（陕西省汉中市食品药品检验检测中心 陕西 汉中 723000）
【摘要】 建立快速的高效液相法同时测定粉条中10种合成着色剂的方法。Agela C18柱分离，甲醇：乙酸铵（0.02mol/L）为流动相。在0.50～105.00ug/L范围内10种着色剂的质量浓度均与色谱峰面积呈良好的线性。方法检出限为0.01～0.3μg/kg，加标回收率为91.89～102.80%，测定结果的相对标准偏差为2.0%～8%（n=5）。该方法简单、准确、快速，适用于粉条中合成着色剂的定量分析。
【关键词】 高效液相色谱；合成着色剂；粉条
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）34-0394-02
Simultaneous determination of 10 synthetic colorants in vermicelli with high performance liquid chromatography
Yufeng Ma,Yunhui Zhao, Huang Wen, Ren Jie,Liu Bin,Din Wei.Han zhong institute for food and drug control, Han zhong 723000, PR China
【Abstract】To establish a simple method for the determination of ten kinds of synthetic colorant invermicelli at the same time. samples were extracted by ultrasonic processing with water. Sample were separated by liquid chromatography with carbinol and acetic ammonium solution (0. 02 mol / L) mixture as mobile phase.The calibration curves showed a good linearity with correlation coefficients from 0. 9990 to 1. 000 0. The detection limit was from 0. 01 to 0. 3 μg / kg. The recovery of the method was from91.89～102.80%,and the relative standard deviation (RSD) was from 2.0%～8%（n=5）.The method is simple, and accurate,fast,and can be used to accurate detection of synthetic colorants in vermicelli .
【Key words】 High performance liquid chromatography( HPLC);Synthetical colour;Vermicelli
人工合成着色剂主要以苯、甲苯、萘等化工产品为原料合成，其成本低、色泽鲜艳、着色力强、易溶解，易调色，故常用于食品着色，过多食用会危害人体健康。对于食品中合成着色剂的检测目前国内外合成着色剂的方法主要有HPLC法[1]，UPLC-MS法[1]，毛细管胶束电动色谱法[2]等。本文建立了粉条中10种合成着色剂的高效液相定量方法，缩短了测定时间，提高工作质量和效率，得到满意结果。
1.实验部分
1.1 主要仪器与试剂
安捷伦1260型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD）；柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄标准品为Dr.Ehrenstorfer GmbH（纯度为87.0%～93.1%）；甲醇为色谱纯试剂，其他试剂均为分析纯试剂，所有水为去离子水。
1.2 试验方法
1.2.1合成着色剂标准储备液的配制 分别配制0.5mg/mL的柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄混合标准储备液，于冰箱中-4℃保存。
1.2.2样品处理方法 取约5g粉碎后的粉条样品，于50mL的离心管中，加水定容至刻度。超声提取，涡旋，离心后过0.22μm滤膜，进行HPLC分析。
1.2.3液相色谱分离条件 色谱柱AgelaC18柱（5μm，4.6mm×250mm）流动相：甲醇：水（0.02mol/L乙酸铵20：80）梯度洗脱；流速1.0mL/min；进样量10μL；柱温30℃。采用多通道检测，检测波长：柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄分别230、254、428、484、509、531、611nm。
2.结果与分析
2.1 着色剂的工作曲线
柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄回归方程分别为Y1=5.05E-10X、Y2=3.98E-10X、Y3=3.15E-10X、Y4=7.03E-10X、Y5=4.5E-10X、Y6=7.21E-10X、Y7=5.38E-10X、Y8=6.32E-10X、Y9=2.87E-10X和Y10=5.66E-10X相关系数 R2分别为1.0000、1.0000、0.9999、0.9998、0.9991、0.9996、0.9999、0.9992、0.9995和0.9990。
2.2 保留时间
经测定标准试样柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄的HPLC色谱图见图1。
图1 10种合成着色剂标准试样色谱图
Figure 1 HPLC chromatography of 10 synthetic colorant standards
1：柠檬黄；2：新红；3：苋菜红；4：靛蓝；5：胭脂红；6：日落黄； 7：诱惑红；8：亮蓝；9：喹啉黄；10：赤藓红
2.3 重复性及回收率试验
将 0.005mg/mL的柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄重复进样 (n=5)，其结果良好，该检测方法重复性良好。柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄的标准平均回收率分别为100.02±1.05%、99.20±1.80%、91.89±3.12%、102.80±2.23%、94.56±2.65%。
3.讨论
3.1 波长的选择
国家标准GB/T 5009.35-2003《食品中人工合成着色剂的测定方法》[3]中方法采用254nm测定不同种类着色剂，但灵敏度不高，分离度不好。本方法在确定最佳梯度后，对检测波长进行了优化，对不同着色剂采用多波长检测，大大地提高了各种着色剂的灵敏度和特异性。
3.2 流动相的选择
本项实验目标是同时测定10种合成着色剂，必须采用梯度洗脱。以甲醇+0.02mol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱，能将10种着色剂进行有效分离，且峰形良好，保留时间稳定。
4.结论
本研究建立梯度洗脱，多波长同时测定粉条中10种合成着色剂，处理方法简单、线性范围好、灵敏度高、准确度高、受杂质峰干扰小、分离效果好、测定结果稳定可靠，能满足食品中合成着色剂的检测要求，具有实际应用价值。
【参考文献】
[1] KUCHARSKA M，GRABKA J.A review of chromatographic methods for determination of synthetic food dyes[J].Talanta，2010，80: 1045-1051.
[2] THOMPSON C O，TRENERRY V C.Determination of synthetic colours in confectionery and cordials by micellar electrokinetic capillary chromatography[J].J Chromatogr A， 1995，704:195-201.
[3]中华人民共和国卫生部.GB/T 5009.35—2003食品中人工合成着色剂的测定方法[S].北京:中国标准出版社，2004.
论文作者:马玉凤,赵芸卉,黄文,任杰,刘彬,丁伟
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第34期
论文发表时间:2016/12/8
标签：着色剂论文; 喹啉论文; 靛蓝论文; 柠檬黄论文; 苋菜论文; 胭脂红论文; 粉条论文; 《医药前沿》2016年12月第34期论文;