王静[1]2012年在《美国山核桃组织培养技术的研究》文中进行了进一步梳理本文选用美国山核桃实验室实生苗和成年树的叶片、带芽茎段为实验材料,对叶片和茎段组织培养从外植体的选择、最佳培养基的筛选、最佳植物生长调节剂及其配比以及其他一些影响植物组织培养的因素做了较系统地研究。主要结果如下：1美国山核桃叶片组织培养中,选用一年生实生苗叶片和DKW培养基愈伤组织诱导率较高。使用75%的酒精快速消毒10s后,再用0.1%HgCl2浸泡4min可降低污染率,并且每瓶培养基接种1-2块外植体可以有效减少污染率。2美国山核桃叶片组织培养中,在培养基中添加NAA0.15mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA1.5mg/L,美国山核桃叶片组织培养褐化率降低,在培养基中添加NAAO.1mg/L+2,4-D1.5mg/L+6-BA2.0mg/L可使美国山核桃愈伤组织诱导率较高,培养基的其他添加成分为：蔗糖30g/L,琼脂10g/L,调节pH=5.8。3在进行美国山核桃叶片组织培养时,为抑制外植体褐变反应,可将经过常规消毒的外植体接种到只含有蔗糖和琼脂的培养基中培养2d左右再将其转移到DKW+NAAO.10mg/L+2,4-D1.5mg/L+6-BA2.0mg/L中继续培养可以有效的降低外植体的褐化率。4在培养基中分别添加1.0g/L的AC、1.5mg/L的Na2S2O3、0.02mg/LPVP的都可以有效的降低外植体的褐化率,同时不影响愈伤组织的诱导。其中,添加Na2S2O3外植体褐化率最低,添加PVP诱导率较高。添加GA3会抑制美国山核桃叶片组织培养实验中愈伤组织的诱导。5在接种前使用400mg/L的PVP或200mg/L的Na2S2O3浸泡试材可以有效降低美国山核桃叶片组织培养降低试材褐化率。对接种后的培养基先进行完全遮光处理培养一周后再进行光培养,对抑制外植体的褐化反应起了积极的作用,可以有效地降低试材的褐化率。6适宜美国山核桃叶片愈伤组织增殖的最佳培养和激素组合为：DKW+6-B A0.5mg/L+NAA0.1mg/L,蔗糖30g/L,琼脂10g/L,pH=5.8。7在美国山核桃茎段组织培养实验中,一般选用幼龄茎段进行实验,筛选出适合茎段愈伤组织诱导的培养基和激素配比为WPM+NAA1.Omg/L+6-BA3.0mg/L,添加30g/L蔗糖,10g/L琼脂,调节pH=5.8。8降低美国山核桃茎段组织培养中外植体褐化的方法有：①培养基中添加1.0mg/L的活性炭；②使用400mg/L的PVP或300mg/L的Na2S2O3预处理试材；③培养基中添加90mg/L的PVP或加7mg/L的Na2S203。
张丽娟, 陈建华[2]2008年在《实生核桃茎段的组织培养研究》文中研究表明以室内实生核桃苗的茎段为试材,以MS培养基为基本培养基,适当添加植物生长调节剂,对核桃组织培养的一系列影响因子进行了研究。结果表明,适宜于室内实生核桃组织培养的各项因子分别为:最佳外植体取材时间为5月～6月份;初代培养培养基为MS+琼脂5g/l+蔗糖30g/l;继代培养基为MS+BA0.5+IBA0.01+琼脂5g/l+蔗糖30g/l,核桃芽苗在增殖过程中的继代周期以28d～30d为宜;生根培养基为1/2MS+IBA0.5+琼脂5g/l+蔗糖30g/l。
田爱梅, 王国强[3]2002年在《实生核桃茎段的组织培养及影响因子的研究》文中提出以核桃幼年和成年树为试材,取当年生嫩枝上带有腋芽的茎段为外植体,对核桃组织培养的一系列影响因子进行了研究.对不同的抗氧化剂和吸附剂防止核桃初植外植体褐变的效果进行了研究.结果表明:5mg·L~(-1)的抗坏血酸,抑制褐化的效果最佳.以改良DKW为基本培养基,对不同激素组合下外植体的生长分化情况进行了深入探讨.试验表明:幼年树初代培养的最适培养基为:改良DKW+BA1.0+IBA0.1;继代培养以BA1.0+IBA0.01为宜.成年材料初代培养的最适培养基为:改良DKW+BA1.0+IBA0.01,而继代培养以改良DKW+BA1.0+IBA0.001为宜.
田爱梅[4]2001年在《实生核桃茎段的组织培养及其影响因子的研究》文中研究表明本试验以核桃幼年和成年树为试材，取当年生嫩枝上带有腋芽的茎段为外植体，对核桃组织培养的一系列影响因子进行了研究。结果表明：不同时期取材，初植外植体的污染率不同。幼年树初代培养取材的最佳时期为5月中旬到6月中旬，在此期间取材污染率可控制到3.2％。成年树初代培养的最佳时期为4月下旬到6月上旬，在此期间取材污染率可控制到6.0％。试验对不同的抗氧化剂和吸附剂对防止核桃初植外植体褐变的效果进行了研究，结果表明：在培养基中加入5mg/l的抗坏血酸，抑制褐化的效果最佳，褐化率仅为8.6％。以改良DKW为基本培养基，对不同激素组合下外植体的生长分化情况进行了探讨。试验表明：幼年树初代培养的最适培养基为：改良DKW+BA_(1.0)+IBA_(0.1)+Vc_(0.5)；幼年树继代培养的最适培养基为：改良DKW+BA_(1.0)+IBA_(0.01)+Vc_(0.5)+GA_(0.5)，继代培养的最大增殖系数为5.0。成年树初代培养的最适培养基为：改良DKW+BA_(1.0)+IBA_(0.01)+Vc_(5.0)，而继代以改良DKW+BA_(1.0)+IBA_(0.001)+Vc_(5.0)为宜。生根诱导宜在1/2改良DKW+IBA_(5.0)+Vc_(1.0)中暗培养7天，然后转入1/2改良DKW+AC 2g/L中继续培养。采用诱导期暗培养、降低无机盐浓度、添加活性炭等措施能有效地促进核桃芽苗的生根率。本试验芽苗生根率可达53.5％。
张燕[5]2004年在《核桃组培快繁技术的研究》文中进行了进一步梳理本试验选用核桃实生苗和核桃20 年生树为试材,主要对核桃组培快繁技术各个环节进行系统化研究,并且针对每一环节中的关键措施进行探讨。试验中发现取材于20 年生核桃树的外植体茎段和叶片污染、褐变现象严重,苗分化数以及愈伤组织分化数达不到统计样本要求。故试验结果均是以核桃实生苗茎段和叶片为外植体材料得到的。诱导和增殖培养基均为改良DKW。试验结果显示:核桃茎段腋芽萌发的最佳激素组合为:BA_(0.5mg/L)+KT_(0.5mg/L)+IBA_(0.02mg/L);诱导核桃叶片形成愈伤组织的最佳激素配比为:6-BA_(0.01mg/L)+2,4-D_(0.01mg/L);核桃无菌芽苗增殖的最佳激素配比为:BA_(0.005mg/L)+IBA_(0.001mg/L);促使核桃愈伤组织增殖的最佳激素配比为:BA_(0.01mg/L)+2,4-D_(0.8mg/L);诱导核桃愈伤组织芽分化的最佳激素配比为KT_(0.8 mg/L) +NAA_(0.4mg/L);诱导生根的基本培养基为1/2DKW+蔗糖_(15g/L)+琼脂_(7g/L),NAA浓度在10.0mg/L 时,生根率最高;蛭石基质中核桃无菌苗移栽成活率较高。试验对核桃茎段不同节位的芽体在萌发能力和叶片、茎段等诱导愈伤组织发生表现以及对愈伤组织诱导时是否需要光照等进行了研究。结果表明取材时选择核桃顶芽和顶芽下4～5 节段的芽体作为接种材料较为适宜。而核桃叶片是诱导愈伤组织形成的较佳材料,培养时需要在光照下进行。试验还对青霉素防止核桃茎段污染的效果进行了研究。结果表明用80μg/ml 青霉素和3g 多菌灵浸泡处理核桃外植体,控制污染效果显着。试验中利用单一因子PVP 作为抗氧化剂防止核桃外植体褐变进行了研究,结果表明用250mg/L 的PVP 预处理核桃外植体和用100mg/L 的PVP 作为培养基附加成分,褐变都可以得到有效控制。并通过叁元二次回归组合设计得出Na_2S_2O_3、AgNO_3、PVP 叁因子在抑制核桃外植体PPO 活性方面,以PVP作用最为突出,其次为Na_2S_2O_3,再次为AgNO_3。
常董董[6]2017年在《核桃无融合胚离体培养初步研究》文中认为核桃(Juglans regia L.)具有无融合生殖能力,利用无融合胚建立核桃的离体再生体系,这在栽培和育种上均具有很重要的理论和实践意义。本论文观察了不同核桃品种(系)的无融合生殖率,研究了适宜的外植体灭菌方法和控制褐化的方法,筛选了诱导核桃胚萌发以及核桃茎段培养的培养基和培养条件。主要结果如下:1.不同核桃品种(系)的无融合生殖能力调查。采用套袋隔离,观察了5个供试核桃品种(系)的无融合生殖能力。结果表明,供试材料均具有无融合生殖能力,平均无融合生殖率为52.47%。其中,‘香玲’的无融合生殖率为54.67%,‘元林’为52.33%,‘瑞嘉’为56.67%,‘瑞秀’为49.67%,‘Y17’为49.00%,方差分析显示各品种间无融合生殖能力差异显着。2.核桃离体胚萌发成苗的最佳培养基组合是DKW+6-BA 2.0mg·L~(-1)+PVP200mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1)。最佳灭菌条件及培养基的选择。外植体材料为5个供试品种的无融合生殖胚,核桃胚在70%酒精消毒30s,0.1%升汞表面消毒5min的情况下灭菌效果最好,污染率仅为1.11%。核桃胚在MS、DKW、1/2MS、WPM等4个基本培养基中的萌发率差异显着,在DKW中的萌发率最高为73.50%。培养基中添加蔗糖浓度为30g·L~(-1)时,核桃胚萌发率最高为72.39%,不同浓度蔗糖的基本培养基诱导核桃胚萌发的差异显着。培养基的pH值在5.8时,核桃胚的萌发率最高为73.04%,不同pH值的基本培养基诱导核桃胚萌发的差异显着。最佳取材时间的确定及不同品种(系)的萌发成苗率。取材时间在7月15号左右的核桃种胚萌发成苗率很高,为78.10%,核桃幼胚的萌发成苗率比成熟的核桃胚萌发成苗率高,不同的取材时间萌发成苗率差异显着。核桃的5个品种中,‘Y17’的萌发成苗率最高为79.29%,5个品种之间的萌发成苗率差异显着。培养条件的优化包括温度、湿度、光照强度的筛选。当培养箱温度为26℃,核桃胚萌发成苗率最高为71.35%,相对湿度为40%,核桃胚的萌发率最高为71.37%,光强3000lx时,核桃胚的萌发率最高为71.33%,且不同的温度条件之间,湿度条件之间、光照强度之间的差异性显着。PVP的浓度为200mg·L~(-1),核桃胚的褐化率为2.26%,不同浓度的PVP对核桃胚褐化率影响差异性显着。且转接时间隔4天时可以降低核桃胚的褐化率。植物生长调节剂的筛选。在核桃胚离体萌发的培养中,不同的植物生长调节剂对核桃胚的萌发成苗影响表现为当6-BA的浓度为2.0mg·L~(-1)时,核桃胚的萌发成苗率最高为73.58%。当KT的浓度为1.0mg·L~(-1)时,核桃胚的萌发成苗率最高为70.46%。当2,4-D浓度为2.0mg·L~(-1)时,核桃胚的萌发成苗率最高为60.68%。不同浓度的6-BA、KT、2,4-D之间影响核桃胚萌发成苗差异显着,以6-BA的诱导效果最好。Picloram可以诱导核桃胚产生不定芽,且当Picloram的浓度为0.01mg·L~(-1)时,产生的不定芽数最多,不定芽长势最好,不同浓度的Picloram对核桃胚不定芽的诱导差异性显着。不同浓度的IBA对核桃胚萌发成苗影响差异不显着,且诱导率极低。3.核桃茎段不定芽萌发分化的最佳培养基组合是DKW+6-BA1.5mg·L~(-1)+IBA0.01mg·L~(-1)+PVP 300mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1)。在核桃的茎段培养中,植物生长调节剂6-BA1.5mg·L~(-1)和IBA0.01mg·L~(-1)的组合,KT1.0mg·L~(-1)和IBA0.01mg·L~(-1)的组合,核桃茎段的增殖芽数多,长势好,且前者强于后者,后者诱导茎段长出许多无效的愈伤组织。PVP的浓度为300mg·L~(-1)时可以将核桃茎段的褐化率降低到9.79%。核桃茎段的品种不同,诱导增殖芽数也不同,5个品种中,‘Y17’增殖倍数最大为3.63。
韩佳宇[7]2012年在《生物柴油树种石栗快繁技术的研究》文中指出石栗Aleurites moluccana (L.) Willd,分类归大戟科(Euphorbiaceae)石栗属,是一种经济价值较高的木本油料树种。其成熟种子胚中的油脂,可用作工业油源和动力油源等,是一种优质的可再生能源。当前能源价格高涨,寻找可再生能源是全球的重要课题之一。石栗作为一种可再生能源植物,得到了广泛的重视。石栗能源林的建立需要大量种苗,迅速经济地繁殖大量的石栗优质种苗成为当前亟待解决的问题。本研究以石栗成熟种子胚无菌实生苗茎段、大田植株枝条茎段为外植体进行组织培养以及进行高空压条和嫁接等,探索了石栗不同快繁的技术方法,系统地研究了石栗各快繁技术的过程及影响因素。主要研究成果如下：①成熟胚实生苗的培养。成熟胚最佳灭菌方法是75%酒精30秒+0.15%升汞8分钟,污染率为28%,萌发率为62%；成熟胚采用非极性摆放的接种方式萌发率较高高；MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.04mg/L对诱导无菌实生苗带芽茎段形成丛生芽效果较佳；未能实现丛生苗的生根。②大田外植体的组织培养。选用1年生,低温干燥的季节取材,最佳的灭菌方法为自来水冲洗120min,0.1%HgC12溶液浸泡消毒16min,10%NaClO3溶液浸泡消毒24min,其污染率为16.67%；诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+ZT2.0mg/L+NAA0.5mg/L+氯化胆碱4mg/L,愈伤诱导率为57.78%；诱导愈伤分化的最佳培养基为6-BA1.0/L+IBA0.1mg/L,出芽率为35.56%；最佳的增殖培养基为6-BA1.0mg/L+TDZ0.01mg/L+IBA0.1mg/L,增殖系数为3.14,白砂糖为30g/L,琼脂粉为6.5g/L,pH为5.5-6,光照强度为1200LX—-1600LX有利于增殖培养；最佳的壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+矮壮素0.1mg/L+IBA1mg/L；最佳的生根培养基为1/2MS+IBA1.5mg/L+IAA0.2mg/L+活性炭3/gL,生根率为78.63%；最佳的移栽基质为泥炭土：珍珠岩=2：1,成活率为76.67%。③高空压条。生根粉6号浓度为0.50mg/ml时,发根率为85.98%；可以促进石栗高空压条提早发根的是IBA浓度为0.50mg/ml时；生根粉6号为0.30mg/ml时,高空压条的根长最长,达到10.45cm；生根粉6号度为0.30mg/ml时,高空压条的根鲜重最最重,达到25.49g；石栗高空压条的最佳季节为春季。④嫁接。劈接的成活率较高,成活率为45%；石栗最佳的嫁接季节为2-3月,成活率为58.0%。
吴安湘[8]2006年在《珙桐组织培养与植株再生体系的建立》文中认为珙桐(Davidia involucrata Baill.)为我国特有的珙桐科单种属植物，是第叁纪古热带植物区系的孑遗种，由于其头状花序基部有两枚白色大苞片，如白鸽展翅，故被称为“中国鸽子树”。近年来，由于自然和人为的原因，珙桐的天然分布面积和天然种群数量急剧下降，现天然分布种群已濒临灭绝，被列为国家一级保护植物。 进行珙桐组织培养快速繁殖技术研究，为保护我国珍贵的珙桐资源和珙桐苗木的产业化提供思路和技术，在理论研究和实际应用中都具有十分重要的意义。 本研究以珙桐冬芽、带芽茎段、叶片及茎段为材料系统地研究了珙桐组织培养直接和间接器官发生途径的各个培养阶段中基本培养基、生长调节剂和活性炭等因素的影响，筛选出了各阶段的适宜培养基，成功地获得了珙桐组织培养再生植株，建立了系统的珙桐组织培养植株再生体系。 初代培养阶段，通过正交实验方案，以珙桐冬芽、叶和茎段等为外植体，诱导冬芽的萌发和愈伤组织的发生。结果表明，WPM+2.0mg／LBA+0.1mg／LNAA为诱导珙桐冬芽萌发的适宜培养基；以二年生实生苗的叶和茎段为外植体诱导愈伤组织，由于消毒过程的药害作用导致没有愈伤组织的发生；以珙桐无菌芽叶片和叶柄诱导愈伤组织则获得成功，适宜的培养基分别为WPM+2.0mg／LBA+0.5mg／L2，4-D和WPM+2.0mg／LBA+2.0mg／LNAA。 继代增殖培养阶段，通过L9(3~3)正交实验，得出适于诱导珙桐芽的增殖培养基为WPM+2.0mg／LBA+0.1mg／LZT，BA为主要影响因素；愈伤组织增殖培养则以WPM+1.0mg／LBA+0.5mg／LNAA+2.0mg／LZT为宜，增殖速度快，褐化程度小。 分化培养阶段，通过L16(4~4)正交实验，得出以无菌苗带芽茎段诱导腋芽的萌发以WPM+2.0mg／LBA为最适培养基，将该结论应用于野外采集的珙桐带芽茎段同样获得了成功，诱导率达91.7％；通过L9(3~3)正交实验推出愈伤组织诱导芽的分化以WPM+3.0mg／LBA+0.5mg／LKT+0.1mg／LIBA为适宜培养基。 壮苗培养阶段，WPM+1.0mg／LBA+1.0mg／LNAA为适宜培养基；生根阶段，从生根率和生根质量综合考虑，最适培养基为WPM+1.0mg／LNAA+0.5g／LA.C，生根率可达86.7％。将生根苗转入WPM无激素培养基生根后壮苗培养，有利于提高移栽成活率。炼苗移栽阶段以泥炭+珍珠岩(2：1)为最适移栽基质，并浇以改良霍格兰营养液，成活率可达73.3％。
王莹[9]2008年在《青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究》文中提出青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja]集药用、保健、材用、观赏等多种功效于一体,具有很高的开发价值,但是自然更新困难,开发利用受到严重制约。本课题选择了青钱柳四个种源(其中叁个单株)离体胚作为外植体,系统建立了由离体胚培养到生根诱导的整个技术体系,并以子叶作为试料对生根机理进行了探讨。本研究旨在建立快速、高效的青钱柳组培快繁体系,为工厂化育苗提供理论依据。现将本研究主要结论与成果总结如下:(1)比较了不同培养基中离体胚生长情况,结果表明添加蔗糖20g/L的琼脂白培养基显着提高了离体胚的萌发率(82.33%)。此培养条件下种源间离体胚质量差异较大:06庐山1~#成苗率最好,为72.66%;06剑河3~#和06云南4~#其次,成苗率44.00%、39.33%;06鹤峰种源最差,仅17.33%。(2)据离体胚培养的结果和试验基数的要求,选择06庐山1~#、06剑河3~#、06云南4~#做进一步的丛生芽诱导增殖试验。初代与继代培养的结果证实了不同种源长势上的差异。初代培养兼顾丛生芽诱导率与增殖系数,继代培养以增殖系数和苗高作为考察对象。试验结果表明6-BA0.5～1.0mg/L+IBA0.01mg/L是适合初代、继代培养的最佳激素组合。06剑河3~#在6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L组合下丛生芽诱导率100.00%,增殖系数6.08,苗高3.87cm;06庐山1~#与06云南4~#最佳丛生芽诱导率分别为93.33%、63.33%,增殖系数5.22、2.99,苗高3.12cm、3.40cm。(3)选用了稀土硝酸镧和烯效唑进行壮苗培养,以06剑河3~#和06庐山1~#继代试管苗作为试材,测定了相关生长、生理指标比较壮苗效果。试验结果表明稀土镧5mg/L使苗鲜重增加,促进丛生芽分化,提高叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量,促进高生长,适合作为增殖培养基中壮苗添加物;烯效唑0.5mg/L则能抑制苗高,提高叶绿素含量,提高植株抗性,适合用作增殖后的壮苗培养。(4)继代5次以上的试管苗,首先在1/2WPM+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖20g/L生根诱导培养基暗培养15d,再转入1/2WPM+蔗糖20g/L正常光照培养,06庐山1~#不定根发生率23.33%。(5)子叶添加IBA1.5mg/L后,不定根发生率100%。比较研究了子叶不定根发生中四种内源激素的含量变化,结果表明内源IAA对不定根的发生起关键性作用,根原基的启动需要高的内源IAA,而不定根的形成与根的伸长需要较低的内源IAA水平。IAA/ABA,IAA/GA_3比值较好反映出生根过程中几种激素的变化趋势,GA_3可能不是影响不定根发生的关键因素。
伊书亮, 郭国宁, 葛世栋, 周米生, 宋蒙亚[10]2009年在《核桃组织培养研究综述》文中指出综述了影响核桃组培的主要因子,不同的核桃品种、培养基、激素和培养条件等都会影响核桃的组织培养。并对组织培养过程中存在的褐化、污染、适宜培养基选择和外植体选择等问题及解决办法进行了讨论,对核桃组织培养的应用前景进行了展望。
参考文献：
[1]. 美国山核桃组织培养技术的研究[D]. 王静. 中南林业科技大学. 2012
[2]. 实生核桃茎段的组织培养研究[J]. 张丽娟, 陈建华. 甘肃农业. 2008
[3]. 实生核桃茎段的组织培养及影响因子的研究[J]. 田爱梅, 王国强. 叁峡大学学报(自然科学版). 2002
[4]. 实生核桃茎段的组织培养及其影响因子的研究[D]. 田爱梅. 山西农业大学. 2001
[5]. 核桃组培快繁技术的研究[D]. 张燕. 山西农业大学. 2004
[6]. 核桃无融合胚离体培养初步研究[D]. 常董董. 山东农业大学. 2017
[7]. 生物柴油树种石栗快繁技术的研究[D]. 韩佳宇. 广西大学. 2012
[8]. 珙桐组织培养与植株再生体系的建立[D]. 吴安湘. 中南林业科技大学. 2006
[9]. 青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究[D]. 王莹. 南京林业大学. 2008
[10]. 核桃组织培养研究综述[J]. 伊书亮, 郭国宁, 葛世栋, 周米生, 宋蒙亚. 安徽农学通报(上半月刊). 2009
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