基于甘油三酯组成特征检验餐厨回收油的研究
乔 杰1，时秋娜1，赵鹏程2
（1. 河南警察学院，郑州 450046；2. 中国刑事警察学院，沈阳 110845）
摘 要： 目的 本文采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD），分析各种模拟回收油的差异，从而进行回收油的鉴别。方法 将常用的大豆油、花生油和动物油脂的样品混合后模拟回收油脂，采用丙酮提取后直接进样分析，色谱柱条件为C18非极性柱，流动相为二氯甲烷-乙腈(体积比30∶70) ，流速1. 0mL/min，采用蒸发光散射检测器检测，保持柱温35℃，使各种甘油三酯分离，对比处理各样品谱图数据。结果 混入了动物油脂的植物油与其纯品植物油两者的甘油三酯的组成变化较大。结论 通过分析油脂中甘油三酯组成特征获取油脂种属信息，进而能够对疑似从餐厨垃圾中回收提炼的涉假（劣质）植物油进行鉴别。
关键词： 甘油三酯；回收油；高效液相-蒸发光散射法
食用油是日常生活的必需品，不法商贩牟取利益导致“地沟油”事件屡禁不止。“地沟油”通常有三种来源：一是从餐厨垃圾中提炼，二是从动物内脏及下脚料熬制后获得，三是对反复使用的炸油进行处理后制得。从餐厨垃圾中回收的食用油，经过处理重回餐桌之上，对消费者的健康造成严重的威胁，地沟油的出现既扰乱了市场秩序，又危害食品安全。甘油三酯组分是了解一种油脂特征的关键，蒸发光散射检测器广泛应用于甘油酯的分析检测中，其可弥补紫外和示差折光检测器的不足，采用高效液相-蒸发光散射法对油脂中甘油三酯定性和定量分析已取得显著进展。史晓凡等[1]采用高效液相色谱-蒸发光散射法分析人和动物油脂的种属区别，范璐等[2]通过甘三酯-主成分分析识别研究了7种植物油脂，刘涛等[3]建立了利用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测、通过梯度洗脱测定油脂中脂肪酸、单甘酯、二甘酯与三甘酯含量的方法。本文针对餐厨垃圾中回收提炼的地沟油进行研究，采用常用的大豆油、花生油和动物油脂的样品进行混合模拟回收类地沟油，在对油脂中的甘油三酯组分以及动物油和植物油油脂种属特征的研究基础上，利用高效液相-蒸发光散射法对模拟样品的特征谱图进行分析和比较达到鉴别的目的，为解决在打击危害食品安全犯罪中回收类地沟油的检验问题提供了科学依据，对公共安全领域油脂物证检验技术发展具有重要的借鉴意义。
1)建设厂级数据中心的硬件支撑架构。根据顶层的规划设计，建成能够支撑未来3-5年的数据采集、数据存储、数据分析计算、数据分析应用开发所需的硬件支撑环境，确保新技改完成前的数据增长及数据分析环境的硬件支撑需求，支持动态扩容，随时能够增强整个硬件体系的服务能力，包括未来数据中心要承担的“实时数据处理”的能力，如设备实时运行数据、实时生产数据、实时环境数据等的采集、处理能力[3]。
1 材料和方法
1.1 甘油三酯标准品
月桂酸甘油酯（LaLaLa）、1,2-亚油酸-3-棕榈酸甘油酯(LLP)、1,2亚油酸-3-油酸甘油酯(LLO)、1,2-豆蔻酸-3-棕榈酸甘油酯(MMP)、油酸甘油三酯（OOO）、1,2-油酸-3-棕榈酸甘油酯(OOP)、1,3-油酸-2-棕榈酸甘油酯(OPO)、1,2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(OOSt)、1,3-油酸-2-硬脂酸甘油酯(OStO)、1-棕榈酸-2油酸-3-亚油酸甘油酯(POL)、1,2-棕榈酸-3-油酸甘油酯（PPO）、1,3-棕榈酸-2-油酸甘油酯（POP）、1-棕榈酸-2-亚油酸-3-硬脂酸甘油酯(PLSt)、1-硬脂酸-2-油酸-3-硬脂酸甘油酯(POSt)、1,2-棕榈酸-3-硬脂酸甘油酯（PPSt）、1-硬脂酸-2-棕榈酸-3-油酸甘油酯(StPO)、1,2-硬脂酸-3-油酸甘油酯（StStO）、1,3-硬脂酸-2-棕榈酸甘油酯(StPSt)、硬脂酸甘油酯（StStSt）。所有标准品4 ℃冷藏保存。本实验所用甘油三酯样品均从瑞典Larodan公司中国总代理宜昌众意泰贸易有限公司购入。（本论文中后面涉及到甘油三酯名称的都只采用英文缩写进行标注）
分别称取19种标准品各2.0 mg置于10.0 mL容量瓶中，用丙酮溶解、定容，配制成甘油三酯标准溶液，检测时分别取等量混合制成混合标准样品溶液，待测。
据笔者统计，唐圭璋于《全宋词》中收录《卜算子》共计236首，其中《卜算子·和惜惜》与《卜算子·答幼谦》两首皆宋元小说话本中人物词，本文不做分析。另有3首闺情，皆为元明小说话本中紫竹、玉娇娘、无名氏依托宋人词，亦不做分析。故而真正作于两宋时期的《卜算子》只有231首，另外，《全宋词》中有脱文8首，本文亦不做研究。综上，本文研究的完整词作共有223首。
1.2 实验试剂
本文所采用的提取剂丙酮、流动相乙腈、二氯甲烷、冰乙酸均为色谱纯。
植物油样品溶液的制备：分别取两种食用油样品1 μL溶解于1 mL丙酮中，配成样品溶液，待测。
1.3 样品及样品溶液的配制
从餐厨垃圾中回收提炼的地沟油，因炒制菜肴的过程中必定会掺杂其他的油脂，如随机提取炸酱面肉酱中食用油（大豆油）进行检测得出特征谱图（如图3），能够发现烹制过猪肉的大豆油中含有了猪脂肪的特征甘油三酯，与大豆油和猪脂肪的混合样品甘油三酯特征谱图完全一致。因此只要能鉴别出食用植物油中是否含有其他油脂，特别是动物油脂就可以确定其是否为回收油。
本文分别将大豆油样品和常见的动物油脂（包括猪脂肪、牛脂肪、羊脂肪、鸭脂肪）样品进行混合，参照标准品谱图（见图4），对比大豆油纯样品和混合样品的分析结果能够发现，无论大豆油样品中混入哪种动物油脂（猪、牛、羊、鸭），混合样品与纯大豆油样品的甘油三酯组成结构都相差较大，混合样品具有了大豆油和动物油的共同特征，且特征性明显(见图 5～8）[8-10]。
动物油脂样品溶液的制备：分别用牙签挑取适量猪、牛、羊、鸡、鸭油脂样品于离心管中，各称取2.0 mg，加入0.5 mL丙酮，室温下，超声振荡辅助溶解，制成动物油脂溶液，4 ℃冷藏保存，待测，使用前放置至常温，再次超声15 min，离心10 000 r/min，1 min，备检。
食用植物油样品：金龙鱼牌精炼一级大豆油，1.8 L；刀唛牌花生油，900 mL。
在核设施的辐射防护上，起初认为只要保护了人类，也就保护了其他物种。1976年，国际原子能机构(IAEA)明确提出非人类物种的保护问题，1990年国际放射防护委员会(ICRP)提出的在保护人类的同时还需要保护人类赖以生存和发展的其他生物的辐射防护观点逐渐为人们所认可。因此，从保护环境、维持生物多样性的角度，需要评价核设施对于生物的辐射影响。国外在该方面进行了较多的研究，并研发了专门软件，得到了广泛应用。
随机提取餐厅炒菜用的食用油以及反复使用的炸油条食用油样品进行HPLC-ELSD分析（见图1、图2），经过与食用油样品对比发现两者均为大豆油，同时表明经过加热使用后的食用油的甘油三酯的组成特征并没有发生重大变化，仍具有种属特征[5-7]。
1.4 仪器及条件
美国Agilent 1100series高效液相色谱仪；色谱柱：C18柱（150.0 mm×3.9 mm，4 μm）； 柱 温：30 ℃；流动相：二氯甲烷-乙腈-冰乙酸（体积比为30∶70∶0.2）；流速：1.0 mL/min；蒸发光散射监测器（Model 1400ELSD）；漂移管温度：70 ℃；雾化管温度：30 ℃；光学池温度：80 ℃；排气管温度：60 ℃ ；GAS：45～55 P；柱温箱温度 ：35 ℃[3-4]。
2 结果与讨论
2.1 对随机提取的餐厨食用油的分析
模拟回收使用植物油脂样品溶液的制备：取5 mg动物油脂即猪脂肪、牛脂肪、羊脂肪、鸭脂肪分别溶于1 mL的大豆油、玉米油、花生油、葵花油中，涡旋充分混合，取混合液，溶解提取方法同植物油纯样。
图1 炒土豆丝中食用油与大豆油的特征谱图对比
Fig.1 Almost unchanged characteristic spectra of pure soybean oil before and after used into frying potato
图2 油条反复用油与大豆油的特征谱图对比
Fig.2 Almost unchanged characteristic spectra of pure soybean oil before and after repetitious use into frying dough sticks
动物油脂样品：猪油脂样品3份；牛油脂样品3份；羊油脂样品3份；鸭油脂样品3份。
图3 肉酱中食用油与大豆油和猪脂肪混样的特征谱图对比
Fig.3 Same characteristic spectra of both the meat sauce and mixture of soybean oil and pig fat
2.2 对模拟回收使用的大豆油样品的分析
神像高一丈，身体由整块的白玉雕凿而成，双翼则是用青碧色的翡翠雕刻。一束月光从神殿顶部预留的天窗直射而下，打在神像上，令神像的身体泛起柔柔的白芒，双翼青光流转，仿佛随时都要振翅冲天。
混入猪脂肪的大豆油中出现了只有猪肉脂肪中才具有的OOSt/OStO和StPO/POSt；同时MMP、POL、OPO/OOP这三种甘油三酯的相对含量相对大豆油纯品也发生了很明显的变化（见图5）。含有牛脂肪的大豆油中出现了纯大豆油中不应该含有的两种未知甘油三酯以及OOSt/OStO、StPO/POSt、PPSt；并且OOO、OPO/OOP、PPO/POP的相对含量发生显著变化（见图6）。混入羊脂肪的大豆油样品中出现了羊脂肪所含的OOSt/OStO、StPO/POSt、PPSt、StStO 等甘油三酯；并且 POL、OPO/OOP、PLSt、PPO/POP这四种甘油三酯的相对含量发生变化较大（见图7）。混入鸭肉脂肪的大豆样品所呈现的特征相同，均出现了纯大豆油样品中所不含的一种未知甘油三酯以及OOSt/OStO；而StPO/POSt、MMP、POL、一未知甘油三酯峰、OOO、OPO/OOP、PLSt等甘油三酯的相对含量变化明显（见图8）。
图4 19种标准品的高相液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.4 HPLC-ELSD spectra of the mixture from 19 kinds of triglyceride standards
图5 大豆油和猪脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.5 HPLC-ELSD spectra of soybean oil before and after its mixing with pig fat
图6 大豆油和牛脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.6 HPLC-ELSD spectra of soybean oil before and after its mixing with bovine fat
图7 大豆油和羊脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.7 HPLC-ELSD spectra of soybean oil before and after its mixing with sheep fat
图8 大豆油和鸭脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.8 HPLC-ELSD spectra of soybean oil before and after its mixing with duck fat
2.3 对模拟回收使用的花生油样品的分析
分别将花生油样品和常见的食用动物的油脂包括猪脂肪、牛脂肪、羊脂肪、鸭脂肪样品混合，参照标准样品特征谱图，对比花生油纯样品与混合样品的谱图能够发现，混入动物油脂的花生油与纯花生油特征谱图特征相差很多（见图9～12）。混合样品中除了仍含有花生油的色谱特征之外，还出现了所混入的动物油脂的甘油三酯特征峰，兼具两者的特征性。
混入猪脂肪的花生油中出现只有猪肉脂肪中才有 的 PLSt、PPO/POP、OOSt/OStO 和 StPO/POSt；同 时 MMP、POL、OOO、OPO/OOP这 四 种 甘 油三酯的相对含量与大豆油纯品比较，发生了很明显的变化（见图9）。含有牛脂肪的花生油中出现了纯品中不应该含有的一种未知甘油三酯以及POP/PPO、OOSt/OStO、StPO/POSt、PPSt等甘油三酯；且OOO、OPO/OOP的相对含量发生明显变化（见图10）。混入羊脂肪的花生油样品中出现了羊脂肪所含的PPO/POP、OOSt/OStO、未知甘油三酯、StPO/POSt、PPSt、StStO等甘油三酯；而且OOO、OPO/OOP这两种甘油三酯的相对含量发生明显变化（见图11）。混入鸭脂肪的花生油样品所呈现的特征相同，均出现了纯花生油样品中所不含的PPO/POP、一种未知甘油三酯、OOSt/OStO、StPO/POSt，且OOO、OPO/OOP等甘油三酯的相对含量变化明显（见图12）。
图9 花生油和猪脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.9 HPLC-ELSD spectra of peanut oil before and after its mixing with pig fat
图10 花生油和牛脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.10 HPLC-ELSD spectra of peanut oil before and after its mixing with bovine fat
图11 花生油和羊脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.11 HPLC-ELSD spectra of peanut oil before and after its mixing with sheep fat
图12 花生油和鸭脂肪混合前后的高效液相色谱-蒸发光散射分析谱图
Fig.12 HPLC-ELSD spectra of peanut oil before and after its mixing with duck fat
3 结论
通过对掺入猪、牛、羊、鸭脂肪的两种日常食用植物油大豆油、花生油的混合样品的分析结果表明，混入了动物油脂的植物油与其纯品植物油两者的甘油三酯的组成变化较大，因此可以利用分析油脂中甘油三酯成分的方法来区分油脂种属，进而对疑似从餐厨垃圾中回收提炼的涉假（劣质）植物油进行鉴别，为打击食用油脂制假、掺假的违法犯罪行为提供科学依据。
大学生生活在学校这个大规模群体中，群体中的日常生活表现出高度的一致性，思想的潜移默化使得每个学生个体对群体有着强烈的忠诚程度，从而有效助长了大学生在网络购物中的从众行为。最终使他们不仅通过自己的经验来调整个人购买行为，而且会有意识的模仿周围同学的消费观念，所以在“双十一”大学生消费群体的压力下改变个人的想法而盲目投入到“双十一抢购”的非理性购买行为中。
参考文献
［1］ 史晓凡，周欣欣，王磊，等.高效液相色谱-蒸发光散射法分析人和动物油脂种属［J］.中国法医学杂志，2013,28(2):116-118.
［2］ 范璐，周亚利，霍权恭，等. 甘三酯-主成分分析识别7种植物油脂的研究［J］.河南工业大学学报：自然科学版，2014(1):1-5.
［3］ 刘涛，尹春华，谭天伟.高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定脂肪酸和甘油酯的含量［J］.中国油脂，2005,30(9):50-53.
［4］ 邓平建，杨冬燕，李浩，等. 地沟油拉曼光谱特征形态［J］.中国公共卫生，2015,31(4):510-515.
［5］ 王世成，范津杉，王颜红，等. 液相色谱-大气压化学电离质谱分析鉴别地沟油中的氧化成分［J］. 分析化学，2014,42(5):741-746.
［6］ 王嵬，刘连利，仪淑敏. 地沟油鉴别检测方法研究进展［J］.食品安全质量检测学报，2015,6(1):218-225.
［7］ 赵昌平，杨叶琴，赵杰. 离子色谱法测定地沟油中的氯离子［J］. 理化检验（化学分册），2016,52(6):712-715.
［8］ 丁军凯，范垂昌. 瞬时裂解甲基化技术——种快速鉴别人体脂肪及动植物油脂的色谱分析方法［J］.刑事技术，1996(3):5-9.
［9］ 宋家玉，陈金东，刘文杰，等.油脂脂肪酸指纹库构建及在食用油脂地沟油类别鉴别中应用［J］.中国公共卫生，2017,33(10):1526-1532.
［10］ 王岩，黄浩博.犯罪现场微量油脂物证酸败老化特征分析［J］.中国刑警学院学报，2017(4):78-83.
Detecting Recovery Oil by Its Characteristic Triglyceride Composition
QIAO Jie1, SHI Qiuna1, ZHAO Pengcheng2
(1. Henan Police College, Zhengzhou 450046, China;2. China Criminal Investigation Police University, Shenyang 110845, China)
ABSTRACT: Objective To identify the recovery oil by analyzing the differences of various simulated recovery oils with high performance liquid chromatography-evaporative light scattering (HPLC-ELSD). Methods The simulated recovery oil,blended with soybean/peanut oil and animal grease, was extracted by acetone. The extract was undergone through HPLCELSD analysis under the conditions: C18 nonpolar column, keeping its temperature of 35°C, being flowed with mobile phase of dichloromethane -acetonitrile (30:70 V/V) at running rate of 1.0 mL/min, and evaporative light scattering detector for gauging.The separated triglycerides were compared of their spectrums against the spectral data from various original constituent oil.Results Triglyceride composition varied greatly when pure vegetable oil mixed with animal grease. Conclusions The analysis of triglyceride components can identify the quality-inferior/adulterated vegetable oil suspected to be refined from recovered food waste.
KEY WORDS: triglyceride; recovered oil; high performance liquid phase - evaporative light scattering method
中图分类号： DF795.1
文献标识码： A
文章编号： 1008-3650(2019)04-0317-05
DOI： 10.16467/j.1008-3650.2019.04.008
基金项目： 河南警察学院院级课题（No.HNJY-2018-44）
第一作者简介： 乔 杰，女，河南周口人，硕士研究生，研究方向为微量物证分析。E-mail: JOYCCPC@163.com
收稿日期： 2017-09-08；修回日期：2018-01-14
引用 本文格式：乔杰，时秋娜，赵鹏程. 基于甘油三酯组成特征检验餐厨回收油的研究[J]. 刑事技术，2019,44(4):317-321.
标签：甘油三酯论文; 回收油论文; 高效液相-蒸发光散射法论文; 河南警察学院论文; 中国刑事警察学院论文;