石子刚[1]2002年在《生长轴激素在猪脾脏中表达及其发育性变化》文中提出本研究以生长速度慢的二花脸猪和生长速度快的大约克猪为实验动物模型,分析了体重增长和脾脏增重的品种和性别之间差异。实验采用RIA方法测定了出生后不同日龄猪(0、3、20、30、45、90、120和180日龄)脾脏中IL-2和IL-6的含量。同时,采用了相对定量的RT-PCR方法对脾脏中GH、GHR、IGF-1和IGF-1R的mRNA水平的发育性变化进行了比较研究。此外,还测定了CT2000处理后的猪脾脏GHRmRNA和IGF-1RmRNA表达水平的变化,以探索生长轴激素对猪脾脏相关受体基因表达的影响。本实验研究分为四部分: 一、二花脸猪和大约克猪体重、脾脏重量及脾脏中IL-2和IL-6水平的发育性变化 从出生到180日龄,二花脸猪体重均显着低于大约克猪。大约克和二花脸猪脾脏绝对重量均随日龄而增长;二花脸猪脾脏指数(脾脏重量/体重)在20日龄较大,45日龄后下降。45-180日龄脾脏指数变化不明显,呈相对平稳趋势;大约克猪则在30日龄脾脏指数有一较高值,提示两品种猪脾脏的发育模式有所区别。 雄性二花脸猪与雄性大约克猪脾脏中IL-2水平的发育性变化模式基本相同。出生(0日龄)时两品种猪脾脏组织中IL-2含量显着高于其他日龄(P<0.05),其余各日龄点变化不明显。但在90日龄和120日龄二花脸猪高于大约克猪(P<0.05)。二花脸猪和大约克猪脾脏中IL-6水平远低于IL-2水平;在0-180天的生长过程中保持较为稳定的状态,各日龄点变化波动不大,没有明显的品种差异和性别差异存在。 二、猪脾脏GHmRNA和GHRmRNA的发育性变化及比较研究 猪脾脏组织中生长激素mRNA量较少,尽管0至180日龄的大约克猪及二花脸猪脾脏中均可用RT-PCR方法检测到GHmRNA的表达,但用目前本实验室采用的检测技术不足以准确定量比较。大约克猪和二花脸猪脾脏中GHRmRNA水平在出生时均较高,二花脸猪在3日龄即显着下降(p<0.05),20日龄时降至最低点,随后略有上升,30至180日龄变化不明显;大约克猪则在30日龄后下降明显(p<0.05),90至180日龄变化波动不大。从总体上来看,大约克猪和二花脸猪,它们脾脏GHR表达的发育性变化模式基本相同,均在出生时较高,然后呈下降趋势。联系脾脏指数的发育性变 石子刚:猪脾脏生长发育与生长轴激素相关性研究化,提示脾脏的增重与其GHR基因表达之间可能存在负反馈形式的作用机制。H、脾脏中NFl和mF刁 的发育性变化及比较研究 大约克猪脾脏uFl 水平出生时较低,到30日龄达到高峰u刊.05)。H花脸母猪出生时也较低,2 0日龄时显着升高,然后呈下降趋势,18 0日龄时较低。二花脸公猪则在30日龄左右才有一较高邯,随后逐渐下降。脾脏中比F刁 水平总体变化趋势与大约克猪和二花脸猪脾脏指数基本一致。提示自分泌或旁分泌的IGFl极可能是促进猪脾脏的生长发育的主要因素。大约克猪和二花脸猪脾脏中 IGF-1受体帆NA水平在出生时均相对较高,随后呈平稳变化趋势,总体上与脾脏IL刁水平发育变化相似。四、半脱胺处理的大约克猪脾脏 GHRmRNA及NF叫帆NA的变化 从 15日龄起用添加 4皿ppm CTN00的小猪料饲喂大约克猪,分别于乃日龄和35日龄进行屠宰采样。研究发现,大约克猪体重及其脾脏重量与各自对照组比较均无明显的变化。3 5日龄点猪脾脏 GHRmRNA tb 2 5日龄点有下降趋势。统计分析表明,无论是对照组和试验组之间还是不同日龄之间,差异均不显着。说明CT2000对15日龄至35日龄生长阶段的大约克猪脾脏发育可能无明显作用。
李发弟[2]2003年在《生长轴激素在猪睾丸表达的发育性变化及其对睾酮分泌的影响》文中研究说明1二花脸和大白猪睾酮分泌的发育性变化随机选取3、20、30、90、120和180日龄纯种二花脸公猪和大白公猪各4头,屠宰后采取血样和睾丸组织样,用放射性免疫分析法测定其血清和睾丸组织中睾酮含量。结果表明,90日龄前两品种猪血清睾酮水平均维持较低水平;二花脸猪从90日龄开始随日龄的增加极显着地升高(p﹤0.01),而大白猪在120日龄开始显着上升(p﹤0.05),但上升速度和幅度均低于二花脸猪;总体来看,二花脸猪的血清睾酮水平显着高于大白猪(p﹤0.05)。不同日龄猪睾丸组织中睾酮含量的变化趋势与血清睾酮水平的变化趋势正好相反,二者呈负相关(p﹤0.01);3日龄时睾丸组织中睾酮含量最高,以后随日龄的增加而下降;二花脸猪在30和90日龄期间急剧下降(p﹤0.01),而大白猪在90日龄前随日龄的增加而显着降低(p﹤0.05),90日龄后保持相对稳定;总体来看,大白猪睾丸组织中睾酮含量极显着高于二花脸猪(p﹤0.01)。2二花脸和大白猪睾丸中GHR、IGF-I和IGF-I mRNA的发育性变化随机选取0、3、20、30、45、90、120、180日龄纯种二花脸公猪和大白公猪各4头,颈部放血屠宰并采取睾丸组织样,用相对定量RT-PCR法分析睾丸组织中GHR、IGF-I和IGF-I mRNA的表达及发育性变化。结果表明:二花脸猪与大白猪睾丸中GHR mRNA表达的发育模式完全不同。二花脸猪GHR mRNA相对表达量0日龄到30日龄逐渐上升,在30和180日龄出现两个峰值,而在45至120日龄期间呈显着降低的趋势(p﹤0.05);大白猪GHR mRNA相对表达量0日龄居较高水平,0日龄后显着下降(p﹤0.05),20日至180日龄维持在相对恒定的水平(p﹥0.05)。总体来看,二花脸猪GHR mRNA相对表达量显着高于大白猪(p﹤0.05)。二花脸猪与大白猪睾丸中IGF-I mRNA表达的发育模式在30日龄前完全相同,即随着年龄的增加显着增加(p﹤0.05)。二花脸猪IGF- I mRNA相对表达量在30日龄至180日龄无显着变化;大白猪IGF- I mRNA相对表达量在90日龄降低,120至180日龄又显着升高(p﹤0.05)。总体来看,二花脸猪IGF- I mRNA相对表达量显着高于大白猪(p﹤0.05)。二花脸猪与大白猪睾丸中IGF-IR mRNA表达的发育模式不同。二花脸猪IGF-IR mRNA相对表达量在90至120日龄期间有一低谷(p﹤0.05),其它各日龄相对恒定;大白猪IGF- IR mRNA相对表达量0日龄较高,以后显着下降(p﹤0.05)并保持在相同水平。总体来看,二花脸猪IGF- IR mRNA相对表达量高于大白猪(p﹤0.05)。睾丸中GHR mRNA与IGF-I和IGF-IR mRNA相对表达丰度呈显着正相关(p<0.01或p<0.05)。以上结果提示:(1)不同品种猪睾丸组织中GHR、IGF-I和IGF-IR mRNA表达具有特定的发育模式;(2) GH可能直接作用于睾丸组织参与其生长和功能调节;(3)猪睾丸中IGF-I和IGF-IR mRNA的表达依赖于GH。3 GH对间质细胞睾酮分泌的影响不同剂量的rpGH和(或)hCG刺激体外原代培养的18日龄猪睾丸间质细胞后,采用放射性免疫分析法测定其培养液中睾酮的的浓度。结果表明, hCG刺激的睾酮分泌呈剂量和时间依赖关系,随着hCG的重复刺激,细胞反应的敏感性迅速下降。rpGH单独刺激时,以剂量依赖方式抑制猪睾丸间质细胞分泌睾酮,敏感性呈时间依赖。rpGH以剂量和时间依赖方式调节hCG刺激的睾酮分泌,敏感性随hCG的浓度变化,高浓度hCG(20IU/ml)存在下,细胞对rpGH敏感性高,rpGH作用持续时间短;低浓度hCG(10IU/ml)存在下,细胞对rpGH敏感性低,rpGH作用持续时间长。以上结果提示,GH对睾酮的合成起协同作用,GH对间质细胞睾酮合成的作用是LH/hCG依赖的。
参考文献:
[1]. 生长轴激素在猪脾脏中表达及其发育性变化[D]. 石子刚. 南京农业大学. 2002
[2]. 生长轴激素在猪睾丸表达的发育性变化及其对睾酮分泌的影响[D]. 李发弟. 甘肃农业大学. 2003