贾爱芹[1]2002年在《化纤方抗肝纤维化的临床与实验研究》文中研究表明目的：运用中、西医理论，从理论、临床及实验研究多方面对化纤方治疗慢性肝病的抗肝纤维化机理进行系统探讨。 方法：应用化纤方治疗30例慢性肝炎及早期肝硬化辨证属血瘀证患者，不设对照组，并观察其对CCL，致肝纤维化大鼠的影响。 结果：临床观察结果显示，本方能有效的改善患者症状体征及肝功能，降低血清肝纤维化指标HA、CIV含量，使B超二维图像肝纤维化程度积分下降，其总有效率为70％。实验研究结果显示，本方能显着降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST水平，升高ALB含量，改善肝功能；降低肝纤维化血清学指标(HA、LN、PCⅢ)，经统计学处理均有显着意义，大鼠肝脏病理组织学观察显示其纤维化程度和炎症改变得到了明显改善。 结论：化纤方有较好的抗肝纤维化作用，其作用途径包括抗炎护肝、减少胶原合成、促进胶原的降解及吸收以及促进HSC凋亡等多方面。
尹常健[2]2002年在《化纤方抗肝纤维化30例近期疗效观察》文中认为目的:观察化纤方抗肝纤维化的临床疗效。对象与方法:以临床诊断为慢性肝炎及早期肝硬化患者30例为观察对象,不设对照组,治疗前后自身对照,给予口服化纤方中药煎剂,疗程3个月,观察治疗前后血清HA及C—Ⅳ含量、肝脏B超检查、肝功能检测以及临床症状、体征的改善情况。结果:(1)30例患者全部坚持服药3个月,其中综合疗效显效10例,占33.3%,有效11例,占36.7%,无效9例,占30%,总有效率为70%;(2)症状改善以肝区痛、乏力及腹胀为最明显;(3)血清HA及CⅣ含量均数显着低于治疗前,经统计学处理有显着意义;(4)可明显改善肝功能,降低血清ALT、AST水平,升高血清ALB含量,均具有统计学意义;(5)可降低B超肝纤维化程度二维图像积分,使肝脏病理组织学得到改善。结论:化纤方能有效降低慢性肝炎及早期肝硬化患者血清纤维化指标和B超肝纤维化程度二维图像积分,其抗肝纤维化作用可能是通过保护肝细胞,抑制肝脏炎症及减少胶原合成、促进胶原降解及吸收多途径而实现的。
李川[3]2013年在《基于上皮间质转化现象对益气活血方抗大鼠肝纤维化疗效及分子机制的研究》文中提出背景：肝纤维化(Hepatic fibrosis, HF)是指肝脏中细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)尤其是胶原的过量沉积。它不是一个独立的疾病,而是各种病因所致的慢性肝病的共同病理过程,是发展到肝硬化必经阶段,并与肝癌有关。因此抗纤维化治疗对肝硬化及肝癌的防治、延缓疾病进程、减少患者痛苦及疾病支出具有重要临床意义。近年来的研究表明：肝星状细胞活化、肝窦毛细血管化、上皮间质转化均参与了肝纤维化的进程,其中对上皮间质转化参与肝纤维化的研究相对较少,所以进一步研究影响上皮间质转化这一病理生理现象的调控因素,可为肝纤维化的治疗提供新的途径。目前西医尚无特别有效的抗肝纤维化药物,而中医药在防治肝纤维化方面进行了大量的实验和临床研究,显示出较好的疗效和优势。益气活血方(黄芪、莪术、九香虫、桃仁)是孙桂芝教授在总结多年临床经验的基础上提炼出来的治疗肝纤维化肝硬化的小验方。经本人导师吕文良主任和广安门医院肝炎门诊的其他专家大量临床观察验证,益气活血方的确有显着的抗肝纤维化疗效。目的：通过观察益气活血方对大鼠肝纤维化的影响,研究其抗肝纤维化的疗效；验证肝纤维化进程中存在上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)现象且转化生长因子-β(Transforming growth factor-β, TGF-β)/转化生长因子-βⅡ型受体(Transforming growth factor-β receptor Ⅱ, TGF βRⅡ)/Smads信号通路参与了EMT,为EMT参与HF提供实验室依据；探讨益气活血方抗肝纤维化的分子机制,以便更好的运用于临床,也为挖掘传承名老中医经验的科学内涵提供新的研究思路。方法：采用四氯化碳和乙醇复合因素复制大鼠肝纤维化模型,从第5周起,造模的同时开始给予药物干预,药物干预12周后采取大鼠血清、肝脏、脾脏。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、白蛋白(Albumin, ALB)含量。记录肝脏、脾脏重量并计算肝指数、脾指数。取各组大鼠肝脏的相同部位进行病理切片HE染色,光镜下观察各组大鼠病理结果,并进行纤维化分级。免疫组化法检测肝组织中E-钙粘素(Epithelial Ca2+dependent cell adhesion molecules, E-cadherin)、TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2,并应用Axio Vision Release4.8.2图像分析软件测量各指标的阳性表达面积总值和阳性面积百分比。结果：经四氯化碳和乙醇造模后,模型组大鼠的肝湿重、脾湿重、肝指数、脾指数均升高,与空白对照组的差异有统计学意义(P<0.05)；给予益气活血方治疗后大鼠的肝湿重、脾湿重、肝指数、脾指数下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组ALT、AST升高,ALB降低,与空白对照组的差异有统计学意义(P<0.05)；给予益气活血方治疗后大鼠的ALT、AST水平降低,ALB升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,空白对照组大鼠肝脏纤维化程度全部处于sO期,模型组主要集中在s4期,二者的差异有显着的统计学意义(P<0.01)：益气活血组主要分布在Sl-S3期,与模型组的差异有显着的统计学意义(P<0.01)。免疫组化结果显示,模型组大鼠肝组织中E-cadherin表达下调,TGF-β1、TGF βRⅡ、Smad2的表达上调,与空白对照组的差异有统计学意义(P<0.05)；益气活血组E-cadherin表达较模型组提高,TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2的表达较模型组降低,二者的差异有统计学意义(P<0.05)。结论：益气活血方能降低肝纤维化大鼠肝湿重、脾湿重、肝指数、脾指数,并能降低ALT、AST,提高ALB水平,从而改善肝纤维化大鼠肝脾形态及肝功能。从病理上来看,益气活血方能改善肝脏炎症程度,减少细胞外基质的沉积,促使肝纤维化逆转,具有很好的抗肝纤维化疗效。上皮间质转化参与了大鼠肝纤维化的发展进程,模型组E-cadherin表达的下降是其参与纤维化的证据。益气活血方能上调E-cadherin的表达,提示其可以逆转EMT,从而逆转肝纤维化。益气活血方能通过下调TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2的表达阻断TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,从而阻断肝纤维化进程。鉴于TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路是EMT的主要通路之一,而我们的研究发现益气活血方既可以逆转EMT,又可以阻断TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,因此我们认为益气活血方可能是通过阻断TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,从而逆转EMT实现抗肝纤维化功效。
张红磊[4]2010年在《化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠TGFβII型受体及smad4蛋白表达的影响》文中提出目的:本实验通过无菌未灭活的猪血清腹腔注射的方法制备肝纤维化大鼠模型,探讨化浊解毒调肝方抗大鼠肝纤维化的作用及其可能的机制,为肝纤维化的治疗提供理论及实验依据。主要内容包括:观察化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织病理形态学的影响;化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织TGFβII型受体(TβRII)mRNA表达的影响;化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织smad4蛋白表达的影响。方法:清洁级Wistar大鼠50只,雄性,体重200-220g。适应性喂养一周后随机抽取10只作为正常组。造模成功后将剩余40只大鼠随机分为:模型对照组、秋水仙碱组(简称西药治疗组)、化浊解毒调肝方高剂量组(HZG)、化浊解毒调肝方低剂量组(HZD),每组10只。各组均普通颗粒饲料喂养,自由饮水和进食,分笼饲养于20±2℃,湿度65%±5%清洁级动物实验室内。除正常对照组外,其余40只均采用未灭活的猪血清腹腔注射,每次0.5ml/只,固定时间为周一、周五上午9点,每周进行两次,连续8周。秋水仙碱治疗组和中药治疗组于造模的第8周末给药,化浊解毒调肝方低剂量组给予含1.5g/ml生药水煎剂灌胃;化浊解毒调肝方高剂量组给予含3.0g/ml生药水煎剂灌胃;秋水仙碱组给予0.154g/kg·d灌胃,均至12周末。每天上午灌胃一次,每次3ml,连续4周。正常对照组与模型组给予等量生理盐水灌胃。于第12周末处死大鼠,留取大鼠肝组织,采用苏木精-伊红染色和Masson染色(胶原纤维特殊染色法)观察肝组织病理形态学的变化。采用RT-PCR技术测定肝组织TGFβII型受体(以下简称TβRII ) mRNA表达情况,采用免疫印迹法(Western-immunoblotting)测定大鼠肝组织中smad4蛋白的表达,所得数据经过整理,数据用均数±标准差表示,采用SPSS13.0统计软件进行处理。两个样本均数比较采用t检验,多个样本均数比较行完全随机设计单因素方差分析。结果:1.一般情况:正常对照组大鼠食欲佳,被毛光滑,精神状态好,体重增加。模型组大鼠精神萎靡,活动减少,食欲减退,消瘦,皮毛无光泽,体重较前有所下降,进食较正常组少、尿黄,有的大鼠鼻有出血。西药治疗组及中药治疗各组大鼠精神、食欲及活动介于正常组与模型组之间。2.化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝脏病理形态学的影响肉眼观察,正常组大鼠肝脏质地软,颜色呈深红色,表面光滑,边缘锐圆。模型组大鼠肝脏明显肿大,质地较硬,颜色片偏暗红,表面有结节形成而粗糙不平,有的可见颗粒样凸起,边缘较纯。秋水仙碱组和中药治疗各组大鼠肝脏肝脏肿大不明显,表面比较光滑,偶见沙粒样增生,颜色略见暗红,质地较脆。光镜下观察,正常组肝小叶结构完整,肝细胞围绕中央静脉呈放射状的排列,肝细胞核大而圆,无变性坏死,未见明显的纤维结缔组织增生。模型组可见肝小叶结构被严重破坏,肝细胞广泛的脂肪变性、坏死并伴炎性细胞浸润,纤维组织大量增生,个别动物可见假小叶形成。中药治疗各组和西药对照组肝组织病理的损伤程度与模型组相比均可见有不同程度的修复,尤其是化浊解毒调肝方高剂量组,肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润较模型组减少,胶原纤维增生较轻,主要散在于肝血窦和disse间隙、汇管区,无假小叶形成。3.化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织TβRIImRNA表达的影响与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝组织TβRIImRNA的表达明显增强(P<0.01);化浊解毒调肝方高剂量组、低剂量组及秋水仙碱组与模型组相比TβRIImRNA的表达均有明显下降(P<0.01);化浊解毒调肝方高剂量组与秋水仙碱组相比TβRIImRNA的表达有显着性降低(P<0.01);化浊解毒调肝方高剂量组与化浊解毒调肝方小剂量相比TβRIImRNA的表达有显着性降低(P<0.01);化浊解毒调肝方小剂量组与秋水仙碱组相比TβRIImRNA的表达无明显差异(P>0.05)。4.化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠肝组织smad4蛋白表达的影响与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝组织smad4蛋白的表达量明显增强;化浊解毒调肝方高剂量组、低剂量组及秋水仙碱组与模型组相比smad4蛋白的表达量均有明显下降(P<0.01);化浊解毒调肝方高剂量组与秋水仙碱组相比smad4蛋白的表达量有显着性降低(P<0.01);化浊解毒调肝方高剂量组与化浊解毒调肝方小剂量相比smad4蛋白的表达量有显着性降低(P<0.01);化浊解毒调肝方小剂量组与秋水仙碱组相比smad4蛋白的表达量无明显差异(P>0.05)。结论:1.化浊解毒调肝方能有效改善肝纤维化大鼠肝组织病理改变、减轻肝细胞的损伤,减少胶原纤维的生成,从而发挥其抗纤维化的作用。2.化浊解毒调肝方能显着降低大鼠肝组织TGF-βII型受体(TβRII)mRNA和smad4蛋白的表达,抑制肝星状细胞的活化,通过调控相关细胞因子生物作用,促进细胞外基质的降解。因此,以浊毒立论治疗肝纤维化具有实用性和可行性。
吴亚云, 耿晓霞, 程明亮[5]2005年在《丹芍化纤方对体外大鼠肝细胞增生、Caspase-3mRNA及白蛋白合成的影响》文中研究表明目的:探讨丹芍化纤方抗肝纤维化的作用机制方法:采用Ⅳ型胶原酶消化及Ficoll密度梯度离心的方法, 分离、培养大鼠肝细胞,加入5%、10%、20%药物血清干预体外培养的肝细胞,用MTT法测定肝细胞的增生,荧光实时定量PT-PCR(Real Time RT—PCR)法检测肝细胞内天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达,并检测培养上清中的白蛋白. 结果:丹芍化纤方药物血清对肝细胞的增生及白蛋白合成有促进作用,能显着下调肝细胞内caspase-3mRNA的表达, 其表达水平与正常大鼠血清组比较有显着性差异,呈明显的浓度依赖关系. 结论:丹芍化纤方发挥抗肝纤维化作用与其促进肝细胞增生、蛋白合成功能,抑制肝细胞凋亡有关.
康良[6]2013年在《“浊毒”立论组方经相关信号通路抑制DMN致肝纤维化及HSC活化的作用研究》文中研究指明肝纤维化（liver fibrosis/hepatic fibrosis）是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和必经途径，虽是可逆的病理过程，但治疗上仍缺乏有效、副作用小的药物。导师李佃贵教授首创了中医“浊毒”理论，他经多年临证认为，浊毒内蕴是肝纤维化的主要病机之一。以化浊解毒法为指导，选用中药组成化浊解毒方治疗肝纤维化取得了满意的疗效，但其治疗机制尚未明确。肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）作为成纤维细胞/肌成纤维细胞的主要来源，是肝纤维化发生发展的中心环节，细胞外基质(extracellular matrix, ECM）的合成与降解失衡是肝纤维化的主要病理改变。多种细胞因子、生长因子、趋化因子是肝纤维化的关键因子，多条信号通路参与了肝纤维化的调控过程，它们被确认为肝纤维化形成的重要靶点。本论文分叁个部分，从体内、体外不同水平上选取部分关键靶点，观察了化浊解毒方抗肝纤维化的作用和机制，为化浊解毒法和“浊毒”理论治疗肝纤维化提供了依据。第一部分化浊解毒方经JAK/STAT通路抑制DMN致大鼠肝纤维化的作用研究目的：通过观察化浊解毒法组方对二甲基亚硝胺（DMN）致大鼠肝纤维化模型中肝组织Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白（ColⅢ) mRNA以及JAK2/STAT3蛋白的表达情况，评价化浊解毒方对大鼠肝纤维化的调节作用，探讨其可能的作用机制。方法：清洁级SD雄性大鼠70只，分为4组，即：正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、复方鳖甲软肝片组（C组）、化浊解毒方组（分为等效、二倍、四倍剂量组，即D1、D2、D3组）、，除A组外,各组均予1%DMN10mg/kg腹腔内注射，实验第1周连续造模3天，第2到6周，每周连续造模2天，第5到8周，每天等体积灌胃给与不同药物。第8周末处死大鼠并取新鲜肝组织，用Masson染色观察肝组织病理情况；运用RT-PCR法检测肝组织中ColⅠ、ColⅢmRNA的表达；用Western-blot法检测JAK2/STAT3蛋白表达情况。结果：1肝组织及病理学情况观察：肉眼观察A组大鼠肝脏表面光滑、质韧，色鲜红；B组大鼠肝脏表面有颗粒状结节，质硬；D2组受试大鼠肝脏表面散在细砂粒样结节，质稍硬，色暗红。Masson染色情况显示：A组大鼠肝小叶结构完整，肝索排列整齐；B组纤维纵膈较多，纤维组织增粗、包绕肝小叶；D1、D2和C组纤维纵膈均较B组减轻，纤维条索变细；D3组纤维条索较粗。2化浊解毒方对大鼠肝组织中ColⅠ、Col ⅢmRNA表达的影响：与A组相比，B组ColⅠ、Col Ⅲ表达均明显增多（P <0.01)。与B组相比， C及D1组ColⅠ、Col Ⅲ表达均降低（P <0.05)；D2组ColⅠ、Col Ⅲ表达显着降低（P <0.01)；D3组ColⅠ、Col Ⅲ表达降低不明显（P>0.05)。3化浊解毒方对大鼠肝组织中JAK2、STAT3蛋白表达的影响：与A组相比，B组JAK2、STAT3蛋白表达均明显增多（P <0.01)。与B组相比，D1组JAK2蛋白表达降低（P <0.05)；C、D2组JAK2蛋白表达显着降低（P <0.01)；除C组外，各给药组STAT3蛋白表达较B组差异均无统计学意义（P>0.05)。结论：化浊解毒方能够改善DMN致大鼠肝纤维化的程度，可以不同程度的改善肝纤维化大鼠肝组织ColⅠ、ColⅢ的情况，以二倍剂量效果最为明显。通过降低JAK2蛋白表达，从而调节JAK2/STAT3通路，可能是其发挥抗肝纤维化的作用机制之一。第二部分化浊解毒方调节PDGF、CTGF、MCP-1和IL-13抑制DMN致大鼠肝纤维化的作用研究目的：通过观察以化浊解毒法组方对DMN致大鼠肝纤维化模型中肝组织血管内皮生长因子-BB（PDGF-BB）、血清中转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和白细胞介素-13（IL-13）含量的影响，探讨化浊解毒方经细胞因子抗肝纤维化的作用和机制。方法：运用RT-PCR法检测肝组织中PDGF-BB mRNA的表达，运用ELISA法检测大鼠血清中CTGF、MCP-1、IL-13的含量。结果：1化浊解毒方对大鼠肝组织PDGF-BB mRNA表达的影响：与A组比较，B组PDGF-BB mRNA的表达显着增加（P <0.01）；与B组比较，C、D1组PDGF-BB mRNA表达均降低（P <0.05）；D2组的PDGF-BB mRNA降低更为显着（P <0.01）；D3组与B组PDGF-BB mRNA的表达差异无统计学意义（P>0.05）；D3组PDGF-BB mRNA的表达较D2组显着升高（P <0.01）。2化浊解毒方对大鼠血清中CTGF含量的影响：与A组相比，B组CTGF含量增多（P <0.05)；与B组相比，各给药组大鼠血清CTGF含量均降低（P <0.05)；与C组相比，D3组含量有增多趋势，但无统计学意义（P=0.063>0.05)；D2组CTGF含量较C组、D1、D3组均降低（P <0.05)。3化浊解毒方对大鼠血清中MCP-1含量的影响：与A组相比，B组MCP-1表达明显增多（P <0.01)；与B相比，除D3组外（P>0.05)，各治疗组MCP-1含量均明显降低（P <0.01)；C组MCP-1含量较D1、D3组降低（P <0.01，P <0.05)。4化浊解毒方对大鼠血清中IL-13含量的影响：与A组相比，B组IL-13含量明显增多（P <0.01)；与B组相比，各给药组大鼠血清IL-13含量均明显降低（P <0.01)；C组IL-13含量较D3组显着降低（P <0.01)；D2组IL-13含量与D1、D3组相比显着降低（P <0.01，P <0.05)。结论：化浊解毒方可减少DMN致肝纤维化大鼠肝组织中PDGF-BB的表达及血清中CTGF、MCP-1、IL-13的含量，推测上述细胞因子是化浊解毒方抗肝纤维化的作用靶点之一。第叁部分化浊解毒方含药血清经MAPK及PI3K/AKT通路抑制大鼠HSC活化的作用研究目的：运用血清药理学方法观察大鼠HSC中p-p38、p-JNK、PI3K及p-AKT蛋白的表达，评价化浊解毒方大鼠含药血清对MAPK、PI3K/AKT信号转导通路的作用，探讨化浊解毒方抗肝纤维化可能的分子水平作用机制。方法：选取健康成年雄性SD大鼠，按分组要求灌胃给予相应药物10天后制备含药血清，分为：正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、阳性对照组（C组）、化浊解毒方含药血清等效剂量(D1)和二倍剂量（D2）组，B、C、D1、D2组均先行加入TGF-β1干预。各组加入相应血清培养48h后，利用Western-blot法检测p-p38、p-JNK、PI3K及p-AKT蛋白的表达。结果：1p-p38蛋白的表达：与A组比较，B组p-p38蛋白的表达明显增强（P <0.05）；与B组比较，各给药组p-p38蛋白表达显着降低（P <0.05）；与C组比较，D1组p-p38蛋白表达有增高趋势，但差异无统计学意义（P=0.051>0.05），D2组较C组及D1组p-p38蛋白表达均降低（P <0.05）。2p-JNK蛋白的表达：与A组比较，B组p-JNK蛋白的表达增强（P <0.05）；与B组比较，各给药组p-JNK蛋白的表达降低（P <0.05）。与C组比较，D1、D2组p-JNK蛋白的表达均降低（P <0.05）；D2组p-JNK蛋白的表达低于D1组（P <0.05）。3PI3K蛋白的表达：与A组比较，各受试组PI3K蛋白表达均升高（P<0.05）；与B组比较，D2组PI3K蛋白表达显着降低（P <0.01）；D2组PI3K蛋白表达低于C组和D1组（P <0.05）。4p-AKT蛋白的表达：与A组比较，各受试组p-AKT蛋白的表达升高（P <0.05）；各给药组p-AKT蛋白表达均较B组降低，差异有统计学意义（P <0.05），其中D2组差异有显着性（P <0.01）；D2与D1组比较，p-AKT蛋白表达降低，（P <0.05）。结论：化浊解毒方含药血清能够降低p-p38、p-JNK、PI3K、p-AKT蛋白在TGF-β1诱导的HSC中的表达，从而调控p38、JNK及PI3K/AKT信号通路的传导，推测化浊解毒方发挥抗肝纤维化的分子水平作用机制与调节MAPK及PI3K/AKT信号通路有关。
张国辉[7]2015年在《补益抗纤方抗肝纤维化的临床研究》文中研究说明目的：乙肝病毒感染呈世界性流行,其一直是全球性的公共卫生问题。慢性感染者常常按肝炎、纤维化、肝硬化逐渐进展,最终可导致肝衰竭、肝癌等终末期肝病的发生。而肝纤维化形成在疾病发展中是一个重要的阶段；因此,控制肝纤维化的发展对防治病毒性肝炎的进一步发展至关重要。本研究通过观察补益抗纤方联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者肝功能指标(ALT、 AST、GGT、TBIL)、血清肝纤维化4项(HA、LN、PⅢP、C-Ⅳ)、血清TGF-β1、IFN-γ、IL-33、影像学及肝脏瞬时弹性硬度值(LSM)的治疗作用,评价补益抗纤方在慢性乙型肝炎中抗肝纤维化的临床疗效,并尝试探究其可能的作用机制,以期为临床治疗慢性乙型肝炎提供有效的抗肝纤维化中药复方,进而为中医药治疗乙肝肝纤维化提供新的思路和理论依据。方法：本研究采用了随机对照的试验方法,将符合入组标准的60例慢性乙型肝炎患者随机分为治疗组和对照组,对照组予恩替卡韦片0.5mg,口服,1次/d；试验组在对照组基础上,同时予服用补益抗纤方中药(组成包括炙黄芪、党参、生地黄、珍珠草、枳壳、炒白术、丹参、鸡内金、枸杞子、醋鳖甲、法半夏、柴胡等)。疗程观察共48周。在治疗过程中,两组同时视肝损伤情况给予护肝降酶等一般治疗。分别在0周和48周检测相关的疗效指标,观察治疗前后及两组间患者肝功能指标(ALT、AST、GGT、TBIL)、血清肝纤4项(HA、LN、PⅢP、C-Ⅳ)、血清TGF-β1、IFN-γ、IL-33、影像学检查及肝脏瞬时弹性硬度值(LSM)的变化,将最终获得的数据采用统计分析软件SPSS 19.0进行处理,综合统计分析以评价其疗效。结果：①肝功能复常情况：用药后两组患者的ALT、AST、GGT指标均有明显好转(P<0.05),但治疗组与对照组比较无显着性差异(P>0.05)。②血清肝纤指标变化情况：经治疗后两组的HA、LN、PⅢP、C-Ⅳ均较治疗前有明显降低(P<0.05),且治疗组的HA、LN改善情况与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。③影像学情况：用药后治疗组及对照组的脾脏厚度较用药前均有明显改善(P<0.05),且治疗组要优于对照组(P<0.05)；治疗组门静脉内径较治疗前有所改善(P<0.05),但与对照组比较无明显差异(P>0.05)。④肝脏瞬时弹性硬度值的变化：经治疗后,治疗组及对照组的LSM较治疗前均有明显降低,且两组比较有显着性差异(P<0.05)。⑤血清中TGF-β1的变化情况：用药后两组的血清TGF-β1水平均有所下降,治疗组要优于对照组(P<0.05)。⑥Th1/Th2型细胞因子的变化情况：两组均能提高Thl细胞因子IFN-γ的水平,同时降低Th2细胞因子IL-33水平(P<0.01),治疗组效果均优于对照组(P<0.05)；且IFN-γ、IL-33水平变化均与TGF-β1的变化存在相关关系。结论：补益抗纤方能明显改善慢性乙型肝炎患者多项肝纤维化指标,能在一定程度上起到了逆转肝纤维化的作用。其作用的机制可能是影响到了TGF-β1、Th1/Th2型细胞因子等与肝纤维化形成密切相关的细胞因子,从而在HSC的活化和凋亡中起到了调节作用。
乔胃娟[8]2010年在《加减叁甲散及其拆方滋阴养血药调控肝纤维化TGF-β/Smads通路的研究》文中研究说明目的：观察加减叁甲散及其拆方滋阴养血药物对实验性肝纤维化时肝组织TGF-β/Smads转导通路的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机理。方法：通过四氯化碳诱导造成大鼠肝纤维化模型,应用TUNEL法、放射免疫法、免疫组化法以及原位杂交法探索加减叁甲散及其拆方滋阴养血药物抗肝纤维化的作用机理。结果：1、加减叁甲散组能显着改善大鼠的精神状态、饮食、皮毛色泽、体重以及病理切片等情况,降低大鼠血清PIIINP与HA的含量与肝组织凋亡细胞数(P<0.01),抑制肝纤维化大鼠TGF-β1以及Smad2/3的表达(P<0.01),能抑制PAI-1(P<0.05)以及a2(Ⅰ)前胶原mRNA的表达(P<0.01)。2、加减叁甲散拆方滋阴组能改善大鼠的精神状态、饮食、皮毛色泽、体重以及病理切片等情况,能降低肝组织凋亡细胞数(P<0.01),抑制Smad2/3的表达(P<0.01),同时可以通过协同活血化瘀药物以及透邪外达药物一起降低PⅢNP及HA的含量,抑制TGF-β1、PAI-1以及a2(Ⅰ)前胶原mRNA的表达。结论：1、加减叁甲散的治疗作用：加减叁甲散可改善肝纤维化大鼠的一般情况,可显着改善肝纤维化大鼠肝组织肝纤维化程度及病理状态,对肝脏有一定的保护及治疗作用,其治疗效果优于拆方滋阴养血药物。2、加减叁甲散抗肝纤维化的作用机理：加减叁甲散主要是通过抑制肝细胞的凋亡,抑制肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、Smad2/3的表达,同时,通过抑制肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1的表达,从而抑制PAI-1以及a2(Ⅰ)前胶原mRNA的表达等环节发挥作用。3、加减叁甲散拆方滋阴养血药物的治疗作用：加减叁甲散拆方滋阴养血药物可改善肝纤维化大鼠的一般情况,可轻微改善肝纤维化大鼠肝组织肝纤维化程度以及病理状态,对肝脏有一定的保护及治疗作用。4、加减叁甲散拆方滋阴养血药物抗肝纤维化的作用机理：加减叁甲散拆方滋阴养血药物主要是通过抑制肝细胞的凋亡以及抑制Smad2/3的表达从而发挥抗肝纤维化的作用；同时,可以通过协同活血化瘀药物以及透邪外达药物一起抑制肝纤维化大鼠TGF-β1、PAI-1以及a2(Ⅰ)前胶原mRNA表达,从而发挥抗肝纤维化的作用。
周新颖[9]2010年在《加减叁甲散及其虫类药对肝纤维化大鼠TGF-β/Smads信号通路及MMPs/TIMPs体系影响的研究》文中研究说明目的：观察加减叁甲散及其虫类药对实验性肝纤维化肝组织TGF-β/Smad转导通路及MMPs/TIMPs的影响,探讨其抗肝纤维化的效果和作用机理。方法：选用SD雄性大鼠,设正常对照组,模型组,阳性组,加减叁甲散组,虫药组,去虫药组等共6组。除正常对照组外,其余五组采用40%四氯化碳(CCL4)植物油溶液腹腔注射制备肝纤维化模型,造模的同时予药物灌胃治疗。8周后,处死各组大鼠,腹主动脉取血,放射免疫法检测层粘蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)等肝纤维化血清学指标；光镜和电镜观察肝组织病理变化；免疫组化法检测肝组织TGF-β1、TNF-α、Smad2/3、Smad7,原位杂交法检测肝组织MMP-2、TIMP-2、TIMP-1并作图像分析。结果：1. TGF-β/Smad转导通路：TGF-β1的表达：正常对照组几乎不表达TGF-β1,模型组表达增高(P<0.01),与模型组相比,加减叁甲散组、阳性组、虫药组、去虫药组表达降低(P<0.01),与阳性组相比,加减叁甲散组有差异(P<0.05),虫药组、去虫药组无差异性。Smad2/3的表达：正常对照组几乎不表达Smad2/3,模型组表达增高(P<0.01),与模型组比较,加减叁甲散组、阳性组、虫药组、去虫药组表达降低(P<0.01),与阳性组比较,加减叁甲散组、虫药组表达降低(P<0.01,P<0.05)。Smad7的表达：与正常对照组比较,模型组明显降低(P<0.01),与模型组比较,加减叁甲散组、虫药组、去虫药组Smad7的表达明显升高(P<0.01),与阳性组比较,加减叁甲散组(P<0.01)、虫药组、去虫药组(P<0.05)均升高。TNF-α的表达：与正常对照组比较,模型组TNF-α的表达明显升高(P<0.01),与模型组相比,阳性组、加减叁甲散组、虫药组、去虫药组表达明显降低(P<0.01),与阳性组相比,加减叁甲散组有差异(P<0.05)。2.MMPs/TIMPs体系：MMP-2mRNA的表达：与正常对照组相比,模型组无差异,虫药组表达升高(P<0.05),与模型组相比,虫药组表达升高(P<0.05),加减叁甲散、阳性组、去虫药组无差异(P>0.05)。TIMP-2mRNA的表达：与正常对照组相比,模型组表达明显升高(P<0.01),与模型组相比,各治疗组表达降低(P<0.01),且与阳性组比较,加减叁甲散与虫药组亦有降低且加减叁甲散降低明显(P<0.01),虫药组(P<0.05),去虫药组无差异(P>0.05)。TIMP-1mRNA的表达：与正常对照组相比,模型组TIMP-1mRNA的表达明显升高P<0.01),与模型组相比,各治疗组的表达均有降低(P<0.01),且加减叁甲散与虫药组低于阳性组(P<0.05),去虫药组无差异(P>0.05)。结论：1.加减叁甲散可显着改善肝纤维化大鼠肝组织肝纤维化程度。2.加减叁甲散能降低肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、Smad2/3的表达,升高Smad7的表达,且效果优于秋水仙碱。通过抑制TGF-β/Smad转导通路,达到抗纤维化的效果。3.在降低TNF-α的表达方面,加减叁甲散优于秋水仙碱。4.加减叁甲散可降低肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1mRNA、TIMP-2mRNA的表达,从而抑制MMP-2降解ECM,达到抗纤维化的效果。5.虫药组在降低纤维化大鼠肝组织TIMP-1mRNA的表达方面效同加减叁甲散(均为P<0.05)。在降低纤维化大鼠肝组织TIMP-2mRNA的表达方面,加减叁甲散效果明显,优于秋水仙碱组、虫药组、去虫药组。虫药组效果也优于秋水仙碱组。去虫药组效果与秋水仙碱组无差异。
参考文献：
[1]. 化纤方抗肝纤维化的临床与实验研究[D]. 贾爱芹. 山东中医药大学. 2002
[2]. 化纤方抗肝纤维化30例近期疗效观察[C]. 尹常健. 2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编. 2002
[3]. 基于上皮间质转化现象对益气活血方抗大鼠肝纤维化疗效及分子机制的研究[D]. 李川. 中国中医科学院. 2013
[4]. 化浊解毒调肝方对肝纤维化大鼠TGFβII型受体及smad4蛋白表达的影响[D]. 张红磊. 河北大学. 2010
[5]. 丹芍化纤方对体外大鼠肝细胞增生、Caspase-3mRNA及白蛋白合成的影响[J]. 吴亚云, 耿晓霞, 程明亮. 世界华人消化杂志. 2005
[6]. “浊毒”立论组方经相关信号通路抑制DMN致肝纤维化及HSC活化的作用研究[D]. 康良. 河北医科大学. 2013
[7]. 补益抗纤方抗肝纤维化的临床研究[D]. 张国辉. 广州中医药大学. 2015
[8]. 加减叁甲散及其拆方滋阴养血药调控肝纤维化TGF-β/Smads通路的研究[D]. 乔胃娟. 成都中医药大学. 2010
[9]. 加减叁甲散及其虫类药对肝纤维化大鼠TGF-β/Smads信号通路及MMPs/TIMPs体系影响的研究[D]. 周新颖. 成都中医药大学. 2010
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