（吉林市红十字中心血站 吉林 吉林 132001）
【摘要】 目的：预防和控制血液核酸检测中出现假阳性结果。方法：笔者结合工作实践对如何防治假阳性进行探讨。结果：在核酸检测血液实验中对四个关键方面采取防治措施，有效地减少了假阳性标本的出现。结论：本文通过实施在血液核酸检测中对假阳性结果的防治措施，确保了检测结果的可靠性和准确性，逐步完善血液核酸检测的质量安全。
【关键词】核酸检测; 假阳性；污染; 防治措施
【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）36-0352-02
核酸扩增技术(nucleic acid testing,NAT）是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称，原理是通过靶核酸直接扩增或其附带信号扩增的方法，让极微量的核酸变成直观的光电或可视信号，进而判断标本中是否存在相关病原体。但由于NAT 技术的高度敏感性，在体外具有很高的扩增效率，所以实验过程中从样本制备到结果产生的每个步骤都是关键点，极微量的污染即可导致假阳性结果，甚至造成实验室污染[1]，所以预防和控制假阳性结果尤其重要。
我国NAT技术的研究源于2000年之后，在酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测合格基础上加做NAT。因此2012年版《血站技术操作规程》中对血液筛查方法有了新的要求，允许采用ELISA检测和NAT检测各一遍的相结合的检测模式对血液进行安全检测。吉林市红十字中心血站2012年正式实施在通过2次ELISA检测合格及待检的血液样本基础上，进行HBV、HCV和HIV核酸检测。而应急血液标本、手工血小板标本和单采血小板标本，实行ELISA与NAT进行平行检测。这时怎样避免假阳性的出现，保证临床用血需要，减少拆分复检，缩短检测时间，降低实验成本，更显得重中之重。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆因此，笔者结合工作实践对如何防治假阳性进行探讨，意在抛砖引玉，为全国采供血机构施行NAT检测提供建议与互勉。
1. NAT检测实验室主要污染类型
引起NAT检测实验室主要污染类型有: 标本间交叉污染、天然基因组DNA或RNA 对试剂污染以及扩增片段的污染。
2.防治措施
2.1 血液标本的防治措施
（1）为防止交叉污染，标本常规应经过ELISA检测合格的血液标本。（2）在标本处理区，真空采血管的去帽动作和上试管架的摆放要轻、快、准，减少手工造成标本的交叉污染（3）配备阴性、阳性对照与质控物时，注意实验顺序，防止迸溅，及时更换一次性手套.（4）注意生物安全柜的清洁与维护。（5）标本离心后，离心机和转子需经75%酒精擦拭。
2.2 试剂的防治措施
（1）使用期间留意试剂批号和有效期时间。（2)试剂尽量做到现用现配，配置时，动作轻柔，减少外溢和溅出;避免在试剂槽上方的手工操作；掌握每次试剂需要量，减少试剂槽存储量，避免试剂污染。（3）每周做好周维护，清空试剂槽，蒸馏水冲洗，晾干后紫外线灯照射消毒。（4）实验结束后，试剂槽剩余试剂及时进行低温密闭保存。（5）试剂与试剂槽只放置在清洁区，接触前尽量换上新手套。
2.3 扩增片段污染的防治措施
（1）实验后进行彻底的清洁和消毒，去除核酸扩增区域内扩增片段的蓄积和残留[2]。（2）对于实验所产生的医疗垃圾，及时处理并清空。
2.4 其他防治措施
（1）仪器的清洁与维护，尤其是在血液标本同时进行ELISA与NAT平行检测时，一旦发现有ELISA检测定性为阳性样本，建议加强仪器的消毒工作，防止在实验过程中阳性标本所产生的气溶胶的残留，影响以后实验的准确性[3]。（2）清洁和消毒工作由实验室工作人员完成，每次实验完毕，先用75%酒精向空气喷洒沉降气溶胶，然后用10%的84消毒液擦拭操作台和地面，最后再用清水擦过。在下一次实验前，实验环境应用紫外线照射，固定紫外线灯及紫外线消毒车都应设有计时开关，自动进行消毒工作。
3.结语
本文根据我国现行的相关法规要求，在NAT检测血液的实验中，关于防止假阳性及实验室污染的具体问题，结合我站NAT实验室的实际情况进行了分析。假阳性的出现，不仅在拆分复查中费时费力，而且处理污染工作非常繁杂，有时还会影响到正常发血[4]。因此，保证检测的准确性，有效防止实验室的污染，确保检测过程的质量安全，是NAT实验室面临的首要问题。通过探索NAT筛查实验中易污染的关键点，并在实施过程中加强NAT实验室的质量管理，能有效防止实验室污染，确保核酸检测的质量，从而进一步提高我国的血液安全水平。
【参考文献】
[1]李金明编著,实时荧光PCR技术,北京:人民军医出版社, 2007.11.
[2]许雪梅.空气消毒效果分析.中国现代医药杂志.2010,12(5): 109-149.
[3]王中梅,冷婵,姚凤兰.血站核酸检测实验室清洁消毒效果的监控与分析.中国输血杂志,2012,25(6):534-536.
[4]颜秀娟,邱昌文,石庆秋.核酸血液筛查污染控制措施.中国输血杂 志,2012,,25(8):807-808.
论文作者:赵宇
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第36期
论文发表时间:2017/2/8
标签：核酸论文; 阳性论文; 标本论文; 试剂论文; 血液论文; 实验室论文; 防治措施论文; 《医药前沿》2016年12月第36期论文;