（成都市妇女儿童中心医院产前诊断中心 四川 成都 610091）
【摘要】目的：了解四川地中海贫血基因突变类型和分布情况，为产前筛查提供依据。方法：收集2016年1月－2018年6月在成都市妇女儿童中心医院进行地贫基因检查的3295例样本，采用液相芯片法检测β地中海贫血基因突变类型。结果：共检测单纯型β地中海贫血基因突变1079例，阳性率32.75%。β地中海贫血基因突变检测出18基因型，其中βCD17/β基因型最常见，检出388例，占β地中海贫血基因突变35.96%。且重型地贫患者有三例与CD17突变有关。结论：四川地区β地中海贫血基因突变类型以βCD17/β为主，应加强宣传教育和检测，预防重型地贫患儿出生，对于遗传咨询和优生优育有重要意义。
【关键词】β地中海贫血；基因突变；构成比
【中图分类号】R556.7 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）21-0239-02
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2016年1月－2018年6月在成都市妇女儿童中心医院进行地贫基因检查的3295例样本为研究对象，年龄16天-65岁，其中男性1054例，女性2241例。
1.2 仪器与试剂
Luminex液相芯片平台200，PCR仪器（BIO-RAD）
1.3 实验方法
标本基因组DNA提取：按照Qigen试剂盒全血DNA提取试剂盒操作进行。地中海贫血基因检测：1）PCR：同一受检DNA样本分别使用试剂盒的PCR MixA和PCR MixB扩增，反应体系均为25μl反应条件分别为A：37℃ 10min；95℃ 10min；95℃ 30sec,52℃ 45sec,72℃ 30sec,30个循环；95℃ 30sec，65℃ 45sec，72℃ 30sec,25个循环；72℃ 5min；4℃保存。B：37℃ 10min；95℃ 10min；97℃ 20sec，72℃ 2min 50sec,40个循环；72℃ 5min；4℃保存。2）杂交：分别取A和B管PCR产物2.5μl和45μl杂交液杂交，条件95℃5min，60℃15min。3）显色：按照试剂盒要求制备显色工作液，杂交后向每个反应孔中加入25μl显色工作液，混匀后60℃显色7min。4）上机检测，判读结果。具体操作严格按照试剂盒提供说明书进行，且每次实验设置阴阳性质控和空白对照。
2.结果
2016年1月－2018年6月检测样本3295例，共检测单纯型β地中海贫血基因突变1079例，阳性率32.75%。β地中海贫血基因突变检测出18基因型，其中βCD17/β基因型最常见，检出388例，受检人群发生率11.78%，占β地中海贫血基因突变35.96%。其次是βCD41-42/β和βⅣS-Ⅱ-654/β基因型，分别占25.95%和25.12%。且检出重型β地贫患者纯合子和双重杂合突变基因型共6例，3例与CD17突变有关。具体基因型分布见表。
表 β地中海贫血基因突变类型分布情况
3.讨论
β地中海贫血一般由β珠蛋白基因点突变引起，少数由β珠蛋白基因缺失引起。本实验共检测出17种点突变和1种基因缺失。其中β0/N和β+/N杂合子一般无症状或者表现为轻度地中海贫血。而双重杂合子β+/β0和纯合子β0/β0，β+/β+一般表现为重型地中海贫血。β地中海贫血基因突变存在明显的地域性，在广东，广西，海南地区以βCD41-42/β最为多见[1-3]，福建地区以βⅣS-Ⅱ-654/β最为多见[4]。而本实验以βCD17/β最为多见，与学者报道贵州地区β地中海贫血基因突变分布情况相同[5]，且检出重型β地贫患者纯合子和双重杂合突变基因型共6例，3例与CD17突变有关。因此对于β地中海贫血筛查意义宣传极其重要,增强携带者的高危夫妇筛查和宣传教育，对于预防和避免重型β地中海贫血患儿出生，减少社会和家庭负担有重要指导意义。
但本研究样本主要来源于成都及其周边地区人群，不能全部代表四川的总体基因分布，后期还需要进一步收集检测，为四川提供地中海贫血基因分布数据，宣传优生优育和进行产前筛查措施。
【参考文献】
[1]李宁,官全生,李文杰,梁文君,黄永彬,张宇明,张海涛.湛江地区3157例地中海贫血基因诊断结果分析[J].广东医科大学学报,2018,36(05):501-504.
[2]何升,李东明,赖允丽,张强,阙婷,唐燕青.2685例贫血患儿β-地中海贫血基因分析[J].中国优生与遗传杂志,2013,21(04):29-30+33.
[3] 李猛,项松鹤,丁一,刘雯雯,徐媛媛,薄剑.中国海南省三亚地区地中海贫血基因类型分析[J].中国实验血液学杂志,2018,26(04):1146-1150.
[4]王林铄,黄海龙,林娜,王燕,陈雪美,唐南洪,徐两蒲.福建地区β-地中海贫血基因突变谱分析[J].中国妇幼保健,2015,30(13):2040-2043.
论文作者:谢雅梅, 张宇
论文发表刊物:《医药前沿》2019年21期
论文发表时间:2019/9/16
标签：地中海论文; 基因论文; 基因突变论文; 合子论文; 突变论文; 显色论文; 地区论文; 《医药前沿》2019年21期论文;