平度市第二人民医院 266731
化学发光免疫分析是20世纪80年代以来发展起来的一项新的标记免疫技术，可测定内分泌激素、肿瘤标志物、血药浓度、传染病、心血管疾病标志物、贫血及过敏原等项目，，测定速度快，测定项目齐，近2年在国内逐渐推广。本院利用最新全自动化学发光免疫分析仪，检测100例患者甲状腺功能，对其性能进行综合评价。现报告如下：
1材料与方法
1.1仪器：美国贝克曼全自动化学发光免疫分析仪。
1.2 试剂：发光试剂是贝克曼公司配套试剂、质控品、标准品。
1.3 对象：随机抽取2012年1月至2013年6月本院门诊和住院100例患者，，平均年龄41岁。男女比例1：3 每例取3 ml血，离心3000 r/min，10分钟，取血清-70 ℃保存备用。
1.4检测方法：利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法，其反应原理与放免和酶免中的双抗夹心法、竞争法相似，严格按试剂盒操作说明书操作。
1.4.1 批内精密度：100例血清样本，分别测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量，取其中高，中，低三种浓度的血清样本，每种浓度同批平行测定10次计算其变平均异系数（CV）。 1.4.2 批间精密度：取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高，中，低三种浓度的血清样本，各10份每天各测定1次，共测定10天，计算其变平均变异系数（CV）。
1.4.3 回收率：由贝克曼公司提供原装3个浓度的标准品，分别测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量，每个浓度重复测定3次，计算平均回收率。
1.4.4 线性范围：收集患者血清标本，取T3、T4、FT3、FT4浓度高于厂家提供可报告范围上限作为高值浓度水平（H），厂家提供稀释液作为低值浓度水平（L），用稀释液稀释高值浓度血清，形成如下系列浓度检测标本：1H+1L、4H +1L、3H +2L、2H +2L、2H +3L、1H +4L、0H +1L。用配制成的系列浓度标本平行测定各项指标含量，取平均值作图，取在坐标纸上呈明显直线趋势的个点值进行直线回归统计，取回归系数r大于0.9的浓度范围为可报告的浓度线性范围。
2结果
2.1批内精密度 T3、T4、FT3、FT4、TSH的平均变异系数分别为4.4%、4.9%、3.0%、4.5%、3.5%。
2.2批间精密度T3、T4、FT3、FT4、TSH的平均变异系数分别为6.9%、5.3%、3.5%、6.2%、4.8%。
2.3回收率T3、T4、FT3、FT4、TSH的平均回收率分别为96，7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%。
2.4线性范围
T3所测结果得到回归方程：y=1.069x-0.2468，r=0.9966，截距经t检验，ta=1.36，＜t0.05（4）=2.776，截距与0无统计学差异。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆由此可确定厂家提供的线性范围有效T3可报告范围为0.15～12.3 nmol/L
T4所测结果得到回归方程：y=0.99x 0.79542，r2=0.995，＞0.95，截距经t检验，ta=0.36，＜t0.05（4）=2.776，截距与0无统计学差异。由此可确定厂家提供的线性范围有效，即T4的可报告范围为3.9～387.0 nmol/L，。
FT3所测结果得到回归方程：y=1.098x-0.8466，r2=0.9966，截距经t检验，ta=1.90，＜t0.05（4）=2.776，截距与0无统计学差异。由此可确定厂家提供的线性范围有效，即 FT3的可报告范围为0.3～30.8 pmol/L，
FT4所测结果得到回归方程：y=1.2508x-6.9132，r2=0.9799，截距经t检验，ta=1.66，＜t0.05（4）=2.776，截距与0无统计学差异。由此可确定厂家提供的线性范围有效，即FT4的可报告范围为1.3～155.0 pmol/L，。
TSH所测结果得到回归方程：y=1.1709x-7.358，r2=0.9799，截距经t检验，ta=0.83，＜t0.05（4）=2.776，截距与0无统计学差异。由此可确定厂家提供的线性范围有效，即TSH的可报告范围为0.01～150.00 mIU/L， 即T3可报告范围为0.15～12.3 nmol/L，T4的可报告范围为3.9～387.0 nmol/L，FT3的可报告范围为0.3～30.8 pmol/L，FT4的可报告范围为1.3～155.0 pmol/L，TSH的可报告范围0.01～150.0 mIU/L。
3 讨论：
血清中三碘甲状原腺氨酸（T3）、四碘甲状原腺氨酸（T4）、游离三碘甲状原腺氨酸（FT3）、游离四碘甲状原腺氨酸（FT4）、促甲状腺激素（TSH）的测定对甲状腺疾病的诊断具有重要价值。以往国内实验室多采用RIA、MIRA检测血清甲状腺激素水平，此法虽较准确，仪器与试剂也较为低廉，但对操作人员水平要求较高，对实验条件及环境有较多要求，且随着标记抗原的放射性衰减，而使计数不稳定及典线失真，导致结果偏离，结果重复性差，一般情况下（正常范围时）CLIA的批间CV小于4%，方法可行，但当样品浓度很低时（0.014～0.025 mU/L），批间CV可达15%，而IRMA均较高（分别为7.08%、12.1%、33.89%），可能与方法学有一定关系，且可产生放射性污染。 近年来，化学发光酶免疫分析法（CLIA）逐渐代替RIA、MIRA，这种方法的反应原理是用能产生化学发光的化合物代替放射性标记物，此化合物在碱性条件下遇过氧化物便发生单光子发射，光子数量与结合在抗原抗体复合物上的发光化合物的量成正比，因此反映抗原抗体复合物的量。全自动化学发光免疫分析系统是利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法，其反应原理与放免和酶免中的双抗体夹心法、竞争法相似。
其优点是：（1）成熟的单克隆抗体技术或独特的磁性微粒子技术，保证了反应的高特异性；（2）检测范围广：T3可报告范围为0.15～12.3 nmol/L、T4的可报告范围为3.9～387.0 nmol/L、FT3的可报告范围为0.3～30.8 pmol/L、FT4的可报告范围为1.3～155.0 pmol/L，TSH的可报告范围0.01～150.0 mIU/L。稳定性好，不需酶促反应，有效期可长达半年；（3）操作简便，采用全自动仪器分析；（4）试剂及标本均采用无吸附材料，故相互间的交叉污染率低，干扰因素少；（5）真正的随机连续检测，样本随到随测，具有急诊优先插入功能。（6）灵敏度高，可达 10～15 mol/L，重复性好，T3、T4、FT3、FT4、TSH的批内精密度分别为4.4%、4.9%、3.0%、4.5%、3.5%，批间精密度分别为6.9% 5.3%、3.5%、6.2%、4.8%。（7）分析过程采用全自动化，减少了人工操作，出现良好的精密度，批内、批间差异均较小，而且此法具有良好的稀释线性， 化学发光检测系统测定甲状腺功能具有灵敏度高，可报告范围宽，重复性好等优点，适合于临床应用。
参考文献：
[1] 王学晶，徐国宾，李海霞，等.化学发光免疫分析法测定血浆B型钠尿肽的评价及参考区间调查[J].临床检验杂志，2009，27（4）：283-285
[2] 陈恺杰，揭育丽，陈建英.心血管疾病患者血中N末端B型脑钠肽水平的检测及临床意义[J].国际检验医学杂志，2010，31（5）：482-484
[3] 谢玮，赵枰，陶国华，等.化学发光免疫分析测定胰岛素及C肽在2型糖尿病诊断中的临床应用[J].标记免疫分析与临床，2009，16（5）：283-285
[4] 宋玉庭，张萌萌，吴乃宝.化学发光免疫分析和放射免疫分析测定血清CEA、CA-153结果的评价[J].中国实验诊断学，2010，14（5）：766-767
论文作者:侯鹏,代荣荣
论文发表刊物:《健康世界》2015年18期
论文发表时间:2016/3/8
标签：浓度论文; 报告论文; 血清论文; 免疫论文; 精密度论文; 化学论文; 线性论文; 《健康世界》2015年18期论文;