浙江省常山县招贤中心卫生院 324200
摘要：目的：采用几种不同的方法对大肠杆菌进行检验，探究不同检验方法的影响有何不同。方法：利用一次离心、二次离心、滤芯滤膜及双重滤膜法对呋喃唑酮片中大肠杆菌的情况进行检验。结果：一次离心法、二次离心法、离心滤膜法与离心双重滤膜法4种检验方法中，离心双重滤膜法的检出效果明显优于其他几种检验方法，组间结果比较差异显著，具有统计学意义，P＜0.05。结论：与其他几种检验方法相比，离心双重滤膜法大肠杆菌检出率较高，不仅操作过程胃肠简单，总体上检出率也比较高，值得临床推广应用。
关键词：大肠杆菌；检验方法；探究
大肠菌群是格兰阴性菌的一种，经过发酵乳糖后会产生酸、气，人类和其他恒温动物的粪便是这种菌的主要存在场所，因此通过对大肠杆菌情况的检测可以判断药品或视频是否受到了粪便的污染，成为常规口服药物的常规检测项目之一。呋喃唑酮片是治疗由大肠杆菌引起的肠炎的常见抗菌类药物，由于该药物具有一定抗菌性，因此常规检验方法是很难检测出该药物中是否存在大肠杆菌的[1]。本次研究主要以呋喃唑酮片为主要研究对象，利用不同方法对大肠杆菌的情况进行检验，现在进行如下报道。
1资料与方法
1.1基线资料
呋喃唑酮片（厂家为贵州省科晖制药厂，规格为0.10g/片，国药准字H52020295），大肠杆菌CMCC、CMCB（孔径规格分别是3.0、1.2、0.45μm），由中国药品生物制品检定所提供混合纤维素酯微孔滤膜、伊红美蓝琼脂及大肠杆菌生化反应培养基。
1.2检测方法
本次研究共利用4种方法进行检测：呋喃唑酮片、大厂杆菌CMCC调成测试液，首先，利用一次离心法，在测试液离心之后利用上清液检测大肠杆菌，其次，利用二次离心法，在测试液两次离心之后利用上清液检测大肠杆菌，第三，利用离心滤膜法，待测试液离心之后，利用0.45μm微孔过滤上清液，取出滤液后检测大肠杆菌，第四，利用离心双重滤膜法，利用0.45μm微孔过滤上清液，经过两次过滤之后取出滤液后检测大肠杆菌。检验大肠杆菌的过程中，在胆盐乳糖增菌液中加入待测液，经过48h增菌，仔细观察是否有产气、浑浊的现象，若出现了上述现象说明检测出了大肠杆菌，若无上述现象说明未检测出大肠杆菌。
伊红美蓝琼脂平板分离检验：经过7d~14d的培养之后，观察大肠杆菌菌落生长的情况，若观察平板内大肠杆菌菌落明显长处，则检测出了大肠杆菌，若平板内无明显大肠杆菌菌落长处，则未检测出大肠杆菌。
1.3统计学处理
本次研究中涉及到的所有数据均利用统计学软件SPSS18.0进行处理与分析，组件比较利用t、卡方检验，P值为检验标准，若P小于0.05说明差异是显著性的。
2结果
一次离心法检验中胆盐乳糖增菌液为微浑，伊红美蓝琼脂平板分离检验中未长出菌落，因此未检出；二次离心法胆盐乳糖增菌液澄清，伊红美蓝琼脂平板分离检验中未长出菌落，因此未检出；离心滤膜法检验中胆盐乳糖增菌液澄清，伊红美蓝琼脂平板分离检验中未长出菌落，因此未检出；离心双重滤膜法检验中胆盐乳糖增菌液浑浊并产气，伊红美蓝琼脂平板分离检验长出了典型的大肠杆菌菌落，因此检出；一次离心法、二次离心法、离心滤膜法与离心双重滤膜法4种检验方法中，离心双重滤膜法的检出效果明显优于其他几种检验方法，组间结果比较差异显著，具有统计学意义，P＜0.05，详见表1。
3讨论
大肠杆菌检测方法非常多，其中常见的为一次离心法与二次离心法，多种药物在经过一次离心或二次离心之后，其溶液中药物浓度将明显降低，然而部分药物利用一次离心或二次离心并不能使其浓度降至最低抑菌浓度之下，这种情况下可以利用孔径为0.45μm的滤膜进行过滤，多数药物在经过过滤后，溶液中药物浓度都会降低到药物最低抑菌浓度，但是经过过滤之后药物微量残留浓度也往往高于最低抑菌浓度较高的药物，这时可以利用离心双重滤膜法过滤[2]。虽然水中呋喃唑酮片的溶解度为40mg/L，但是在胆盐乳糖增菌液中其最低抑菌浓度为0.0140mg/L，一次李新之后其抑菌浓度始终在0.0140mg/L之上，经过滤芯滤膜法检测后，由于经过滤膜过滤过程中会有部分残留，在胆盐乳糖增菌液中其浓度高于最低抑菌浓度0.0140mg/L，使得大肠杆菌不能继续繁殖[3]。
本次研究中利用离心双重滤膜法进行检验，可以去除掉水中溶解的少量呋喃唑酮，离心之后上清液中的残留被拦截在滤膜上，有效降低了胆盐乳糖增菌液中的药物浓度，大大提升了大肠杆菌阳性检出率。大肠杆菌赝品在人工污染5d之后可以全部检出，这无疑为胆盐乳糖增菌液中大肠杆菌的繁殖不会受到影响提供了佐证[4]。总之，通过本次研究可以看出，利用离心双重滤膜法可以有效检出付娜娜作痛片的大肠杆菌情况，解决胆盐乳糖增菌液中呋喃唑酮浓度过高的问题，利用离心双重滤膜结合法检验呋喃唑酮片大肠杆菌情况，不仅操作过程胃肠简单，总体上检出率也比较高，值得在临床检验工作中进行推广应用。
参考文献：
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论文作者:郑琳
论文发表刊物:《健康世界》2017年第9期
论文发表时间:2017/7/26
标签：滤膜论文; 大肠杆菌论文; 乳糖论文; 检出论文; 浓度论文; 呋喃论文; 伊红论文; 《健康世界》2017年第9期论文;