刘志光 陈东洋（通讯作者） 冯家力 张 昊
湖南省疾病预防控制中心 长沙 410005
【摘 要】采用A类测量不确定度评定方法对凝胶渗透色谱-液相色谱法测定沉积物中苯并[a]芘不确定度进行评定。分析不确定度来源，计算各不确定分量。评定结果表明：标准溶液配制过程，重复性试验和回收率是不确定度的主要来源，测定结果相对合成不确定度为2.9%，相对扩展不确定度为0.86 μg/kg。本方法适用于凝胶渗透色谱-液相色谱法测定沉积物中的苯并[a]芘不确定评定。
【关键词】不确定度；沉积物；苯并[a]芘；高效液相色谱
Evaluation of Uncertainty for Determination of Benzpyrene in Sediment by GPC-High Performance Liquid Chromatography
Liu Zhi-guang Chen Dong-yang Feng Jia-li Zhang Hao
（Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention，Changsha，410005，Hunan，China）
Abstract：Type A evaluation of measurement uncertainty was made for the determination of benzpyrene in sediment by GPC-high performance liquid chromatography. The components of uncertainty in the measuring process were analyzed，and the combined uncertainty and the expanded uncertainty were calculated. The results showed that the major factors of uncertainty in determination of benzpyrene in sediment by GPC-high performance liquid chromatography were standard solution preparation，measurement repeatability and recovery. The relative combined uncertainty was 2.9%，The relative expanded uncertainty was 0.86 μg/kg. This method can be applied to the uncertainty evaluation of determination of benzpyrene in sediment.
Key words：uncertainty，sediment，benzpyrene，HPLC
苯并[a]芘是致癌物最强的多环芳烃，常作为多环芳烃的代表[1-2]，在环境中被广泛地监测到，水环境中沉积物的苯并[a]芘主要来自水体苯并[a]芘的沉降和蓄积，苯并[a]芘被沉积物吸附后，通过生物吸收、积累，进而通过食物链的传递，严重危及人体健康。同时沉积物中的苯并[a]芘在水文条件改变时，也可向水体扩散，成为二次污染源。因此开展对沉积物中苯并[a]芘的检测可以间接了解水体多环芳烃污染状况，为水污染治理提供更全面的评估数据。
本文建立了胶渗透色谱-液相色谱法测定沉积物中苯并[a]芘含量，具有很高的选择性和灵敏度。在实际检测中，测定结果表述必须同时包含赋予被测量值及与该值相关的测量不确定度，才是完整并有意义的测量结果表述。通过测量不确定的评定也可以分析影响测量结果的主要因素，量化质量控制结果。因此本文根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》[3]和CNAS-GL06《化学分析中不确定的评估指南》[4]对凝胶渗透色谱净化，高效液相色谱荧光法测定沉积物中苯并[a]芘的含量结果进行不确定度A类评定，以检测步骤和计算公式为基础建立数学模型，考察不确定度的来源，对各种引入不确定度分量进行评估和计算，为评定测量结果质量提供科学依据。
1实验部分
1.1仪器与试剂
Agilent 1200 液相色谱仪附荧光检测器（美国Agilent公司），Gilson凝胶渗透色谱仪（美国Gilson公司），超声波清洗仪（elnma，德国）；高速冷冻离心机（TGL16，长沙英泰仪器有限公司）；涡旋混匀器（VORTE-X，海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。
EPA18种多环芳烃混合标准储备液（1000 mg/L，O2Si公司），乙腈（色谱纯，Merk公司）；乙酸乙酯（色谱纯，Merk公司），环己烷（色谱纯，Merk公司），其他试剂除特别说明，均为分析纯。实验用水为经Millipore处理的一级水。
样品采自湘江，首先在室温放置干燥样品，并剔除石子，纤维丝等杂质，用100目筛子筛分干燥后样品，进一步磨细，保存于塑料袋中。
1.2实验方法
1.2.1样品前处理
称取样品5.0 g于50 mL离心管中，加入环己烷-乙酸乙酯（1：1）10 mL，超声提取15 min，8000 r/min离心10 min，取5 mL上清液上GPC净化。
GPC以环己烷-乙酸乙酯（1：1）为流动相，流速为5.0 mL/min，收集19 min-50 min馏分，紫外检测波长为254 nm，收集液于40 ℃水浴旋转浓缩至近干，用环己烷-乙酸乙酯（1：1）转移至10 mL定量管中，氮吹至近干，加乙腈定容至10.0 mL，涡旋溶解，待HPLC-FLD测定。
1.2.2色谱条件
色谱柱：PAH C18柱（4.6mm×250 mm，5 μm）；柱温：30 ℃，流动相：乙腈：水=65：35流速：1.5 mL/min；进样量：10μL；检测波长：激发波长 292nm，发射波长：410nm。
1.2.3标准曲线的制备
吸取标准储备液（1000 mg/L）100.0 μL于10.0 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度制备成10.0 mg/L标准中间液Ⅰ，吸取100.0 μL中间液Ⅰ于10.0 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度制备成100.0 μg/L标准中间液Ⅱ，分别吸取标准中间液Ⅱ 0.1 mL，0.2 mL，0.5 mL，1.0 mL至10.0 mL容量瓶中，用乙腈定容，制备成苯并[a]芘系列浓度为1.0 μg/L，2.0 μg/L，5.0 μg/L，10.0 μg/L。按1.2.2色谱条件，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归。
1.3测定结果计算公式
3结论
采用不确定度A类评定对凝胶渗透色谱-液相色谱法测定沉积物中苯并[a]芘含量的测定过程进行不确定来源分析及各分量评定，评定结果表明该方法相对扩展不确定度为0.86 μg/kg。不确定度主要来源于标准溶液配制，测量重复性和回收率试验。这要求我们在试验过程必须对设备精心调试，加强日常维护，同时规范实验操作，以减少在样品前处理过程产生的不确定度。
参考文献：
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[2] Forsberg N D，Wilson G R，Anderson K A. Determination of Parent and Substituted Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in High-Fat Salmon Using a Modified QuEChERS Extraction，Dispersive SPE and GC-MS. J. Agric. Food Chem. 2011，59（15）：8108–8116.
[3] 中华人民共和国国家计量技术规范，JJF 1059.1-2012. 测量不确定度评定与表示.
[4] 中国合格评定国家认可委员会，CNAS-GL06：2006. 化学分析中不确定的评估指南.
[5] 国家质量监督检验检疫总局. JJG196-2006.常用玻璃容器检定规程 [S]. 北京：中国计量出版社，2006.
基金项目：湖南省卫生厅资助项目（B2014-134）
作者简介：刘志光（1979-），男，湖南常德人，本科，主要从事检验工作
通讯作者：陈东洋（1983-），男，汉族，河源，主管技师，主要从事理化检验技术研究，
论文作者:刘志光,陈东洋（通讯作者）,冯家力,张昊
论文发表刊物:《航空军医》2016年第11期
论文发表时间:2016/7/21
标签：色谱论文; 不确定论文; 沉积物论文; 乙酸乙酯论文; 测量论文; 凝胶论文; 芳烃论文; 《航空军医》2016年第11期论文;