术(FlowCytometerFCM)对43例肺癌患者外周血细胞免疫功能变化进行检测,并比较其与正常人及淋巴结转移的关系。1资料和方法1.1一般资料
周振英, 吴晓柳, 朱月清, 沈宗丽, 王亚平[6]2001年在《肺癌患者外周血细胞CD_(25)、CD_4表达和Apo水平的检测》文中研究表明目的 :研究肺癌患者外周血细胞CD2 5、CD4表达规律和Apo水平。方法 :采用流式细胞术对10 1例肺癌患者外周血细胞CD2 5+、CD3+ CD4+表达率和Apo水平进行了检测。并分析了肿瘤转移状况和化疗对上述 3项指标的影响。结果 :肺癌患者外周血细胞CD2 5+和CD3+ CD4+率均显着低于正常对照组 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,Apo显着高于正常对照组 (P <0 0 1)。化疗者的 3项指标均显着高于未化疗者 (P <0 0 1,P <0 0 5和P <0 0 5 ) ;在未化疗患者中 ,有转移者和无转移者之间的CD2 5和CD3 CD4表达率差异均无显着性 (P >0 0 5 ) ,而转移者的Apo却显着高于无转移者 (P <0 0 1) ;在化疗患者中 ,转移者的Apo表达率显着高于无转移者 (P <0 0 1) ,CD2 5+表达率低于无转移者 (P <0 0 5 ) ,而CD3+ CD4+二者差异却无显着性 (P >0 0 5 )。结论 :肺癌能抑制患者外周血细胞CD2 5+和CD3+ CD4+细胞进一步降低 ,但却引起Apo明显升高。化疗可以提高肿瘤患者CD2 5+、CD3+ CD4+和Apo的检出率 ,使机体免疫功能能有所恢复
邹霞[7]2014年在《肺癌患者化疗过程中淋巴细胞亚群动态监测》文中进行了进一步梳理目的：利用流式细胞仪动态监测肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞亚群计数比例以及其绝对值变化,同时结合患者其它病理分型、分期、血常规检查等病例资料,观察肺癌患者化疗过程免疫功能变化规律,以期为肺癌的早期诊断、观察疗效及寻求新的治疗方法等提供依据。方法：收集我院2013年4月—2013年10月经病理或细胞学确诊首次诊断的原发性肺癌患者22例,及同期健康体检者20例,分为两组,肺癌组和健康对照组。所有对象采集空腹晨血,抗凝,流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞表面抗原CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+, NK细胞表面抗原CD16+CD56+,B细胞表面抗原CD19+的比例和绝对计数值,全自动血细胞分析仪测定外周血WBC、NEU和LYM,比较肺癌患者不同性别(男/女)、年龄(≥65,<65)、病理类型(SCCL/NSCCL)、病理分期(早期/晚期)肺癌患者淋巴细胞亚群表达情况。针对不能手术而只接受化疗的肺癌患者,分别采集其化疗前、化疗后早期(化疗后4-7天,SCCL开始化疗后第4天,NSCCL第7天),化疗后晚期(化疗后21天)空腹晨血,流式细胞仪检测淋巴细胞亚群比例及绝对计数。所有研究数据采用SPSS17统计学软件进行处理分析。结果：1、与对照组比较,肺癌患者外周血CD3+、CD3+CD8+淋巴细胞亚群比例显着升高,(t值分别为1.446、3.524,P值为0.015、0.001),NK细胞比例明显减少(t=-3.320,P=0.002),两组CD3+CD4+、CD19+、CD4+/CD8+比较,其比例未发现明显差异(t值分别为2.542、1.109、1.123,P>0.05),2、22例肺癌患者所有被检测淋巴细胞亚群包括CD3+、CD3+CD4+、 CD3+CD8+、CD16+CD56+及CD19+,其绝对计数都显着少于健康对照组(t值分别为-4.139、-4.154、-2.686、-6.607、-3.426、P<0.01)。3、不同性别、吸烟史、病理类型肺癌患者淋巴细胞亚群计数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。老年组(年龄≥65岁)肺癌患者CD3+、CD3+CD4+、 CD19+、CD4+、CD8+淋巴细胞计数明显低于中年组(年龄<65)(P<0.01)；4、肺癌患者病程早期NK细胞,B细胞数量较对照组显着降低,(P<0.01),随着病情进展免疫功能进一步下降,但病程晚期与早期比较,差异无统计学意义。CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞计数在早期变化不明显,病程晚期免疫功能明显抑制,所有淋巴细胞计数显着下降(P<D.D1),差异具有统计学意义。5、两组外周血免疫细胞比较,肺癌患者外周血中性粒细胞计数显着升高,淋巴细胞计数明显降低,(t值分别为3.526、-6.132,P<0.01),白细胞较正常组升高但无统计学差异。6、肺癌患者化疗后4-7天,CD3+、CD3+CD4+淋巴细胞亚群绝对计数值较化疗前明显增高(t值分别为-2.436、-3.178,P<0.05),CD3+CD8+、CD19+、CD4/CD8增高,但差异无统计学意义。NK细胞降低,差异无统计学意义。化疗后21天肺癌患者各免疫指标恢复至化疗前水平,比较不同时间淋巴细胞亚群计数变化,其CD3+、CD3+CD4+差异有统计学意义(F值为4.714、6.372；P<0.05)。结论：1、肺癌患者外周血包括T、B、NK各个亚群的淋巴细胞计数较正常组都显着减少,提示肺癌患者的免疫功能明显受到抑制,抗肿瘤能力降低。2、CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞计数在早期肺癌者与晚期之间比较具有显着差异,随着病情进展,肺癌患者免疫功能不断恶化,预后差。3、肺癌患者CD3+、CD4+在化疗后4-7天明显升高,化疗后21天又逐渐降低,但较治疗前仍明显升高,不同时间多次测量有助于观察患者病情变化,对临床判断患者病情,诊断治疗用药等都具有重要意义
贾婷婷[8]2018年在《肝癌患者特异性基因的筛选》文中指出背景:肝癌是生活中常见的恶性肿瘤,它的特点是复发率高、死亡率高,在世界范围内排名靠前。肝癌在我国屡见不鲜,每年都有数十万人死于肝癌,死亡率仅次于肺癌。因此,探索导致肝癌的发病机制显得极为重要。现已证明,无论是丙型肝炎病毒还是乙型肝炎病毒都是当今世界肝癌的主要病因。病毒引起肝癌,主要是因为在肝脏内发生大量炎症、纤维化和最终肝硬化。在丙型肝炎和乙型肝炎感染过程中,肝细胞内发生许多遗传和表观遗传变化,这是肝癌发生的一个主要因素。因此我们推测肝癌患者的免疫水平也发生了变化。此外,近年来,有大量的实验组对肝癌进行了全基因组或外显子组测序,筛选出了许多在肝癌发生中差异表达的基因,例如TP53、ARID1A、HULC还有Sox2ot等等,实验验证这些基因在肝癌患者中表达上调,在调节肝癌的发生方面有影响。尽管人们发现了很多在肝癌中差异表达的基因,但还是有很多起重要调节作用的基因未被发现。目的:本课题拟探讨在肝癌患者中相关淋巴细胞的表达变化,以及通过高通量测序技术筛选出在肝癌发生发展中起作用的特异性基因,以期找到基因治疗靶点及肝癌诊断指标。方法:1分离肝癌患者、普通健康人外周血的PBMC(人外周血单核细胞),通过流式细胞术分析患者淋巴细胞的变化来检测其免疫水平的变化。2通过提取患者癌和癌旁组织、患者和健康人的PBMC的RNA进行高通量测序,筛选出特异性基因。3通过RT-PCR、Real time-PCR等实验技术来验证所筛选出的特异性基因。结果:流式细胞术分析肝癌患者的PBMC,相比于正常健康人来说,其体内的T淋巴、NK和NKT还有B细胞表达增高,发现患者的免疫调节异常,产生抗肿瘤反应。可以通过对这些细胞的测定来诊断肝癌的发生以及对治疗效果的动态观察。高通量测序技术筛选出特异性基因XIST、FOXP1-AS1、HAGLR、DIO3OS和MEG3,Real-time PCR确定特异性基因FOXP1-AS1、HAGLR、和MEG3在肝癌中表达上调,证明其参与调节肝癌的发展进程,从而为肝癌在基因方向上的治疗提供新的靶点。结论:肝癌患者相比较于健康人,免疫调节异常,可作为诊断标志。同时,FOXP1-AS1、HAGLR和MEG3基因在肝癌患者中异常表达,呈现上调状况,可以为基因治疗的研究提供帮助。
佚名[9]2010年在《肿瘤免疫》文中研究说明免疫系统对肿瘤化疗的系列反应现象刘辉吴晓鑫大连医科大学临床免疫学教研室,大连116044肿瘤的发生发展及其转归与特定的机体免疫状态及免疫应答能力密切相关,而且肿瘤的免疫疗法亦是当前治疗恶性肿瘤最有希望的方法之一。但目前治疗肿瘤化疗方法仍占主要地位,由于各种化疗药物多是细胞毒性物质,因而大多数人推测化疗药物对机体免疫系统一定有不同程度的抑制作用,而对肿瘤患者化疗时机体免疫功能状态的检测并没有系统的实验评估,对化疗病人各阶段的免疫状况亦缺乏较全面的认识。
刘玮[10]2017年在《趋化因子受体CCR4在非小细胞肺癌的表达、作用及其机制的研究》文中指出肺癌是全球和我国死亡率最高的恶性肿瘤,最新数据显示,我国每年新发病65.3万例,死亡率高达45.57/100,000。目前针对肺癌主要治疗方案是以手术、放疗、化疗和分子靶向治疗为基础的综合治疗。虽然近年来恶性肿瘤的治疗取得了很大的进步,但由于肺癌发病率高、治疗效果有限、去医院看病时已是中晚期肺癌患者,而且5年生存率非常低,往往不到20%。随着免疫学和肿瘤学的研究,宿主的免疫系统功能紧密相关与肿瘤的发生和进展,即使我们人体拥有免疫监视系统,但是仍然不能阻止恶性肿瘤的发病,癌细胞可通过某些机制躲过机体的免疫监视,在机体内生长、转移,给社会和家庭产生不良后果。趋化因子是一类小分子蛋白细胞因子家族成员中的一员,分子量大小为7-12k Da,具有能够诱导相关白细胞定向趋化移动的功能。大量研究证实,趋化因子受体CCR4在各种肿瘤如ATLL、乳腺癌、胃癌、头颈部癌中呈高表达,在肿瘤的发生发展中承担着重要角色。目前关于CCR4与非小细胞肺癌关系的报道较少。主要研究方法:1.利用免疫组织化学法分析78例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织和癌旁组织中CCR4的表达情况,综合分析NSCLC患者临床病例资料,探寻CCR4表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征之间的关系,运用流式细胞术和ELISA分析CCR4表达与非小细胞肺癌患者全身免疫状况和肿瘤组织免疫微环境的关系,初步探讨CCR4作为NSCLC预后标志和治疗靶点的可能性。2.利用ELISA和Realtime-PCR法检测肿瘤组织趋化因子CCL17和CCL22的表达,Transwell细胞趋化实验分析CCR4对肿瘤组织中Treg细胞的趋化作用,流式细胞术检测肿瘤组织培养上清诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+调节性T细胞的能力,并探究NSCLC患者调节性T细胞对自身效应性T细胞增殖的抑制作用及其调节机制。3.采用流式细胞术检测NSCLC病人肿瘤组织和癌旁组织中NK细胞表面表达的活化型受体(NKG2D、NKp30、NKp46)和抑制型受体(NKG2A)的受体表达谱情况,分析肿瘤组织NK细胞与CCR4表达和TGF-?1浓度的相关性,观察肿瘤组织培养上清是否影响NK细胞表型受体NKG2D的表达,流式细胞术检测CD69+NK细胞的表达以探究CD4+CD25+T细胞对NK细胞的活化调控及其机制,流式细胞术检测CD107?+NK细胞的表达以探究CD4+CD25+T细胞对NK细胞细胞毒作用的调控及其机制。实验结果与结论:1.在78例NSCLC肺癌组织标本中,CCR4的阳性表达率为57.7%;在癌旁组织标本中,阳性表达率为32.1%,统计分析显示非小细胞肺癌组织中CCR4的表达明显高于癌旁组织,差异有高度统计意义(P?<?0.01)。非小细胞肺癌组织中CCR4的阳性表达与NSCLC患者临床分期相关,而与患者的年龄、性别、组织学分型、病理分级、肿瘤大小、淋巴结状态均无关。NSCLC患者外周血NK细胞数量较正常对照组没有差异,CD8+细胞的数量和CD4+/CD8+比例较正常对照组存在差异,特别是Treg细胞和CCR4+Treg细胞的数量存在显着升高,这些细胞亚群的数量缺陷反映了肺癌患者的全身免疫功能状态。CCR4阳性NSCLC患者外周血细胞因子TGF-β1和IL-10浓度较正常对照组明显增高,差异有高度统计意义(P<0.01);而IL-2和IFN-γ浓度较正常对照组显著降低,差异有高度统计意义(P<0.01)。在CCR4阳性NSCLC患者肿瘤微环境中,NK细胞、Treg细胞、CCR4+Treg细胞的表达水平较癌旁组织存在显着差异,这些细胞亚群的数量改变可能与肺癌患者肿瘤组织免疫微环境的免疫功能状态有关。肿瘤组织中细胞因子TGF-β1和IL-10浓度较癌旁组织明显增高,差异有高度统计意义(P<0.01);而IL-2和IFN-γ浓度较癌旁组织显著降低,差异有高度统计意义(P<0.01)。肿瘤组织CCR4 m RNA较癌旁组织表达明显增高,差异有显着统计意义(P<0.01);肿瘤组织TGF-β1 m RNA表达较癌旁组织明显增高,差异有显着统计意义(P<0.01)。肿瘤组织中CCR4和TGF-β1的表达与Treg细胞水平呈明显正相关。将78例NSCLC患者分成CCR4阳性组和CCR4阴性组,采用Kaplan-Meier法分析NSCLC患者叁年生存期的比较,随访结果显示CCR4阴性组患者较CCR4阳性组具有更长的生存期,差异有统计意义(P<0.05),提示非小细胞肺癌患者CCR4阴性表达可预示患者生存期的改善。2.免疫磁珠分选后的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞纯度均在90%以上,细胞获得率较高。肿瘤组织中趋化因子CCL17和CCL22的浓度较癌旁组织均明显增高,差异有高度统计意义(P<0.01)。在rh CCL17和rh CCL22的作用下,Transwell板下室的CD4+CD25+T细胞数量较空白对照组明显增多,差异有高度统计意义(P<0.01);CCR4中和抗体与rh CCL17/rh CCL22共同作用组,Transwell板下室的CD4+CD25+T细胞数量较rh CCL17或rh CCL22单独作用组明显降低,差异有高度统计意义(P<0.01),证明肿瘤组织中Treg细胞数量增多,可能与CCL17和CCL22的高浓度有关,通过趋化因子受体CCR4募集Treg细胞进入肿瘤组织。肿瘤组织Treg细胞数量的增多,还可能与肿瘤微环境中TGF-?1诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+调节性T细胞有关,中和性抗TGF-?1单克隆抗体能显着降低其诱导作用。肿瘤组织组和癌旁组织组调节性T细胞(CD4+CD25+T细胞)均能抑制效应性T细胞(CD4+CD25-T细胞)增值功能,而且肿瘤组织来源的Treg细胞抑制作用比癌旁组织组明显增强;随着Tregs:Teffs的比例由0:1、0.25:1、0.5:1向1:1增高,效应性T细胞(CD4+CD25-T细胞)的增殖指数逐渐降低,调节性T细胞对效应性T细胞的抑制率也呈现逐渐增大,证明调节性T细胞对效应性T细胞增值的抑制作用表现为浓度依耐性;当Tregs对Teffs比例相同条件下,肿瘤组织组调节性T细胞对效应性T细胞的抑制率强于癌旁组织组,差异有高度统计意义(P<0.001)。中和性抗TGF-?1单克隆抗体组Tregs对Teffs增值的抑制率较未加入组明显降低,差异有高度统计意义(P<0.01),证明Treg细胞可能通过TGF-?途径发挥其对Teff细胞增殖的抑制作用。3.肿瘤组织NK细胞较癌旁组织组低表达表面活化型受体NKG2D,差异有高度统计意义(P<0.01),其他活化型受体NKp30、NKp46及抑制型受体NKG2A较癌旁组织组无明显统计学差异(P>0.05),鉴于NKG2D是自然杀伤细胞的表面重要的活化性受体,在自然杀伤细胞发挥细胞毒作用时起关键因素,其表达下降可能会导致NK细胞没有足够量的活化型受体识别相应的配体,进一步导致NK细胞的活化程度不够,影响NK细胞在肿瘤微环境中的功能,进而介导了肿瘤的免疫逃逸。肿瘤组织中CCR4 m RNA与NK细胞的百分比呈显着负相关(P<0.01),该结果提示肿瘤组织中CCR4 m RNA高表达可负向调控了NK细胞的数量。以肺癌组织TGF-?1浓度与NK细胞数量进行线性相关性分析,结果显示肿瘤组织中TGF-?1浓度与NK细胞的百分比呈显着负相关(P<0.01),结果提示肿瘤组织中TGF-?1高浓度可能负向调控了NK细胞的数量。肿瘤组织培养上清混合培养基组NKG2D的表达较单纯1640培养基组显着下降,差异有显着统计意义(P<0.01);中和性抗TGF-?1单克隆抗体(20μg/ml)组NKG2D的表达较混合培养基组明显上升,差异有高度统计学意义(P<0.01),证明肿瘤微环境可通过TGF-?通路诱导NK细胞活化型受体NKG2D的下调,进而抑制NK细胞的免疫学功能。rh IL-2单独作用时肿瘤组织组NK细胞CD69+NK百分率较癌旁组织组降低,差异无统计意义(P>0.05),但较未刺激组明显升高,差异有高度统计意义(P<0.01);CD4+CD25+T细胞混合培养后,CD69+NK细胞百分率较rh IL-2单独作用组明显降低,差异有高度统计意义(P<0.01);使用中和性抗TGF-?1单克隆抗体可以减弱Treg对NK细胞活化的抑制作用,结果提示肿瘤组织中Treg细胞可能通过TGF-?通路调控NK细胞的活化。rh IL-2单独作用时,肿瘤组织组NK细胞对K562细胞的细胞毒作用较癌旁组织组明显降低,差异有高度统计意义(P<0.01);肿瘤组织Treg细胞混合培养均能明显降低两组NK细胞的细胞毒作用,差异有高度统计意义(P<0.01);加入中和性抗TGF-?1单克隆抗体可部分逆转Treg对NK细胞细胞毒作用的抑制作用,结果提示Treg细胞能通过TGF-?1信号通路抑制NK细胞细胞毒作用。
参考文献：
[1]. 流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞的免疫变化[J]. 周晋华, 张安成. 安徽医药. 2003
[2]. 流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞免疫变化及意义[D]. 周晋华. 安徽医科大学. 2001
[3]. 流式细胞术分析肺癌患者外周血细胞的免疫变化[J]. 周晋华. 安徽医学. 2001
[4]. 肺癌围手术期免疫功能变化及其与肿瘤转移相关性研究[D]. 汪珺. 昆明医科大学. 2017
[5]. 肺癌患者外周血细胞免疫功能检测及其临床意义[J]. 乐涵波, 张永奎, 韩辉, 王朝晔, 陈志军. 浙江临床医学. 2004
[6]. 肺癌患者外周血细胞CD_(25)、CD_4表达和Apo水平的检测[J]. 周振英, 吴晓柳, 朱月清, 沈宗丽, 王亚平. 肿瘤防治杂志. 2001
[7]. 肺癌患者化疗过程中淋巴细胞亚群动态监测[D]. 邹霞. 泸州医学院. 2014
[8]. 肝癌患者特异性基因的筛选[D]. 贾婷婷. 鲁东大学. 2018
[9]. 肿瘤免疫[C]. 佚名. 第七届全国免疫学学术大会论文集. 2010
[10]. 趋化因子受体CCR4在非小细胞肺癌的表达、作用及其机制的研究[D]. 刘玮. 重庆医科大学. 2017
标签：肿瘤学论文; 肺癌论文; 肿瘤论文; 细胞免疫论文; 流式细胞术论文; 肿瘤免疫论文; 化疗药物论文; 肺癌转移论文; 免疫抑制论文; 肝癌晚期论文; 放化疗论文; 癌症论文; t淋巴细胞论文;