徐州市云龙区东甸子徐州传染病医院结核科 江苏徐州 221004
【摘 要】目的：探究Xpert MTB/RIF系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性。方法：收集100例疑似肺结核患者痰液标本，给予涂片抗酸杆菌检查与结核杆菌培养，并采用Xpert MTB/RIF系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性。结果：在100例疑似肺结核患者中，40例培养与涂片显示阳性，占40%；9例涂片显示阴性但培养显示阳性，占9%；6例培养与涂片显示阴性，且符合肺结核诊断标准，占6%；45例无结核病临床证据。经Xpert MTB/RIF检测，培养阳性者敏感度为94.2%，培养阳性、涂片阳性者敏感度为93.7%，培养阳性、涂片阴性敏感度为93.1%，涂片阴性、符合临床标准敏感度为47.6%，非结核者灵敏度为99.3%。49例培养显示阳性标本中，采用比例法测得4株利福平耐药菌，耐药率为8.2%，在经Xpert检测灵敏度为93.9%，特异度为98%。结论：Xpert MTB/RIF系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性，具有较高临床应用价值。
【关键词】Xpert MTB/RIF系统；检测；结核分枝杆菌；利福平；耐药性
【Abstract】Objective：To explore the rapid detection of mycobacterium tuberculosis with MTB/RIF system and drug resistance of rifampicin. Methods：100 sputum specimens of patients with suspected tuberculosis were collected，acid-fast bacillus examination and mycobacterium tuberculosis cultivation were given，and the mycobacterium tuberculosis and drug resistance of rifampicin were rapidly detected with MTB/RIF system. Results：In 100 patients with suspected pulmonary tuberculosis，40 cases of cultivation and smear both showed positive，accounts for 40%. 9 cases of smear showed negative but the cultivate showed positive，accounts for 9%.6 cases of cultivation and smear showed negative，and conform to the tuberculosis diagnosis standard，accounts for 6%. 45 cases of patients had no tuberculosis clinical evidence. After the MTB/RIF detection，the cultivate positive sensitivity was 94.2%，the cultivate and smear of positive sensitivity was 93.7%，the cultivate of positive and smear of negative sensitivity was 93.1%，smear of negative，accord with standard of clinical sensitivity was 47.6%，and the sensitivity of people without tuberculosis is 99.3%. Among 49 cases of the cultivate of positive specimens，4 strains of rifampicin resistant bacteria were measured using the ratio method，the resistant rate of 8.2%，and the detection sensitivity was 91.7%，the specificity was 99.4%. Conclusion：It has high clinical value to rapidly detect the mycobacterium tuberculosis and drug resistance of rifampicin were with MTB/RIF system.
【Keywords】 Xpert MTB/RIF system；Detection；Mycobacterium tuberculosis；Rifampicin；Drug resistance
随着分子生物学不断发展，Xpert MTB/RIF试验作为新型分子检测技术受到临床广泛关注，该检测技术灵敏度、特异性较高，操作简便，利于流行学调查与临床应用[1-3]。本研究旨在探究Xpert MTB/RIF系统对结核分枝杆菌及利福平耐药性诊断的临床价值。现报告如下：
1资料与方法
1.1一般资料
选择2014年6月-2015年11月于我院接受治疗100例疑似肺结核患者，均在2月内未接受抗结核药物治疗，且传统实验室检查显示细菌学阳性。
1.2试剂与仪器
抗酸染色用试剂、罗氏固体培养试剂、比例法药敏用试剂、Xpert MTB/RIF检测仪与配套试剂盒。
1.3方法
1.3.1留取痰液标本
患者晨起漱口用用力咳出深处痰液或手机支气管吸出物，共3份，分别进行培养、Xpert MTB/RIF检测、涂片检查。经培养或涂片显示阳性的标本，次日再收集标本行Xpert MTB/RIF重复检测，若Xpert MTB/RIF显示阳性，培养或涂片显示阴性，则需次日收集标本行培养或涂片重复确认。
1.3.2检测方法
涂片结果是根据在特定视野中发现抗酸杆菌个数进行判定：（-）即在300个视野中未发现；1~8条即在300个视野中发现1~8条；（+）即在100个视野中发现3~9条；（++）即在10个视野中发现1~9条；（+++）每个视野中平均可发现10条。结核分子杆菌培养与比例法药敏试验均按相关结核诊断实验室检验规程进行。Xpert检测：将该痰液与消化液按2：1比例混合，处于温室内保存15 min，痰液全部溶解后，取2 mL痰液于反应试剂盒中，再采用Cene Xpert仪器监测。
1.4结果分析
根据培养与涂片结果分为：①培养与涂片显示阳性；②涂片显示阴性，培养显示阳性；③培养与涂片显示阴性，且符合肺结核诊断标准；④涂片与培养均为阴性，不符合肺结核诊断标准。
2结果
2.1 320例疑似肺结核患者诊断结果
在100例疑似肺结核患者中，40例培养与涂片显示阳性，约占40%；9例涂片显示阴性但培养显示阳性，约占9%；6例培养与涂片显示阴性，且符合肺结核诊断标准，约占6%；45例无结核病临床证据。
2.2 Xpert MTB/RIF检测结果分析
经Xpert MTB/RIF检测，培养阳性者敏感度为93.9%，培养阳性、涂片阳性者敏感度为90%，培养阳性、涂片阴性敏感度为88.9%，涂片阴性、符合临床标准敏感度为16.7%，非结核者灵敏度为97.8%。
2.3 利福平耐药检测结果
49例培养显示阳性标本中，采用比例法测得4株利福平耐药菌，耐药率为8.2%，其中在经Xpert检出3株耐药株，灵敏度为93.9%。在比例法敏感菌中，1例经Xpert检测为耐药，特异度为98%。
3讨论
当今，我国肺结核患病率、死亡率均处于世界较高水平，再由于化学药物不合理应用、HIV感染流行，使得耐药结核病、耐多药结核病不断增多，严重影响了对结核病的控制。因此结核分枝杆菌检测及利福平耐药性探究具有重要临床价值[4-6]。
结核杆菌培养、鉴定要求时间较长，且标本需含有活菌。现药物敏感试验需超过4周时间，未能及时发现、及时治疗结核感染者，进而导致结核病死亡率上升，继发性耐药增强。结核分支杆菌培养及普通PCR技术要求较为严格，操作复杂，限制了在普通实验室中使用。Xpert系统是将巢式PCR与实时荧光PCR相结合的技术，靶基因选利福平耐药相关rpoB基因，按ropB耐药决定区81bp中序列设计5对探针，标记不同荧光基因。在5个探针对应位置MTB野生株扩增出S型曲线，突变株则不能扩增出相应曲线，这样在2小时内即可同时检测MTB与RIF耐药[7-8]。大部分RIF耐药菌株对异烟肼耐药，因此一定程度上RIF可作为耐药结核病的检测指标[9-10]。
本研究结果显示，在100例疑似肺结核患者中，40例培养与涂片显示阳性，占40%；9例涂片显示阴性但培养显示阳性，占9%；6例培养与涂片显示阴性，且符合肺结核诊断标准，占6%；45例无结核病临床证据。经Xpert MTB/RIF检测，培养阳性者敏感度为94.2%，培养阳性、涂片阳性者敏感度为93.7%，培养阳性、涂片阴性敏感度为93.1%，涂片阴性、符合临床标准敏感度为47.6%，非结核者灵敏度为99.3%。49例培养显示阳性标本中，采用比例法测得4株利福平耐药菌，耐药率为8.2%，在经Xpert检测灵敏度为93.9%，特异度为98%。综上所述，Xpert MTB/RIF系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性，具有较高临床应用价值。
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论文作者:葛长化,葛龙,张礼茂
论文发表刊物:《航空军医》2015年17期
论文发表时间:2016/4/26
标签：涂片论文; 结核论文; 阳性论文; 杆菌论文; 分枝论文; 利福平论文; 阴性论文; 《航空军医》2015年17期论文;