【摘要】目的：探讨痰液性状和保存条件对结核菌培养阳性率的影响。方法：选择我中心从2017年1月～2019年8月收集的痰液标本397份进行结核菌分离培养，对不同性状、不同保存条件的痰液标本培养结果进行分析。结果：根据痰液性状分为干酪痰、黏液痰、血性痰、唾液，其结核菌培养阳性率分别为75.54%、26.90%、40.91%、7.14%（P<0.05）；在痰液采集当天、采集后3d，在－18℃、4℃、25℃、30℃的保存温度下结核菌培养阳性率无明显差异（P>0.05），在采集后7、14、21 d 培养阳性率有明显差异（P<0.05），且随着温度增加，痰液培养阳性率越低。结论：干酪痰的结核菌培养阳性率最高，采集标本时宜选择干酪痰，保存痰液标本时尽量在－18℃条件下保存。
[关键词] 痰液性状；保存条件；结核菌；结核菌培养
痰结核菌分离培养是结核病病原学诊断的“金标准”，但由于痰培养时间长，诸多因素均可对其结果影响造成影响，如痰标本的采集方法、采集时间和量、保存条件、培养基[1]等。痰液质量是确保培养结果准确性的基础，其中痰液性状、保存条件对痰液质量至关重要，本文对两者对结核菌培养结果的影响进行分析。
1 资料与方法
1.1资料 选择我中心从2017年1月～2019年8月收集的痰液标本397份，
根据痰液性状分为干酪痰（82份）、黏液痰（253份）、唾液（43份）、血性痰（19份）四种。
1.2方法
1.2.1痰结核菌培养方法 分批采集痰液标本，采用4%氢氧化钠对标本进行处理后，于酸性罗氏培养基接种，培养8周后观察结果。
1.2.2不同保存条件标本的培养 取上述痰涂片阳性的标本220份，分为4组各55份，分别在－18℃、4℃、25℃、30℃时环境下保存，保存时间分别为0、3、7、14、21 d，然后进行痰结核菌分离培养。
1.3统计学方法 所有数据输入SPSS17.0软件包，率的比较用χ2检验。
2 结果
2.1 不同性状痰液结核菌培养阳性率比较 合计培养397份痰标本，培养阳性141份，阳性率为35.51%。其中干酪痰阳性率最高，唾液最低，四种性状痰液培养阳性率差异有统计学意义（χ2= 183.523，P<0.05）。见表1。
2.2不同保存条件结核菌培养阳性率比较 在痰液采集当天、采集后3d，不同保存温度下结核菌培养阳性率无明显差异（P>0.05），在采集后7、14、21 d 培养阳性率差异有统计学意义（P<0.05），且随着温度增加，培养阳性率越低。见表2。
3讨论
结核菌培养是检测结核菌的最佳方法，尤其是对痰涂片检查阴性的疑似肺结核患者，通过结核菌培养可以作出进一步确认，为临床诊断和治疗提供依据，同时也利于发现结核菌阳性患者，及时给予其治疗，以防止其作为传染源传播结核菌。但由于受痰标本质量、患者排菌量、培养基、操作方法等的影响，结核菌培养仍存在一定漏检率。
本研究中，不同性状痰液干酪痰、黏液痰、血性痰、唾液的结核菌培养阳性率分别为75.54%、26.90%、40.91%、7.14%，与何涛[2]报道的73.72%、25.19%、52.24%、8.45%研究结果相似。与辛宗艳[3]报道的35.8%、9.9%、41.2%、1.1%，以血性痰阳性率最高的结果有差异。本研究中，不同性状痰液培养阳性率有明显差异。其中以干酪痰培养阳性率最高，其次血性痰，唾液最低，不超过10%，辛宗艳[3]报道仅为1%。干酪痰是由肺部深处咳出，对痰涂片和痰培养的价值最大；粘液痰多来自支气管；血性痰在实验室检查时应尽量避免含血部分，以提高阳性率；唾液结核菌含量极低，为不合格样本。在留取痰液标本时应对患者进行健康教育，指导其正确的痰液留取方法，尽量留取干酪痰，以避免由于痰液样本质量影响培养结果。
将结核菌阳性痰液置于－18℃、4℃、25℃、30℃时环境下保存，结果发现，在不同温度下，结核菌培养阳性率在痰液采集当天、采集后3d无明显差异，采集后7、14、21 d有明显差异。 在－18℃时，标本采集后各时间段无明显差异，在其余保存温度下随着保存时间的延长，结核菌培养阳性率明显下降。在4℃条件下，培养阳性率第14d开始明显下降，在25℃、30℃时条件下，第7d即开始明显下降，在30℃条件下第21d结核菌培养阳性率仅有25.45%。郑瑶等[4]报道在30℃条件下，在28 d 标本培养阳性率为 0 %。提示痰液标本保存时间和保存温度均是影响结核菌结果准确性的重要因素。随着保存时间的延长和保存温度的增加其准确性呈下降趋势。可能与随着保存温度的增加和保存时间的延长，痰液标本中其他类型的细菌逐渐增加，对标本造成的污染逐渐严重，而结核菌数量会逐渐减少[5]有关。提示在结核菌培养实验时，应尽量在收集标本后及时培养，若不能做到及时培养，应尽量在－18℃条件下保存，在其他温度下也应尽量在3d内进行接种培养，以减少污染，保证培养结果的准确性。本研究结论与其他学者研究相似，但具体的保存时间略有差异。何涛等[2]报道，痰液标本在－18℃条件下在一个月内、在4℃、25℃、 30℃保存7d内，结核菌培养阳性率无明显变化，而后结核菌培养阳性率会明显下降。郑瑶等[4]报道在4℃、25℃、 30℃时，痰液标本保存21d 后，培养阳性率才出现明显下降。可能与不同实验室人员操作标准掌握不一致等因素有关。
总之，痰液性状、保存温度、保存时间均会影响结核菌培养结果。在临床工作中，应做好护理人员、实验室人员及患者的宣教，提高其对痰液留取、送检、保存、接种培养等操作环节重要性的认识，正确留取痰液标本；实验室人员严格按规范、流程操作，以提高结核菌培养结果准确性，使其等真实地反映患者感染及治疗情况，以指导医师正确用药。由于部分肺结节患者可能为间歇排菌，对临床高度疑似病例，可多次进行痰结核菌培养，以提高诊断率。
参考文献
[1]张肖,朱同华,沈国荣.痰标本分析前涂片镜检的临床价值分析[J].国际检验医学杂志,2016,37(11):1559-1561.
[2]何涛,党明,孟华河.痰液性状和保存条件对结核菌培养阳性率的影响评价[J].河南预防医学杂志，2018,29(11):810-812.
[3]辛宗艳,沈梅,王蜀湘.不同性状的痰标本对抗酸杆菌检出率的影响[J].新疆医学,2015,45(10):1429-1431.
[4]郑瑶．痰液性状和保存条件对结核菌培养阳性率的影响[J].当代医学, 2016, 22(25):63-64.
[5]张永强,刘兰瑞,张雁,等.3 种方法检测不同性状痰标本抗酸杆菌阳性率比较[J].中国卫生检验杂志,2017,27(6):814-815.
论文作者:李鸿敏
论文发表刊物:《医师在线（学术版）》2019年第16期
论文发表时间:2019/10/28
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