(遂宁市中心医院检验科 四川遂宁 629000)
【摘要】目的:探讨疟原虫胶体金试剂条法与血涂片法在疟原虫检测中的结果比较分析。方法:选取本院院2012年5月至2016年5门诊及住院收治发热并怀疑疟原虫感染患者86例,抽取血液标本,分别采用疟原虫胶体金检测卡与血涂片法进行疟原虫筛查,比较2种方法用于疟原虫检测诊断价值。结果:全部患者血涂片法检出疟原虫阳性例数为8例,阴性78例,阳性率为10.3%;胶体金试剂条法检出疟原虫阳性例数为10例,阴性76例,阳性率为11.6%;胶体金检测卡用于疟原虫检测灵敏度为100.00%(10/8),特异度为97.43%(76/78)。结论:胶体金试剂条法与镜检法相比无显著性差异,筛查疟原虫更具有操作简便,诊断速度快及技术要求低等优势,适用于基层医院和大规模普查。
【关键词】疟原虫;胶体金试剂条法;镜检法;诊断价值
【中图分类号】R38 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2017)02-0152-02
川中地区虽然不属于疟原虫高发地带,但是随着外出务工人员(比如云南、非洲)的增加,疟原虫感染的风险也增加。正确快速的检测疟原虫的研发工作是目前疟原虫的发展方向。目前疟疾诊断常用也是金标准的方法是血涂片吉姆萨瑞士染色显微镜下查找疟原虫;但此方法操作繁琐,对实验室工作人员的操作水平有一定的要求,不适合基层快速诊断和大规模筛查[1]。近年来,免疫层析试条技术的发展为快速诊断疟疾提供了条件,取得了一定的研究进展。本试验来源于本院门诊及住院发热及怀疑有疟原虫感染的86例病人,抽取血液标本,用胶体金检测试试条法和血涂片两种方法检测疟原虫获得了一定的分析结论,现报道如下:
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2012年5月至2016年5月门诊及住院发热并怀疑疟原虫感染患者86例,其中男76例,女20例;年龄21~58岁,平均(39.2±6.3)岁。
1.2 检测方法
1.2.1血涂片法 将采集患者静脉血2mL放置到抗凝管中,然后在放置到全自动血液分析仪于中20min至2h内检测完毕,再取末梢血1~2滴制作厚薄血涂片,血片自然干燥后用吉姆萨染色液染色后油镜检测疟原虫。
1.2.2胶体金试条法 由广州万孚生物技术有限公司生产,严格按照使用说明书操作:检测结果判断标准:(1)两条红色反应线,即在检测区(T1)及对照区(C)各出现1条红色反应线,提示恶性疟原虫感染。(2)3条红色反应线,即在检测区(T1、T2)及对照区(C)都出现1条红色反应线。提示感染了恶性疟原虫,但不排除其他型疟原虫的联合感染。(3)2条红色反应线,即在检测区(T2)及对照区(C)各出现1条红色反应线,提示间日疟原虫、三日疟原虫或卵形疟原虫感染。(4)阴性:1条红色反应线,即仅在对照区(C)出现1条红色反应线。
2.结果
全部患者血涂片法检出疟原虫阳性例数8例,阴性78例,阳性率10.3%,胶体金检测卡法检出检出疟原虫阳性例数为10例,阴性76例,阳性率11.6%;胶体金检测卡用于疟原虫检测灵敏度为100.00%(10/8),特异度为97.43%(76/78):见表1。
在上述疟原虫阳性病例中,其中6例确诊为恶性疟疾,2例确诊为混合性疟疾,胶体金比疟原虫的例数多了2例,是因为确诊用药后来查疟原虫,镜检法为阴性,而胶体金法为阳性。两种方法无显著性差异
3.讨论
L-乳酸脱氢酶(LDH)是一种广泛存在于动植物及微生物体内的同工酶类,主要用于催化乳酸和丙酮酸相互转换,属于糖酵解途径末端关键酶[2]。已有研究显示,疟原虫LDH在整个红细胞内期能量代谢中作用关键[2];而传统疟疾胶体金诊断试剂盒主要以富组氨酸蛋白-Ⅱ(HRP-Ⅱ)为检测靶点,其只于疟原虫无性生殖期出现,健康人体内无法检出该种蛋白[2],但其在原虫出现前期患者无法发现,仅能在血液中含有成熟配子的患者中检出;同时在活虫体被清除后仍残存HRP-Ⅱ抗原,检测价值受限[2]。而疟原虫LDH仅由活虫产生,无明显交叉反应,故被认为目前最合适疟原虫诊断靶点,具有良好应用前景。
试验结果显示,全部患者血涂片法检出疟原虫阳性例数为8例,阴性78例,阳性率为10.3%;胶体金检测卡法检出检出疟原虫阳性例数为10例,阴性76例,阳性率为11.6%;胶体金检测卡用于疟原虫检测灵敏度为100.00%(10/8),特异度为97.43%(76/78)。
实验结果表明,两种方法对疟疾阳性检出率无显著差异,但胶体金法法的敏感性较镜检法为高。镜检法最低检限为3~4个/万红细胞,快速法最低检出限为10~20个/uL血(含350万~600万红细胞)[3],其灵敏度高于镜检法。对于血液疟原虫密度低的原虫感染者,用镜检法很难检出,而胶体金法弥补了这个缺点。
厚、薄血片染色镜检法仍是目前基层医院检测疟疾最常用的方法,其检测敏感度仅到3~4个/万红细胞[3]。厚、薄血片染色镜检法虽经济、但繁琐,检验结果受检验人员镜检水平、视力疲劳程度、染液配制以及对疟原虫分辨能力等诸多因素的影响,对于低疟原虫血症,或者混合感染的病例易漏诊或者误诊。胶体金法查疟原虫灵敏度高,特异度强,与镜检法相比无显著性差异。因此,笔者认为可以用疟原虫胶体金法代替镜检法做筛查有无疟原虫感染,阴性按照感染发热治疗,阳性可以根据临床症状及病人来源方面采取正确的治疗措施。
【参考文献】
[1]叶云,李莲.输入性恶性疟疾死亡1例附文献分析[J].实验与检验医学,2010,28(4):437.
[2]郭文娟.胶体金检测卡与血涂片法在疟原虫检测中的价值比较[J].现代医药卫生,2014,30(16):2483-2484.
[3]杨荣助.疟原虫MalariaPLDH快速检测技术的临床应用[J].标记免疫分析与临床,2009,16(1):56-57.
论文作者:魏容,王明霞,梁艳丽
论文发表刊物:《心理医生》2017年2期
论文发表时间:2017/4/20
标签:疟原虫论文; 胶体论文; 阳性论文; 检出论文; 涂片论文; 例数论文; 阴性论文; 《心理医生》2017年2期论文;