湘潭市第三人民医院妇产科 湖南湘潭 411102
摘要：目的：对ESR1和ESR2基因遗传变异和妇女产后抑郁症关联性进行探讨。方法：以我院从2015年1月到2016年1月期间在我院分娩，且产后出现抑郁症的90例产妇作为研究对象，收集产妇血液建立数据库，对ESR1、ESR2基因进行SNP搜寻，同时与产妇产后抑郁症表型进行分析，探寻关联性。结果：分别在ESR1基因第1外显子以及ESR2基因第6外显子上发现SNP，同时对两个SNP进行基因型判定，用R软件分析关联性，发现ESR1、ESR2与妇女产后抑郁症没有明显的关联性。结论：ESR1、ESR2基因遗传变异均不是妇女产后抑郁症的主要基因。
关键词：ESR1；ESR2；产后抑郁症；关联性
产后抑郁症是一种严重的产后不良反应，属于精神障碍疾病，常发于产后两周内，发病率各有不同。根据相关统计，全球妇女产后抑郁症发病率介于0.5%~60%之间，我国妇女产后抑郁症发病率在3.6%~16.5%之间。产妇在产后发生抑郁症，不仅会影响产妇健康，也会对新生儿哺乳营养等造成影响。现阶段，产后抑郁在临床中受到了更加的重视，而为了解决这一问题，必须从其诱因出发，探索造成妇女产后抑郁的真正原因。对于产妇产后抑郁的研究不断增多，但对产后抑郁尚无明确的诊断指标。雌激素是类固醇激素的一种，靶组织众多，包括骨骼、生殖系统、心血管等，一些研究还说明雌激素对消化系统、中枢神经系统也具有重要作用。ESR1、ESR2是雌激素受体的亚型，分别位于6号、14号染色体上。本次研究主要是为了分析ESR1、ESR2与产后抑郁症的关联性，现将具体情况报告如下：
1.资料与方法
1.1样本收集
对在我院生产且产后出现抑郁症的90例产妇进行采集血液样本，并建立产后抑郁症数据库。通过焦虑自评量表、贝氏量表以及抑郁症诊断标准以及产妇一般情况调查表，调查产妇产后抑郁情况以及有关因素。用专业的血液DNA提取剂盒提取血液样本中的DNA，除了进行浓度玩进行电泳，将合格的DNA样品浓度调至20ng/u1.4℃进行保存备用。
1.2 方法
基于产妇焦虑自评量表、产后抑郁量表、一般情况调查表等，结合现骨干的诊断标准，对产妇产后抑郁症情况进行具体的判断。产后抑郁症通常在产后4周内发生。若在产后两周内出现五条及五条以上关于诊断标准中症状，则可以却认为抑郁症阳性，而不符合诊断标准，则评价为阴性。对本组90份DNA样本中，24份阳性以及66份阴性DNA样品进行具体的试验。
通过专业网站下载ESR1、ESR2基因序列，同时用在线引物设计软件Primer3.0设计两对引物对基因序列中的SNP进行搜寻。分别选择五个阳性以及五个阴性样品DNA作为模版，实施PCR扩增反应，采用40ng基因组DNA、25ul反应体系，设置PCR循环指标为30s、94℃，所有PCR反应均用专业的热循环仪实施，将PCR产物用电泳进行检验，并送往正规生化公司实施正向测序。利用DNAStar软件程序对所得DNA序列进行分析，进行SNP鉴别。
将90份样品实施PCR扩增，同时送往专业的生化公司测序，将所得的序列通过DNAStar软件中的相关程序进行查看，根据样品中多态位点处显示碱基信号峰对基因型进行具体的判断。
1.3 统计学意义
用R软件中fisher test程序，在基因型数据的基础上，对ESR1、ESR2基因上两个突变位点进行分别单点分析，对不同基因型和产后抑郁表现型之间关联性P值进行计算分析。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
2.结果
搜寻结果：本次实验中，ESR1共设计了4个针对性的基因外显子引物，而针对ESR2共设计了5个引物。分别利用5个阳性、5个阴性样品实施PCR扩增，将两个基因片段均扩增到单一的条带。根据SNP搜寻的结果，ESR1基因发现SNP位置位于第1外显子上，为rs2077647，而ESR2基因中发现SNP位置在第6外显子，为rs1256049。两个位置上的突变都没有引发氨基酸变化，在其他设计的引物扩增片段中，都没有搜索到SNP位点。
基因型判定：基因型的判定主要是依靠样品中多态位点处显示的碱基信号峰，对ESR1、ESR2基因SNP基因频率以及基因型频率进行分别计算，根据计算结果，发现SNPrs2077647AA基因型频率较高，而产后抑郁阳性个体CC基因型频率明显比阴性个体数量要多；在ESR2基因中SNPrs1256049CT基因型频率较高，而CC基因型频率产后抑郁阴性个体明显比产后抑郁阳性个体较多。
通过R软件实施单点分析，结果显示，ESR1基因RS2077647、ESR2基因rs1256049均与产后抑郁症不具有显著的关联性，P＜0.05
3.讨论
在本次试验中，选择ESR1基因上SNP共包括5个，分别是rs2982694、rs138891155、rs3020434、rs2077647、rs2234693，共设计5个引物实施搜寻；而针对ESR2基因上SNP共包括五个，分别为rs139785869、rs1256063、rs146380568、rs11471356、rs1256049，同样设计5个引物实施搜寻。搜寻的结果显示，在ESR1基因上搜寻到的SNP为rs2077647，而ESR2上搜寻到的SNP为rs1256049，在其余序列上均为搜寻到SNP，这在一定程度上可能与不同人群中SNP分布频率不同有关。
另外，根据R软件统计分析的结果表明，ESR1、ESR2基因型SNP与妇女产后抑郁症均无明显的关联性。一方面，是由于两个基因外显子上SNP都没有导致氨基酸变化，尚未对雌激素受体α、β与雌激素结合过程造成影响，或者是搜寻到的SNP过少，无法引起产后抑郁QTN。另一方面，产后抑郁症成因较为复杂，和家庭环境、产妇性格、分娩方式等都具有密切的联系。
本次研究还存在一定的局限性，血液样品够少，对实验结果准确性造成影响。
参考文献：
[1]徐振林.COC暴露及ESR2基因多态性与女性脑卒中发病风险的关联研究[J].南京医科大学.2015，21（8）：87-88.
[2]范蓉，唐会林，胡永芳.雌激素受体基因多态性与卵巢对促性腺激素反应性的研究进展[J].中国临床药理学杂志.2015，15（3）：54-55.
[3]郑燕，朱晓春，张振林.雌激素受体基因多态性与绝经后女性骨质疏松症雷洛昔芬治疗效果的关系研究[J].中国全科医学.2016，20（3）：136-138.
[4]B Leylandjones，KP Gray，M Abramovitz，M Bouzyk，B Young.ESR1 and ESR2 polymorphisms in the BIG 1-98 trial comparing adjuvant letrozole versus tamoxifen or their sequence for early breast cancer.[J].Breast Cancer Research & Treatment，2015，154（3）：543-544.
[5]JW Yi，SJ Kim，JK Kim，YS Chan，HW Yu.Upregulation of the ESR1 Gene and ESR Ratio（ESR1 / ESR2）is Associated with a Worse Prognosis in Papillary Thyroid Carcinoma：The Impact of the Estrogen Receptorα/βExpression on Clinical Outcomes in Papillary Thyroid Carcinoma[J].Annals of Surgical Oncology，2017：1-9.
论文作者:陈志文
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第22期
论文发表时间:2017/12/29
标签：产后论文; 基因论文; 抑郁症论文; 产妇论文; 关联性论文; 引物论文; 抑郁论文; 《中国误诊学杂志》2017年第22期论文;