王昕昕
黑龙江省农垦总局总医院 150088
摘要：目前，直肠癌在男性癌症发病率中排第五位，在女性癌症发病率中排第三位，是我国居民主要的肿瘤死因之一。而直肠黏膜渗液FH检测在诊断直肠癌前病变及直肠癌中有较好的效果和临床意义，本文就对此展开探讨。
关键词：直肠癌前病变；直肠癌；直肠黏膜渗液FH检测
引言
直肠癌是指位于齿状线至乙状结肠、直肠交界处之间的癌，是胃肠道中常见的恶性肿瘤，发病率仅次于胃和食管癌，是大肠癌的最常见部分（占60%左右）。随着直肠癌发病率逐年上升，发病年龄趋于年轻化，直肠癌的早期筛查愈来愈引起国内学术界重视。然而目前临床实现的检测技术效果不佳。基于此，本研究拟对于FH检测在直肠癌及癌前病变早期筛查中的可行性及应用价值进行探讨。
一、直肠黏膜渗液FH检测在诊断直肠癌前病变及直肠癌中的临床应用
（一）直肠黏膜渗液FH检测的仪器和试剂选择
在临床中，针对患者的客观情况，合理选择电子肠镜（日本奥林巴斯，CF-H2901）。直肠黏膜细胞型上皮细胞FH染色试剂（青岛东孚美伦生物科技有限公司，鲁青食药监械生产备20160025号）产品组成：盒托（其上设测试池），A试剂（白色滴管），B试剂（蓝色滴管），C试剂（样本瓶），包装盒（盒外侧附比色板）。一次性采样器（扬州环宇医疗器械有限公司，苏食药监械（准）字2014第2640364号）。一次性肛门镜（扬州市吉康医疗器械有限公司，苏扬食药监械生产备20150045号）。见图1。
图1 FH检测所需卫材
（二）上皮细胞稳定性FH检测
检测样本：参与就诊的患者直肠黏膜渗液。检测方法：（1）检查采样拭子包装是否完好，查看采样拭子是否有被拆开的痕迹；（2）采样：在采样部位不得清洗、上药、搔刮或活检的前提下，将一次性肛门镜经肛门置入肛管齿状线处，持一次性直肠粘液采样器，在齿状线以上擦拭获取直肠黏膜渗液；（3）洗脱：采样后拭子头部放入C试剂瓶内，充分搅动不少于10次，与C试剂充分混匀，静置约10s后，当即检验。如需集中送检，需将样本液瓶盖拧紧，在4°C冷藏环境下可存放3天。（4）顺序加样：将A试剂滴管管口两翼部顺时针旋转折断，把A试剂滴入测试池；用已空置的A试剂滴管充当吸管，在C试剂瓶内充分吸取试剂1-2次，滴入测试池，旋转折断B试剂滴管，将B试剂滴入测试池；（5）读取结果：2分钟内与比色板（产品附带，见图2）比对显色情况，获取结果。检测结果判定标准：①阴性：不变色；② 弱阳性：淡蓝色或淡绿色；③ 阳性：蓝绿色或蓝色；④ 强阳性：深蓝色；⑤ 若显示池内标本先显示上述某种颜色，后转为深黄色或棕红色，表明样本内混有血液，应按照先出现的颜色进行结果判读（深黄色或棕红色是血液的征象）（见图2）。本研究中变色即为阳性，否则为阴性。
（三）肠镜检查
进行血分析、凝血分析、心电图、传染病四项检查，合格后行肠道准备：肠镜检查前一天进流食，前一天晚18点至20点，将2袋复方聚乙二醇电解质散溶于2000 m L 温开水中服用，后于4小时内再服2000ml温开水，排出清水样便视为肠道准备完成。将电子肠镜从肛门插入肠道，并在插入后边加气扩充肠道边推进肠镜，将肠镜顺利抵达盲肠后逐渐退镜观察至直肠，仔细观察直肠黏膜情况并记录清晰图像，异常病变处活检取病理，根据病理结果给与不同的临床治疗。
二、直肠黏膜渗液FH检测在诊断直肠癌前病变及直肠癌中应用的可行性
FH物质是细胞游离亚铁原卟啉的简称，它广泛存在于人体的每个细胞内，FH与不同蛋白质结合具有不同的生理功能。在P53发生突变或缺失的细胞中，致癌基因在最早期即导致直肠黏膜细胞代谢改变，出现“瓦博格效应（Warburg effect）”，形成肿瘤细胞局部大量还原型辅酶Ⅱ（NADPH）、还原型谷胱甘肽（GSH）等物质的集聚和低氧环境。通过激活缺氧信号传导通路，促使缺氧特异性转录因子-低氧诱导因子（hypoxia-inducible factor；HIF）和第二信使-活性氧族（ROS）活性增高。上述变化产生一种亲脂性物质（Hydrophilic fatty molecules）进入肿瘤细胞蛋白（HP）疏水核内，改变蛋白质α链CD3His和β链CD3Ser、E10Lys的极性量值，使位居其疏水核中的FH物质脱落。随着细胞的演变，细胞膜损伤（膜通透性增强、流动性下降和受体功能障碍）愈重，溶酶体内蛋白水解酶的溢出引起细胞自溶愈重，加之瓦博格氏效应愈加明显，FH物质渗出愈多。大肠上皮细胞在正常状态下持续释放，每4天更新1次肠黏膜，而在细胞恶变情况下脱落速度更快，是正常细胞的4～5倍。因此利用 FH 试剂检测脱落的肠道上皮细胞的 FH 物质，从肿瘤发生学角度及依据细胞代谢学原理从分子水平实现对结直肠癌进行早期筛查是可行的。
三、直肠黏膜渗液FH检测在诊断直肠癌前病变及直肠癌中应用的意义
从临床应用情况来看，直肠黏膜渗液FH检测在诊断直肠癌前病变及直肠癌过程中的阳性率明显较高，从临床角度验证致病因子使细胞稳定性失调时，FH从细胞器中脱落，导致细胞析出物中FH含量增高。直肠黏膜渗液FH检测诊断直肠腺瘤及直肠癌的敏感性较好，进一步验证直肠黏膜渗液FH检测作为早期筛查项目的可行性。
同时，直肠黏膜渗液FH检测无需专业人员操作，无需其它检查，无需预约，在处置室耗费几分钟即可完成，无疼痛，患者易于接受。另外，FH检测特异性低于肠镜检查，有较高的阳性率。这就提示我们：取标本避免过于用力，以免造成直肠组织损伤；若患者有痔疮、溃疡性结肠炎等肛门直肠疾病时，应先行治疗，待血便、脓血便症状消失再行FH检测，以避免假阳性的发生。同时，在致癌因素的作用下，抑癌基因 p53 突变，细胞内能量代谢途径及微环境发生改变，导致肠上皮细胞内 FH 含量增加，此种变化在细胞发生形态变化（肠镜能检测到）之前即可出现。基于此，在临床应用时，若FH为阳性，建议患者进一步行肠镜检查，或肿瘤标志物CEA、CA199等检测，或直肠指诊、粪便DNA检测等检查，以排查癌症，以免漏诊，做到真正意义上的早预防、早发现、早诊断、早治疗。
结语
FH检测无创采样，费用低，操作简便及适用人群广泛，有望为直肠疾病的诊治提供更加简便、快捷的筛查和随访指标，从而最大限度地降低我国直肠病变的发生率和死亡率，节约医疗成本，值得在临床中进一步深入探讨及应用。
参考文献：
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论文作者:王昕昕
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年6月17期
论文发表时间:2018/8/17
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