黑龙江中医药大学 黑龙江哈尔滨 150040
摘要：目的：研究二氢槲皮素对垂体后叶素致大鼠心肌缺血的保护作用，探讨其对缺血性心脏病的防治作用及机制。方法：将 SD 大鼠随机分为空白组、模型对照组、阳性对照组（马来酸依那普利15mg·kg-1）、二氢槲皮素高、中、低剂量组（8.0，4.0，2.0mg·kg-1）。尾静脉注射0.6U·kg-1垂体后叶素（Pit）造成心肌缺血性损伤模型后观察心电图（ECG）的变化，检测血清和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和血清中肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）含量变化。结果：二氢槲皮素能改善大鼠 ECG 的S-T段位移，显著降低心肌缺血大鼠血清中CK，LDH的含量，升高心肌组织匀浆中SOD活力，降低心肌组织匀浆中脂质过氧化终产物MDA 的含量。结论：二氢槲皮素能有效抑制Pit所致心肌组织缺血，保护心肌细胞免受损伤，从而起到治疗缺血性心脏病的作用。
心肌缺血（Myocardial Ischemia MI）是指供应给心肌的血液不能满足需要时，导致缺氧，代谢改变，功能障碍，甚至心肌结构破坏的病理状态[1]。缺血性心脏病在我国的发病率及死亡率呈逐年递增的趋势，成为危及人类健康的主要疾病之一。缺血性心脏病多见于40岁以后的中老年人，随着人民生活水平的提高，临床20-30岁的年轻人出现心肌缺血的症状也时有报道[2]。二氢槲皮素（Dihydroquercetin，DHQ）是一种二氢黄酮类化合物，在自然界中分布广泛，主要来自松科植物如落叶松、花旗松等植物中，尤其是落叶松根颈部含量最高[3]。二氢槲皮素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、保护心肌等作用[4-7]。垂体后叶素（Pit）是强烈的血管收缩剂，内含加压素，能明显使冠状动脉、毛细血管收缩，造成心肌缺血缺氧[8]。本实验采用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型，尾静脉注射给药，造成急性短暂的心肌缺血模型，以Ⅱ-导联心电图S-T段抬高≥0.1mv为造模成功标准[9]。从急性心肌缺血心电图段变化、心肌肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等生化指标对研究抗心肌缺血的机制具有一定的意义。本实验采用Pit致大鼠急性心肌缺血模型，探讨二氢槲皮素抗心肌缺血、治疗冠心病的作用。
1.材料
1.1 动物 健康 SD大鼠60只，雌雄各半，体重220~250 g。由黑龙江中医药大学GLP 中心提供，许可证号 SCXK-（京）2009-0001。
1. 2 仪器 KY2000 半自动生化分析仪（日本岛津公司）；756PC Spectrum 紫外分光光度计（上海 光 谱仪 器 有 限 公 司）；BL-420F生物机能实验系统。
1. 3 试 剂 CK测试盒（批 号 20181026），SOD试剂盒（批 号20181105），MDA试剂盒（批号 20181024），LDH试剂盒（批号20181120），LDH试剂盒（批号 20091120），均购自南京建成生物工程研究所。
1. 4 药物 垂体后叶素（上海禾丰制药有限公司）；马来酸依那普利（扬子江药业集团江苏制药股份有限公司）；二氢槲皮素由黑龙江中医药大学周忠光老师提供。
2 方法
2.1 垂体后叶素诱导的急性心肌缺血模型的建立将大鼠随机分成空白组、模型组、高、中、低 3 个剂量组和阳性对照药（马来酸依那普利）组，将二氢槲皮素的水溶液，依照正常给药剂量按体表面积折算，给药剂量分别为高、中、低剂量组：4 mL（相当于二氢槲皮素8.0，4.0，2.0 mg·kg-1）。阳性对照组：4mL（相当于地奥心血康15 mg·kg-1）。空白组和模型组给予相应体积的蒸馏水，所有大鼠连续灌胃15天，1 次/天。
2.2 检测指标及方法
2.2.1 心电图检测：末次灌胃后，10%水合氯醛（3ml/kg）腹腔注射麻醉，随后，仰卧固定于手术台上，将针头电极一侧插入大鼠四肢皮下，另一侧连接于BL-420F生物机能实验系统，先观察一段时间大鼠正常心电图，随后，除空白组外，其余各组给予大鼠腹腔注射垂体后叶素，5s内注射完毕。测定标准导联心电图S-T段变化。测定注射30s后的S-T位移值，进行统计学分析。
2. 2. 2 血清中 CK，LDH 的测定：颈动脉取血，分离血清，按试剂盒说明书操作测定血清中CK，LDH。
2. 2. 3 心脏组织匀浆：SOD，MDA的测定将心脏取出，取心尖同一部位的心肌组织，生理盐水冲洗，冰水浴研磨，制备 10% 心肌组织匀浆。按试剂盒说明书操作测定心肌组织匀浆中的SOD，MDA。
2. 3 统计学处理：用SPSS 13. 0 软件，数据用x±s表示，两组间比较采用t检验，P < 0. 05 有统计学意义。
3 结果
3. 1 对大鼠ECG的影响注射Pit 后，大鼠 的ECG 很快出现心肌缺血性改变，表现为S-T段抬高，显示大鼠心肌有严重的心肌缺血损伤。各用药组S-T段位移幅度较小，与模型组相比具有显著性差 异；且二氢槲皮素各组具量-效关系。见表1。
表1 二氢槲皮素对急性心肌缺血大鼠心电图 S-T段位移的影响（，n = 12）
4 讨论
本实验观察到大鼠口服二氢槲皮素后能有效抑制Pit所致心肌组织缺血，明显降低S-T段位移值，提高左心室收缩力，血清中CK，LDH 的活性明显降低，心肌组织匀浆中SOD活力升高，MDA含量显著降低，提示二氢槲皮素可以保护心肌细胞，提高细胞膜的稳定性。实验证明二氢槲皮素能有效抑制垂体后叶素（Pit）所致心肌组织缺血，保护心肌细胞免受损伤，从而起到治疗缺血性心脏病的作用。
参考文献：
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[9]姜岑，芪丹化痰汤对垂体后叶素诱导大鼠急性心肌缺血的保护作用及机制研究[D]，成都，成都中医药大学，2013，15.
基金项目：黑龙江省应用技术研究与开发计划重大项目（GA16C102）；黑龙江中医药大学优秀创新人才支持计划优秀青年教师（2018RCQ01）
第一作者：于莹，博士，助理研究员，从事中药药效物质基础及活性研究，Tel：0451-87266836，E-mail：yuying_ 925@163.com；
通讯作者：周忠光（1957-），教授，博士研究生导师，博士，主要从事中医药防治老年性痴呆的研究工作。
论文作者:于莹,顾媛媛,张虎娟,张晓燕,周忠光*
论文发表刊物:《健康世界》2018年25期
论文发表时间:2019/1/21
标签：心肌论文; 大鼠论文; 垂体论文; 缺血性论文; 匀浆论文; 心电图论文; 血清论文; 《健康世界》2018年25期论文;