（1苏州市吴中人民医院 江苏 苏州 215128）（2苏州卫生职业技术学院 江苏 苏州 215128）
【摘要】目的：采用正交试验综合多指标对八味茵术颗粒的提取工艺进行优化，干法制粒制备颗粒剂。方法：以6,7-二甲氧基香豆素、白术内酯III为指标性成分，采用L9(34)正交试验设计，考察加水量、提取次数、提取时间对八味茵术颗粒提取效果的影响，优化提取工艺。减压干燥得到的干浸膏进行干法制粒，单因素考察压轮压力、压轮转速、送料速度，并且对处方进行工艺筛选，制备八味茵术颗粒。结果：正交试验优化的最佳提取工艺为加水量10倍、8倍，提取2次，提取时间0.5h、0.5h。干法制粒处方和条件为干燥浸膏粉99.0%；硬脂酸镁1.0%；压轮压力20MPa、压轮转速4.8r/min、送料速度为15r/min，得到了比较理想的颗粒。结论：综合多指标优化了八味茵术颗粒的提取工艺，实验证明可行性、重复性良好。单因素考察得到了比较理想的八味茵术颗粒干法制粒制备工艺。
【关键词】八味茵术颗粒剂；正交试验设计；干法制粒
【中图分类号】R286 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）28-0132-03
湿疹是一种过敏性炎症性皮肤病，为皮肤科常见多发病，易成慢性，病程迁延，容易反复发作。李东垣在《脾胃论?脾胃盛衰论》中说：“百病皆由脾胃衰而生也。”有些慢性、难治性皮肤病的病因病机都与脾胃功能失调有着相当密切的关系。脾失健运，则湿从内生，浸淫皮肤，如湿疮、湿疹、奶癣、老年性皮肤瘙痒症等。其治疗也要以健中补脾，促进运化为基本方。八味茵术颗粒为我院的自拟协定处方，由茵陈、生白术等八味中药组成，经过多年临床使用，疗效确切，主要的功效是健脾利湿，方中白术健脾益气[1-2]，茵陈利湿退黄[3-4]，共为君药，在皮肤科得到广泛应用。临床用于皮肤科湿疮、湿疹，对于脾失健运的胃肠道症状，如胃纳差、恶心腹胀、大便溏泄等也具有很好的效果。为了方便临床应用，对方中有效成分提取工艺进行多指标优化，经减压干燥得到干膏为原料，干法制粒的方法来制备颗粒剂。
1.仪器与试药
1.1 仪器
SHIMAZU LC-2030C 3D高效液相色谱仪(日本SHIMAZU公司)；Sartorius BT125D电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）；fzg-16板式真空干燥箱（杭州三特医药化工设备有限公司）；Buchi小型喷雾干燥仪（Germany）；GX-10B多功能粉碎机（浙江高鑫工贸有限公司）；GL-25干法制粒机（江苏张家港市开创机械制造有限公司）；AC220-240V超声波清洗机（深圳深华泰超声洗净设备有限公司）。
1.2 药材与标准品
药材：生白术购自于江苏福源中药饮片有限公司，茵陈、苍术等其余七味药材购自天马（安徽）国药科技股份有限公司；标准品：6,7-二甲氧基香豆素（批号：111740-200702，中国药品生物制品检定所）；白术内酯Ⅲ（批号：111978-201501，中国药品生物制品检定所）
1.3 试剂
乙腈（HPLC，MERCK，Germany）；甲醇（HPLC，MERCK，USA）；硬脂酸镁（批号：20170329，CP，国药集团化学试剂有限公司）
2.方法与结果
2.1 6,7-二甲氧基香豆素、白术内酯Ⅲ的HPLC测定
色谱条件：inertSustain? C18色谱柱（4.6mm×250mm，5 μm，Japan），柱温30℃，DAD检测（200nm～400nm），流速为1 mL?min-1，进样量为5 μL，流动相为水（A）-乙腈（B）梯度洗脱，0～10.0min，55% MPB，10.0～25.0min，55%～95%MPB，25.0～25.1min，95%～55%MPB，25.1～30.0min，55%MPB。
对照品溶液的制备：取6,7-二甲氧基香豆素、白术内酯Ⅲ对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含1.0mg的溶液。精密量取1mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，0.45 μm滤膜滤过，即得。
供试品溶液的制备：精密量取八味茵术颗粒20.0g，置20 mL具塞锥形瓶中，加入25mL甲醇：水（1∶1），室温超声提取15min，过滤，取续滤液5mL，转移至50mL容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过，即得含量测定的样品溶液。
2.2 提取工艺的研究
对提取工艺进行正交试验，参考方中君药白术、茵陈提取工艺的文献，提取效率的影响因素主要包括：加水量、提取次数、提取时间，确定加水量和优化工艺，分析是否有显著性差异。取出的样品液经过适当的稀释处理，HPLC进行指标性成分含量检测。
2.2.1正交试验的设计 提取效率的影响因素主要包括：加水量（A）、提取次数（B）、提取时间（C），正交试验采用四因素、三水平的正交表进行试验，其因素水平表见表1，正交试验表选用L9(34)，未能安排的空白列作为误差。
2.4 干燥工艺研究
取八味茵术颗粒大提提取液（30公斤药材提取）并适当浓缩，选择真空干燥、喷雾干燥法，进行比较，以提取液干燥前后在指标性成分的含量、所得到的干粉性状和干粉得率为指标，筛选合适的干燥方法。从干燥过程和干粉的形状角度，两种干燥方法都可以，干燥过程相对容易，两种干燥方法所得到的药粉不黏壁，流动性也好，吸湿性相对强，真空干燥、喷雾干燥的浸膏粉收率分别为85.01%、88.15%。但是从指标性成分6,7-二甲氧基香豆素和白术内酯Ⅲ含量的角度，真空干燥（4.61、34.74μg/g）稍优于喷雾干燥（3.68、29.14μg/g）。故综合考虑表明真空干燥的方法比较适合于八味茵术颗粒提取液。
2.5 制粒工艺研究
2.5.1处方的选择 选择八味茵术颗粒真空干燥浸膏粉作为原料药，通过加入不同辅料和调整辅料的用量，以颗粒成型情况和制粒过程顺利与否为指标，筛选出最优处方。
处方为：99.0%八味茵术颗粒减压干燥粉，1.0%硬脂酸镁。以上处方出片光洁，颗粒色泽均一，硬度适中，不粘轮，成品率高，可选择此处方为制粒处方。
将所得到的颗粒和辅料硬脂酸镁取相同的质量，用甲醇：水（1∶1）溶解成相同的浓度，HPLC测定，液相条件参照2.1项下。结果证明制粒的过程对于含量基本没有影响，制粒的过程和加入的辅料对于指标性成分含量也没有影响。HPLC色谱图见图1、2。
2.5.2 工艺的考察 对处方进行工艺筛选，以颗粒质量、颗粒得率为考察指标，对压轮压力（MPa）、压轮转速（r/min）、送料速度（r/min）三个因素进行单因素水平考察，每个因素进行三个不同水平的考察，最终确定处方的最优工艺条件。
2.5.2.1 压轮压力的考察 固定压轮转速和送料速度，以颗粒质量、成品率为考察指标，当压轮转速为5r/min，送料速度为15r/min时，分别对比压轮压力为15MPa、20MPa、25MPa时对制粒工艺的影响。试验结果表明当压轮压力为20MPa时，出片连续；颗粒硬度适中、无色差，细粉少，成型性好；得率为82%。
2.5.2.1压轮转速的考察 固定送料速度，以颗粒质量、成品率为考察指标，选择压轮压力为20MPa，当送料速度为15r/min时，分别对比压轮转速为4.0r/min、4.8r/min、5.5r/min时对制粒工艺的影响。试验结果表明当压轮转速为4.8r/min时，出片连续；颗粒硬度适中、无色差，成品得率较高，细粉少，得率为80%。
2.5.2.3 送料速度的考察 以颗粒质量、成品率为考察指标，选择20MPa的压轮压力和4.8r/min的压轮转速，分别对比送料速度为10r/min、12r/min、15r/min时对制粒工艺的影响。试验结果表明当送料速度为15r/min时，出片连续；颗粒硬度适中、无色差，成品得率较高，细粉少，得率为83%。
根据单因素考察结果选择干法制粒机技术参数为压轮压力20MPa、压轮转速4.8r/min、送料速度为15r/min。综合处方及工艺的考察，确定了八味茵术颗粒的干法制粒处方和条件：干燥浸膏粉99.0%；硬脂酸镁1.0%；压轮压力20MPa、压轮转速4.8r/min、送料速度为15r/min。
3.讨论
八味茵术颗粒为一中药复方制剂，具有健脾利湿之功效，中药复方成分复杂，干扰因素多，不能单纯以单一指标性成分来确定提取的效率，方中白术、茵陈为君药，白术有明确的健脾益气、调节胃肠运动的功能的特点[5-9]，最近还有研究表明白术的主要活性成分白术内酯I、II、Ⅲ体内外有抗轮状病毒（RV）的作用[10]。茵陈利湿退黄，同样具有多种的药理作用[11-13]，这两味也是方中用药剂量比较大的药味，故选用6,7-二甲氧基香豆素、白术内酯Ⅲ为指标性成分，结合干膏得率综合考察，经过验证试验表明优化的提取工艺可行性和稳定性都较好。
制粒方法选用干法制粒，以干浸膏为原料，处方为99.0%减压干燥粉，1.0%硬脂酸镁。干法制粒所得到的成品颗粒硬度适中、无色差，细粉少，成型性好。处方中选择了润滑剂硬脂酸镁，硬脂酸镁的加入可以增加浸膏粉的流动性和润滑性，对比加入硬脂酸镁和不加入硬脂酸镁进行干法制粒，无论从颗粒的硬度、色泽、可压性以及最后剩余细粉这些方面，加入硬脂酸镁都比不加入效果好。另外在制粒方法方面，对比了干法制粒和湿法制粒，湿法制粒采用传统挤出制粒，3倍的糊精作为稀释剂，颗粒硬度适中、无色差、成型性良好，但与干法制粒相比，载药量少，病人服用量增加，吸湿性也比干法制粒的强，从工业化中式放大以及可行性的角度，干法制粒更加符合现代化工业生产自动化的要求，且质量可控性强，故最后选用干法制粒来制备八味茵术颗粒。所得到颗粒剂外观好，细粉少，为其后期的相关制剂研究以及体内动物实验的研究奠定了基础。
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论文作者:戈大春1,王卓君*,韦翠萍2
论文发表刊物:《医药前沿》2019年28期
论文发表时间:2019/11/11
标签：白术论文; 颗粒论文; 干燥论文; 工艺论文; 茵陈论文; 处方论文; 正交论文; 《医药前沿》2019年28期论文;