黑龙江省大庆龙南医院，黑龙江 大庆 163453
【摘要】目的：探讨胃癌患者外周血Cyttel循环肿瘤细胞检测及临床意义。方法：本次研究资料选取的研究时间是2017年7月~2018年12月，从此期间抽选58例胃癌患者作为观察组进行研究，检测方法是莱尔（Cyttel），抽取患者的外周静脉血进行检测。结果：观察组的阳性率显著较高于对照组，两组数值对比差异具有统计学意义，P<0.05。结论：循环肿瘤细胞的检测有助于胃癌转移的预测，采用Cyttel能够有效对胃癌转移肿瘤进行准确检测，值得临床深究应用。
【关键词】胃癌患者；肿瘤细胞检测；外周血Cyttel循环；临床意义
Detection and Clinical Significance of Cyttel Circulating Tumor Cells in Peripheral Blood of Patients with Gastric Cancer
Zu Shanshan
(Longnan Hospital, Daqing, Heilongjiang Province, 163453)
[Abstract] Objective: To investigate the detection and clinical significance of peripheral blood Cyttel circulating tumor cells in patients with gastric cancer. Methods: The data of this study were collected from July 2017 to December 2018. 58 patients with gastric cancer were selected as observation group to study. The detection method was Cyttel, and peripheral venous blood was taken for detection. Results: The positive rate of the observation group was significantly higher than that of the control group, and the difference between the two groups was statistically significant (P < 0.05). CONCLUSION: Detection of circulating tumor cells is helpful to predict the metastasis of gastric cancer. Cyttel can effectively detect the metastasis of gastric cancer and is worthy of further clinical application.
[Key words] Patients with gastric cancer; Detection of tumor cells; Cyttel circulation in peripheral blood; Clinical significance
胃癌属于恶性肿瘤疾病，早期胃癌接受治疗后其生存率较高，若随病情的迁延，不仅会增加临床治疗难度，患者的生命存在严重威胁[1]。造成胃癌患者死亡率高的主要原因是循环肿瘤细胞的转移和复发，该肿瘤细胞是指原有的肿瘤离开原发灶通过外周血液循环而形成，在遇到合适的环境会大量增殖，产生大面积的肿瘤转移病灶区[2]。本文研究中的重点是分析Cyttel检测法在胃癌患者外周血循环肿瘤细胞中的检测方法和意义。
1资料与方法
1.1一般资料
本次研究资料选取的研究时间是2017年7月~2018年12月，从此期间抽选58例胃癌患者作为观察组进行研究，所有入选患者均临床病理学检查确诊为胃癌，经统计，男性34例，女性24例，年龄范围是27~69岁，平均（48.88±4.67）岁,肿瘤分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期16例，Ⅲ期18例，Ⅳ期14例；肿瘤直径3cm以下者28例，3cm以上者20例，胃癌分化程度：低分化31例，高分化27例。另外同期选取本院胃部良性疾病患者40例作为对照组，其中男性26例，女性14例，年龄范围20~67岁，平均（45.66±4.38）岁，疾病类型：急/慢性胃炎14例，胃溃疡13，其他13例。两组患者的基础资料对比无明显差别，有可比性。
纳排标准：所有患者的疾病类型已经临床检查确诊，患者入院前未接受任何治疗，对本次研究内容知情且自愿参与；排除患有其他恶性肿瘤者、有肾病、心、干 功能不全者。
1.2 检测方法
1.2.1 血液采集
本次选用的检测方法是莱尔（Cyttel），抽取患者的外周静脉血进行检测，采集血液前先对穿刺部位的皮肤进行常规消毒，采集血液标本4ml加入枸盐酸葡萄糖 (ACD)抗凝剂，将其放置采血管中在4℃条件下保存，并保证本试验能在24h内完成。
1.2.2 富集循环肿瘤细胞
将采集的血液取出后放入离心管做离心试验，加入磷酸盐45ml，离心5min后弃上清，加入红细胞去除液后将其放入垂直混匀仪内充分裂解红细胞，同样方式离心5min后弃上清。加入μl磷酸盐重悬细胞沉淀，往里放入适量的磁珠，均匀摇晃20min。往离心管内加入3ml分离介质，将加有磁珠的混悬液导入分离介质上层做离心试验。吸取稀有细胞层放置离心管内离心，加入磷酸盐1ml，将此标本放置在磁力架，2min后将液体再次做离心处理，弃上清并加入100μl固体液，均匀混合后涂片，使用无风烘箱做干燥处理，完成imFISH鉴定。
1.2.3鉴定
在涂片上加入CEP－8 10μl，封片放置在杂交仪中1.5h，在2×SSC中洗涤两次，滴入抗体CD45至标本区，在避光37℃环境下孵育60min，在细胞区域加入DAPI 进行细胞核染色，将其置于荧光显微镜下观察、计数。
1.3 循环肿瘤细胞检测标准
（1）细胞核CEP－8 信号>2个，若两个信号之间的距离<单个信号直径即为染色体分裂现象，可将其当做一个信号点。（2）DAPI染色明亮，细胞核较大或小。（3）细胞膜CD45染色结果呈阴性；（4）细胞表明存在单个磁珠，甚至无磁珠。循环肿瘤细胞检出个数<2个视为阴性，≥2 视为阳性。
2结果
2.1 比较两组CTCs阳性率对比
从检测结果中能够得出，观察组中循环肿瘤细胞阳性39例，阴性19例，其阳性率为67.24%，而对照组中检测出的循环肿瘤细胞阳性3例，阴性为37例，其阳性率为7.50%，从对比来看，观察组的阳性率显著较高于对照组，两组数值对比差异具有统计学意义，P<0.05。见表1。
3讨论
胃癌是指发生在胃黏膜上皮的一种消化道恶性肿瘤，其发病率较高，在临床
3讨论
胃癌是指发生在胃黏膜上皮的一种消化道恶性肿瘤，其发病率较高，在临床中恶性肿瘤中占据首位，此病较多发生于中老年人群，其发病原因较复杂，与人们的生活环境、饮食、遗传以及病菌感染等相关，患者发病后最明显的症状是腹部疼痛难忍、浑身无力、食欲下降甚至存在营养不良状况，对人体健康造成极大伤害[3]。
循环肿瘤细胞（CTCs）是从实体瘤中转移分离出来进入外周血的肿瘤细胞，起初其转移细胞量较少，但时间一长会导致转移肿瘤复发[4]。关于此肿瘤细胞的检测目前已经被更多应用多种恶性肿瘤的检测，其中Cyttel 检测法具有较好的CTCs的识别率，还能减少对其他细胞的损伤[5]。
综合上述，循环肿瘤细胞的检测有助于胃癌转移的预测，采用Cyttel能够有效对胃癌转移肿瘤进行准确检测，值得临床深究应用。
参考文献
[1]邓显伦,冯立波,徐建伟,向继勇,夏冬.胃癌患者外周血常规指标与肿瘤淋巴结转移关系分析[J].重庆医学,2018,47(09):1266-1268.
[2]孙颖,马瑾,胡梅洁,郑雄,李健,顾玮.胃癌患者外周血miR-183水平的临床意义[J].上海交通大学学报(医学版),2017,37(01):75-79.
[3]张力,赵棉,贺帅.胃癌患者外周血Cyttel循环肿瘤细胞检测及临床意义[J].临床和实验医学杂志,2018,17(07):772-774.
[4]许彬彬,陈志红,汪超,魏法星.胃癌患者外周血IL-26的水平及其诊断价值[J].江苏大学学报(医学版),2016,26(05):429-432.
[5]马东红,郭鹏,黄博.胃癌患者外周血炎性指标临床应用研究现状[J].中国现代医药杂志,2016,18(10):102-105.
论文作者:祖珊珊
论文发表刊物:《中国结合医学》2019年第03期
论文发表时间:2019/5/15
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