（唐山市食品药品综合检验检测中心 063000）
摘要：目的 探究桔贝合剂中黄芩苷的含量测定中HPLC法的应用。方法；Spherisorb C18（200mm× 4.6mm，5μm）、甲醇-水-磷酸（47∶ 53∶ 0.2）分别为本次研究中的色谱柱与流动相，检测波长与流速具体为280nm、1mL·min- 1，柱温为室温。结果 进样量在0.102 4～ 0.921 6μg范围内的黄芩苷，其与峰面积积分值呈现出线性关系；平均加样回收率达到了99.98%，RSD= 0.95%（n= 6）。结论 HPLC法具有高分离度与高精密度优势，因此可以广泛应用于桔贝合剂中黄芩苷的含量测定，且能够有效控制桔贝合剂的质量。
关键词：桔贝合剂；黄芩苷；含量测定；HPLC法应用
桔贝合剂在我国临床上是一种比较常见中药成方制剂，该处方主要由桔梗、甘草、浙贝母、黄芩、麦冬、苦杏仁以及枇杷等成分组成，其功能是润肺止咳，主要应用于痰稠色黄、肺热咳嗽以及咯痰不爽等疾病的治疗过程当中。但由于原质量标准只包括简单的性状与检查，因此无法严格有效的控制药物的质量。为此，该项研究主要根据厂家的具体要求，对其质量标准与生产工艺进行系列的试验研究。
1 仪器与试药
该项研究需要准备与使用的仪器与试药具体如下：LC-20AT高效液相色谱仪、色谱工作站、SPD-20A紫外检测器。桔贝合剂（江西诚志永丰药业有效责任公司）；供含量测定使用的黄芩苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110842- 201207）；甲醇与水分别为色谱纯与超纯水，其他试剂都为分析纯。
2方法
2.1色谱条件与系统适应性试验
色谱柱与流动相分别为SpherisorbC18（200mm× 4.6mm，5μm）、甲醇-水-磷酸（47∶ 53∶ 0.2）；柱温：室温；流速设置在为：1mL·min- 1；检测波长为280nm。理论塔板数要根据黄芩苷峰进行计算，且不能少于3 000；分离度要>1.5。
2.2 对照品溶液的制备
依据实验要求，选取适量的黄芩苷对照品，加入乙醇，并将其制成每1mL含有0.05mg的溶液，摇晃均匀即可。
2.3供试品溶液的制备
在精密条件下，吸取本品5mL，将其置入25mL容量瓶中，并添加乙醇到标准的刻度，混合摇匀，静置10min后滤过，把滤液当做此次研究的供试品溶液。
2.4线性关系考察
分别吸取2μL、6μL、10μL、14μL、18μL的黄芩苷对照品溶液（0.051 2mg·mL- 1），根据上述色谱条件进样，并记录色谱图，将进样量（C）与峰面积积分值（A）分别当中纵坐标与横坐标[2]，在此基础上作图，进行计算，最终回归方程如下：C= 5.588 5× 10- 7A— 6.676 8× 10- 3（r= 0.999 7）。由此数据证明，进样量在0.102 4～ 0.921 6μg范围内的黄芩苷，其与峰面积积分值呈现出较为良好的线性关系。
2.5精密度试验
对黄芩苷对照品溶液（0.051 2mg·mL- 1）进行5次重复的进样，认真记录色谱图，准确计算结果。最终得出的结果RSD= 0.37%。
2.6重现性试验
选取同一批次的样品，根据“2.3”中所描述的方法制出6份相同的供试品溶液，分别实施进样，详细记录色谱图，计算结果，RSD= 0.82%。
2.7加样回收率试验
选取已经完成测量，且得出准确含量的2mL供试品溶液（0.251mg·mL- 1），将其置于25mL的量瓶中，并混入10mL的黄芩苷对照品溶液（0.051 2mg·mL- 1）[3]，采用“2.3”中的方法完成具体操作，根据上述色谱条件完成进样测定，准确的计算出回收率。详细数值见表1。
表1 加样回收率试验结果（n= 6）
4 讨论
据相关参考文献与本次试验结果显示，波长为280nm处的灵敏度较好，且无杂质干扰，因此要优先选择280nm为测定波长。流动相则应用甲醇-水（47∶ 53），黄芩苷峰拖尾因子具体为0.86，混入0.2mL磷酸后，黄芩苷峰呈峰形对称[4]。因此，甲醇-水-磷酸（47∶ 53∶ 0.2）为最终的流动相。另外，在制备供试品溶液的过程中，由于研究样品为液体制剂，因此就可以直接直接添加甲醇与乙醇，并将其稀释到标准的刻度，实施滤过与进样[5]。进样结束后，含量无明显差异，但综合考虑到甲醇的毒性相对较大，因此就要选择经乙醇稀释后进样。
参考文献
[1]吴仲，张勋.HPLC法同时测定山楂异槲皮苷和金丝桃苷含量[J].吉林中医药，2019，39（07）：949-952.
[2]覃彪，邓明启，黎敏，林锦良，唐承性.HPLC法同时测定伤痛克酊中3种姜黄素的含量[J/OL].化学试剂：1-6[2019-08-03].
[3]王海宁，杨翰.HPLC法测定桔贝合剂中黄芩苷的含量[J].中国药房，2007（27）：2132-2133.
[4]杜世芳，王林茂.HPLC法测定注射用兰索拉唑主药及相关含量研究[J].全科口腔医学电子杂志，2019，6（18）：141.
[5]张英姿，戴子启.HPLC法在接骨七厘片龙血素B含量测定中的应用[J].辽宁中医杂志，2019，46（06）：1259-1261.
论文作者:沈立茹
论文发表刊物:《航空军医》2019年8期
论文发表时间:2019/9/23
标签：黄芩论文; 色谱论文; 溶液论文; 合剂论文; 含量论文; 甲醇论文; 回收率论文; 《航空军医》2019年8期论文;