李娜
黑龙江省传染病防治院 150500
【摘 要】目的本次实验的目的是分析腹泻便病原菌检验的结果，总结其临床意义，分析流行动态及病原菌的种类，为防治工作提供依据。方法随机选取我院2014年8月－2015年8月收治的腹泻患者58例，观察对比不同菌属的检出率。结果58例标本中，以志贺菌属的检出率最高，其次为沙门菌属，明显高于其它菌属，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论腹泻的发生与多因素有关，在腹泻便的病原菌检验中，除应对致病菌进行检测外，还需对条件致病菌给予重视，才能多方面给予综合治疗，从而有助于指导腹泻的防治工作，并提高临床治疗的准确性和科学性。
【关键词】腹泻病原菌；腹泻；临床分析
【中图分类号】R442.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-05-053-01
引言：腹泻是门诊常见疾病之一，常因误食不洁食物或饮用含病菌水导致发病，其发病率高、起病急、发展快，因此要求临床需要尽快诊断，早期对症治疗。其临床表现为排便明显异常，如排便频率大大增加、排稀薄、脓血、黏液便或含有半消化食物等。腹泻的诊断需要依靠便检的病原菌检测结果，早期对症治疗，并指导临床合理用药。病原菌包括寄生虫、真菌及细菌病毒，目前居首位的是志贺菌和轮状病毒。因此，选取本院2014年8月到2015年8月58例腹泻患者的粪便作为样本，分析腹泻便病原菌的检验结果。
1.材料与方法
1.1标本与材料
本文选取2014年8月到2015年8月在我院治疗的58例腹泻患者的粪便作为样本，其中男性为38例，女性为20例。年龄在3个月到40岁之间。其中，有14例为稀便，7例为脓血便，11例为粘液便，26例为水样便，观察所有患者的菌属检测率，并进行比较。
培养基：碱性蛋白胨水、GN增菌液、氯化钠结晶紫增菌液、MAC琼脂、SS琼脂、庆大霉素琼脂、氯化钠蔗糖琼脂、营养琼脂、三糖铁琼脂、氯化钠三糖铁琼脂、MH琼脂，以上培养基为北京陆桥技术责任有限公司产品。诊断血清：霍乱弧菌01群多价诊断血清及0139诊断血清由中国预防医学科学院流行病学微生物研究所提供，志贺菌属诊断血清、沙门菌属诊断血清为卫生部兰州生物制品研究所产品。致病性（EPEC）、产毒性（ETEC）、侵袭性（EIEC）大肠埃希菌诊断血清为卫生部成都生物制品研究所产品。质控标准菌株：福氏志贺菌ATCC 51115、宋内氏志贺菌ATCC 51203、大肠埃希菌ATCC 25922、副溶血性弧菌ATCC11614、金黄色葡萄球菌ATCC 25923均由国家药品生物制品检定所提供。药物试验质控菌株及药敏纸片：大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923均由国家药品生物制品检定所提供。药敏纸片来源于OXOID公司。
1.2方法
对58例腹泻便患者的肛拭子或新鲜粪便取标本，放置在培养皿中进行常规细菌培养，再采取全自动细菌鉴定仪（法国，型号：VITEK 2Compact）进行病原菌测定。
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增菌与分离培养，将标本分别接种于碱性蛋白胨水、GN增菌液、氯化钠结晶紫增菌液中经37摄氏度18~24 h培养，分别转种于庆大霉素琼脂、MAC琼脂、SS琼脂、氯化钠蔗糖琼脂经37摄氏度18~24 h培养；挑选疑似菌落：在挑选疑似菌落时，采用逐步鉴别法，首先通过MAC琼脂先初步挑选出疑似致泻性大肠埃希菌的菌落，经革兰染色后显示为革兰阴性杆菌，然后接种在三糖铁琼脂中37℃恒温培养18～24h，然后通过SS琼脂挑选出疑似志贺菌的菌落，经革兰染色后显示为革兰阴性杆菌，然后接种在三糖铁琼脂中37℃恒温培养18～24h，通过氯化钠蔗糖琼脂挑选出疑似副溶血性弧菌的菌落，然后接种在氯化钠三糖琼脂中37℃恒温培养 18～24h，通过SS琼脂挑选出变形杆菌菌落，并使其保持扩散生长；生化检测：对可疑的致泻性大肠埃希菌、志贺菌、副溶血性弧菌、变形杆菌的菌落在生化反应试条上进行生化反应，SS平板上生长的粉红色疑似大肠埃希菌直接用各种致泻性大肠埃希菌抗血清做试探性玻片凝集，凝集者（生理盐水不凝集）接种ID32E生化试条，SS平板上疑似沙门菌、志贺菌的菌落则根据37摄氏度18~24 h培养后的三糖铁反应，相应用沙门菌和志贺菌抗血清与三糖铁斜面上生长的菌苔进行试探性玻片凝集试验，凝集者（生理盐水不凝集）接种ID32E生化试条，氯化钠蔗糖琼脂平板上生长的蓝绿色的菌落接种ID32E生化试条，并与标准菌株在培养皿上生长出来的典型菌落的生化反应结果进行对照，然后将可疑的试条置于全自动细菌鉴定仪中进行鉴定。应用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。
2.结果
58例标本中，以志贺菌属的检出率最高，其次为沙门菌属，明显高于其它菌属（P＜0.05），差异有统计学意义。
3.讨论
腹 泻是由多因素引起的疾病，在世界范围内广泛流行，尤其在发展中国家。感染性腹泻在我国的危害迄今依然较为严重，威胁人们的健康和生命，对社会经济、交通、旅游、贸易以及人们的生产和生活都将产生不利的影响。在临床分析的58例标本中，志贺菌属检出率44.2%，沙门菌属15.8%，以志贺菌属的检出率最高，其次为沙门菌属，明显高于其它菌属，差异有统计学意义（P＜0.05）。可以说主要引起腹泻病菌种属为志贺菌属，这与全国的相关报道中指出的福氏志贺菌是近年来主要的流行菌株结论基本一致。
随着人民生活水平日益提高，尤其在夏秋季节，人们大量进食海产品或海鲜类制品，加之年轻人外出宵夜也日渐增多，在海鲜食品与宵夜食品加工过程中，普遍存在加热时间短、灭菌不彻底等问题，当食用污染的海产品与宵夜食品时即可造成由副溶血性弧菌引起的腹泻。夏季，天气较热，食品更易被变形杆菌等病原菌污染，是变形杆菌引起的腹泻日益增多的原因之一。变形杆菌属细菌引起腹泻据认为与肠毒素有关。如果将受到污染的食物在28摄氏度以上放置较长时间，变形杆菌即可在其中大量繁殖。因此，由变形杆菌引起的食物中毒也常发生于夏秋季。有报道中指出，对检出的志贺菌经药敏试验，其结果显示大多数的菌株皆对头孢唑啉、左氧氟沙星、头孢噻肟等抗生素敏感，能够作为临床首选的治疗药物，但此类菌属多对四环素、萘啶酸、氨苄西林、利福平类等药物有明显的耐药性。但是也有报道指出志贺菌引起急性菌痢时，会导致患者的排便次数明显增多，其排菌量相对较大，也增加了对周围环境的污染，是重要的传染源。因此，对于志贺菌为主要致病菌的患者，需要及时、合理地选用有效的抗生素进行治疗，阻碍其细菌传播。虽然现在的医学技术很先进，但是对于腹泻也存在误诊和漏诊的现象，其主要原因：在样本培养时，应保证有足够量的菌量，以达到要求的检测精度；病原菌检测精度不够，一些其他类的可导致类似痢疾腹泻症状的致病菌，被误诊为腹泻致病菌。所以，在临床诊治过程中，除对致病菌进行检测外，还需对条件致病菌给予高度重视，才能多方面给予综合治疗，从而提高临床治疗的准确性和科学性。
综上所述，腹泻的发生与多因素有关，在腹泻便的病原菌检验中，除应对致病菌进行检测外，还需对条件致病菌给予重视。随着人们对健康和生活质量的要求不断提高，腹泻病的防治工作显得十分迫切和必要，因此腹泻病原菌菌型及其耐药性监测应作为常规工作，这对腹泻病的防治及临床用药有着重要的意义。
参考文献：
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[3]孟焱，腹泻便病原菌检验结果分析[J]，临床合理用药，2015，8（8）：105-106
论文作者:李娜
论文发表刊物:《系统医学》2016年第5期
论文发表时间:2016/5/25
标签：琼脂论文; 病原菌论文; 菌落论文; 致病菌论文; 氯化钠论文; 沙门论文; 血清论文; 《系统医学》2016年第5期论文;