隆强
（重庆市大足区中医院 重庆 402360）
【摘要】 目的：研究高效液相色谱法（HPLC）在不同产地黄连饮片中生物碱检测中的价值。方法：选择HPLC法分别检测各区域黄连中生物碱情况。结果：不同区域黄连中小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀生物碱以及总含量具有一定差别，其中四川洪雅县的黄连生物碱含量较高，而云南德钦县较低。结论：HPLC在不同区域黄连生物碱的检验中效果显著，操作较为方便，具有一定重复性，鉴定结果的准确率较高，值得广泛推广及应用。
【关键词】 生物碱；黄连；高效液相色谱法；饮片
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0362-01
黄连属于常见的中药饮片，具有泻火解毒、清热燥湿的功效，取得了较高的临床价值。黄连的主要成分为生物碱，若能够准确掌握黄连中有效成分，选择疗效确切的鉴定方式在保证饮片质量中具有重要意义。临床上常采取紫外分光光度计或者薄层扫描方式进行鉴定，虽然取得过一定检验价值，但效果并不明显[1]。其中薄层扫描鉴定结果的准确性较低，而紫外分光光度计仅能够检出黄连中生物碱的总含量。随着鉴定技术不断完善，临床认为采取HPLC法鉴定效果显著，不仅能够检出各生物碱含量，同时能够保证结果准确[2]。因此本文展开研究，探讨HPLC法在不同区域黄连生物碱的检验中的价值，现作出如下报道。
1.资料与方法
1.1 仪器与试剂
日本日立公司生产的高效液相色谱仪器、色谱柱、超声波清洗器、电子分析天平、色谱数据工作站、乙腈色谱纯试剂、盐酸小檗碱以及双蒸水等。
1.2 方法
将盐酸小檗碱判定为对照，按照HPLC法分别检测黄连中各生物碱含量。
1.3 色谱条件
色谱柱为4.6mm*250mm，5um；流动相50:50的乙腈-0.1%磷酸液体，与0.1g/100ml的十二烷基磺酸钠混合，柱温设置为30℃，检验波长345nm，流速1.0ml/min。
1.4 配置溶液
将100℃干燥后的盐酸小檗碱放入流动相中，浓度设置成240.6ug/ml；取0.1g黄连粉末，放置于锥形瓶中，加入流动相（80ml），采取超声处理，频率200W，功率40kHz，时间控制35min左右。另外选择流动相补充丢失情况，保证液体达到标准线，混匀过滤后成为供试品。
选取1.0、3.0、5.0以及7.0ml的对照品，放入流动相，并将其定容于10ml。按照上述色谱要求，重复两次，10ul/次，观察峰面积，Y=3.5487624-37.515642（r=.99993），盐酸小檗碱处于0.2405～1.6840ug之间表示线性较好。
1.5 加样回收率实验
取10ul对照品进六次，检测峰面积为0.2；另选择相同剂量的供试品于0、2、4、6、8h进样，检测峰面积为0.3，说明8h内供试品平稳；选择同一区域的样品，按照上述色谱要求检测，峰面积0.8%，盐酸小檗碱7.0%；选择其中已知水平的样品，添加适当盐酸小檗碱，按照色谱要求检测，峰面积1.1%，平均回收率97.6%。
1.6 不同产地样品的生物碱鉴定
取不同区域的样品，研制成粉末状，选择0.1g，按照上述方式检测其中生物碱水平。
2.结果
不同区域黄连中各生物碱水平以及总含量比较，差异有统计学意义，其中总生物碱含量以四川洪雅县最高，而云南德钦县最低。见表。
3.讨论
黄连属于毛茛科植物黄连、云连或者三角叶黄连的干燥根茎，本品大苦大寒，具有抗氧化、降糖、降脂、抗菌以及解热等功效，主要分布于四川、贵州、湖南、湖北以及陕西南部等区域，极易存活于600～2000m的山谷湿阴处，可栽培，其粉末呈现棕黄色。
黄连成分以生物碱为主，其中小檗碱含量较高，其次分别为巴马汀、表小檗碱以及黄连碱等。临床上若能够准确掌握黄连中有效成分，可直接控制黄连饮片质量，并为不同研究目的选择适宜的黄连[3]。本文展开研究，将单一对照品作为标准参照峰，可明显减少对照品的使用剂量。同时将盐酸小檗碱的线性范围0.2405～1.6840ug，平均回收率97.6%。另外流动相为乙腈-0.1%磷酸液，为黄连中各生物碱的鉴定提供保障，并且具有一定重现性。本文经过鉴定后，结果提示：不同区域黄连中各生物碱与总含量相比无差异，四川洪雅县总生物碱含量较高，而云南德钦县较低，说明黄连的生长环境与其中生物碱含量息息相关。若能够对黄连作进一步研究，可发现其产地以及加工方式不同，可能导致其化学成分产生一定差异。
综上所述，经过HPLC法对其生物碱进行鉴定，可有效确定有效成分，在保证饮片质量中具有重要意义。
【参考文献】
[1]赖先荣，周邦华，杜明胜，等.6种黄连饮片中6种生物碱的RP-HPLC含量测定及与“治消渴”药效学的谱-效关系分析[J].中国中药杂志，2016，41(24):4579-4586.
[2]崔灿.HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究[J].内蒙古中医药，2017，36(14):132.
[3]霍志鹏，王玉，周水平，等.黄连生物碱成分的HPLC-DAD-MS分析[J].天津药学，2016，28(2):8-12.
论文作者:隆强
论文发表刊物:《医药前沿》2018年7月第21期
论文发表时间:2018/8/2
标签：生物碱论文; 黄连论文; 色谱论文; 含量论文; 鉴定论文; 饮片论文; 小檗论文; 《医药前沿》2018年7月第21期论文;