（天水市麦积区中医医院 甘肃 天水 741000）
摘要：目的ABO血型和Rh血型是人类红细胞上最重要的血型系统之一。Rh血型中的D抗原具有较大的临床意义，因此在常规检查中一般只鉴定Rh阴性和阳性[1]。方法：通过应用固相法、纸片法、微柱凝胶法同时检测门诊患者血型，评价固相法是否能用于门诊患者ABO血型及RhD血型定型。结果:固相法与微柱凝胶法符合率为100%。结论:固相法血型定型试剂操作简单快捷，携带方便，准确性高，适合流动采血点和应急采血初筛，尤其可以用于门诊患者ABO\RhD血型定型。
【关键词】：固相法 门诊患者ABO、 RhD血型定型
【中图分类号】R193.3【文章标识码】A
Solid phase method in outpatients ABO, RhD application of blood typing
ChengYongPing (tianshui wheat product area hospital of traditional Chinese medicine hospital clinical laboratory, gansu tianshui 741000). The purpose: ABO blood group and Rh blood group is one of the most important blood group system on the human red blood cells. D of Rh blood group antigen has great clinical significance, therefore only commonly in the routine inspection appraisal Rh negative and positive [1]. Methods: by using solid phase method, the paper method, micro column gel method detection outpatient blood type at the same time, whether the evaluation method of solid phase can be used for outpatients of ABO blood group and RhD blood typing. Results: the solid phase method and micro column gel method coincidence rate was 100%. Conclusion: the method of solid phase blood typing reagents operation simple and quick, easy to carry, high accuracy, suitable for mobile blood point and early emergency blood screening, especially can be used in the clinic patients ABO \ RhD blood typing.
Key words: solid phase method Outpatients ABO, RhD blood typing
自从1900年Landsteiner发现ABO血型并因此获贝尔奖以来，血型在治疗学、遗传学、法医学、人类学及考古学上的应用日趋广泛，已发展成一门血型学。在红细胞血型系统中，以ABO血型系统发现最早，应用最广，与临床输血关系最密切，最重要，其次是Rh系统[2]。医院门诊患者鉴定血型是常规检测之一，在本地区，医院门诊检测血型，大多数采用纸片法或玻片法，由于方法学限制，检测的准确度较差，本调查在门诊患者检测血型中应用固相法检测，检测结果与微柱凝胶法结果一致，虽然固相法的成本略高于纸片法，但操作简单，结果易于观察，易于留存，不需要其它设备，适合于门诊大批量的快速血型鉴定。
1 材料与方法
1.1 研究对象天水市麦积区中医医院医院2012年11-12月门诊申请检测血型患者500人次，均用EDTA-K2抗凝。
1.2 试剂与仪器ABO血型正定型及RhD血型定型试剂盒固相法（英科新创（厦门）科技有限公司）、抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）（上海血液生物医药有限责任公司）、抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）（英国 MILLPORE）、反定型红细胞（自制）、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）（长春博迅生物技术有限公司）、免疫微柱孵育器，血型血清学离心机（长春博迅生物技术有限公司）。所有试剂均按厂家说明书操作。
1.3 标本处理 申请血型检测患者EDTA-K2抗凝血标本2毫升，固相法检测血型后，1000g离心5min备用。
1.4血型测定：
1.4.1每份标本先用固相法试剂测定血型，该试剂根据抗原抗体免疫吸附原理进行血型鉴定，将抗A、抗B、抗D单克隆抗体分别固定于多孔固相载体上，当待测样本中的红细胞和固相抗体发生免疫结合反应，红细胞即被截留在载体上，显示红色，为阳性反应；如无抗原抗体免疫反应，红细胞则不能被截留，显示无色，为阴性反应。（结果见图1）
两例O型患者纸片法正定型为O型，反定型为A型，经微柱凝胶法确认，该患者血型为O型，抗B效价为2。
3 讨论
ABO血型系统是根据红细胞表面有无特异性抗原A和B来划分的血液类型系统。根据凝集原A，B的分布把血液分为A，B，AB，O四型。红细胞上只有凝集原A的为A型血，其血清中有抗B凝集素；红细胞上只有凝集原B的为B型血，其血清中有抗A的凝集素；红细胞上有A，B两种凝集原都有的为AB型血，其血清中无抗A,抗B凝集素；红细胞上有A,B两种凝集原皆无者为O型，其血清中抗A，抗B凝集素皆有。具有凝集原A的红细胞可被抗A凝集素凝集；抗B凝集素可使含凝集原B的红细胞发生凝集。输血时若血型不合使输入的红细胞发生凝集，引起血管阻塞和血管内大量溶血，造成严重后果。所以在输血前必须做血型鉴定。
RH血型系统是一般指Rh系统中D抗原的检测，根据病人红细胞是否带有D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。Rh血型系统一般不存在天然抗体，故第一次输血时不会发现Rh血型不合。但Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液后，可产生免疫抗体Rh抗体，如再次输受Rh阳性血液时，即可发生溶血性输血反应。因此，临床输血前Rh血型系统的检测也是常规必要的。
临床上常用的检测ABO，RhD血型的试剂有两种，一种为抗A，抗B标准血清检测血型的试剂和RhD血型检测试剂，它是利用抗原抗体的凝集的方法来判断结果；一种为微人球蛋白试验阳性，新生儿溶血病或获得性溶血，前者为液体的抗A，抗B血型试剂，其对含有自身冷凝集素的受检者，往往被误定为AB型。玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。后者微柱凝胶卡法检测血型灵敏度高，结果易标准化，易判断，结果保存时间长，但相对成本较高，受纤维蛋白及冷凝蛋白的影响也会产生假阳性。操作时间相对较长，不适用于门诊患者检测血型。
ABO，RhD血型检测卡准确率极高，它是根据抗原抗体免疫吸附原理进行检测的。将A,抗B抗体及D抗体分别固定于多孔固相载体垫上，当待测样本中的红细胞与固相抗体发生免疫结合反应，红细胞即被载留在固相载体上，反应孔显示为红色，即为阳性反应；如抗原抗体无免疫反应发生，游离的红细胞即可被冲洗液冲走，反应孔显示为无色，为阴性反应。为此反应结果清晰可见，易于判断。血型检测卡可被放在2-30摄氏度环境中储存，即可放在常温环境中，保存简便，避免了标准血清使用时可能产生冷藏凝集现象。另外，这种血型检测卡操作简单，结果显示快速，携带方便，特别适合与大批量血型检测的筛查。
固相法试剂的不足之处是现有试剂只能进行ABO血型正定型。此外，本研究中只针对门诊常规标本，样本量较少，没有涉及亚型，疑难血型的影响因素。今后，还将继续加大样本量，进一步证实固相法在门诊患者检测血型的准确性和可行性。
参考文献
[1] 赵桐茂.人类血型遗传学.北京:科学出版社,1987:103.
[2]林武存.临床检验学.北京：科学技术文献出版社，1994：111.
论文作者:成永平
论文发表刊物:《解放军预防医学杂志》2015年第7期供稿
论文发表时间:2016/1/27
标签：血型论文; 红细胞论文; 抗体论文; 试剂论文; 抗原论文; 门诊论文; 患者论文; 《解放军预防医学杂志》2015年第7期供稿论文;