（阿克苏地区疾病预防控制中心）
摘要：目的：本文以大黄为原料,研究微波提取总蒽醌最佳条件,提取总蒽醌最优条件后分析总蒽醌的最佳提取率，为研究大黄粉中具体物质的作用提供科学依据。利用单因素实验确定最优微波辐射时间、提取配料比及提取的乙醇浓度，通过正交设计实验和方差分析找到最优条件；用分光分光光度法测定总蒽醌含量算出提取率。
关键词 微波 大黄粉 总蒽醌 分光光度法 单因素实验 正交实验
近几年国内大专院校、科研单位在实验室里用微波技术取得许多成果。[1]微波提取是利用微波能来提高提取率的一种最新发展起来的新技术，其最基本的理论还是以微波穿透性加热的原理为基础，既微波对物料为立体加热，而常规方法大多为平面加热。[2]微波场中各种物料吸收微波的能力的差异使得机体物质某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而是内部产生能量差，被萃取得到做够的动力从体系或机体中分离。
1材料、仪器与试剂
1.1大黄粉（陕西慧科）
1.2仪器设备
MCL-III微波萃取仪（四川大学电子系） ，G-2型恒温加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）， PHS-3C精密PH计（上海安亭昌吉路149号雷磁仪器厂），电子天平（上海精密科学仪器有限公司）， 722N 型可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）， SHZ-D(III)循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。
1.3 试验试剂：
均为分析纯乙醇 ，氢氧化钠(0.01mol/LNaOH、5%NaOH) ，碳酸氢钾（0.1%KHCO3）， PH=9.18的缓冲溶液 ， 硫酸（10%H2SO4）， DDPH，亚甲蓝，双氧水，甲醇，邻苯三酚，氯仿，硫酸亚铁，（涉及到的试剂均为分析纯），二次蒸馏水。
2试验方法
2.1总蒽醌的提取方法
微波：精密称取大黄粉0.1g置于烧杯中，加入10 mL/4滴10%的硫酸，分别对乙醇浓度，料液比，微波时间在微波中进行单因素实验后作正交选出最优提取总蒽醌方案，计算总蒽醌提取率。
2.2总蒽醌标准曲线的绘制
准确称取0.0030g大黄酸标准品，用0.01mol/LNaOH溶解，定容至刻度，摇匀在25ml容量瓶。[3]精密量取标准液1.0mL，1.5mL，2.0mL,2.5mL,3.0ml,3.5mL,分别置于10mL容量瓶中，用0.01mol/LNaOH溶解，定容至刻度，摇匀。在512nm处测吸光度。以吸光度对大黄酸浓度进行线性回归分析。根据总蒽醌不同浓度对A512nm值作出标准曲线，回归方程为： y=19.726x, R2=0.9997 。式中，x为总蒽醌的含量（mg/mL），y为在A512nm下的吸光度。
2.3单因素实验
（1）微波辐射时间、料液比、乙醇浓度对总蒽醌的单因素条件优化
首先准确称取大黄粉0.1g于烧杯中，按料液比为1：100（g/mL）,加入60%浓度的乙醇溶液10mL，加入4滴10%的硫酸。[4]在不同微波辐射时间（5min, 10min, 15min, 20min, 30min）下提取，过滤，用0.1mol/LNaOH定容在25mL的容量瓶中在A512nm测吸光度值。当微波辐射时间超过15min后，总蒽醌的提取率趋于恒定。这是由于微波辐射时间达到一定的程度会导致物料的纤维结构松散，使得总蒽醌进入纤维结构中不易浸出。确定微波辐射时间为15min。
其次，改变料液比（1：40, 1：60, 1：80, 1：100, 1：120）提取，过滤，用0.1mol/LNaOH定容在25mL的容量瓶中在A512nm测吸光度值。
当料液比为1：100（mg/mL）之后，总蒽醌的提取率趋于下降。一般料液比过大会造成溶剂的浪费，且会增加回收成本，故综合考虑应选料液比为1：100（mg/mL）。
最后乙醇浓度（40%,50%, 60%, 70%, 80%）下提取，过滤，用0.1mol/LNaOH定容在25mL的容量瓶中在A512nm测吸光度值。水的极性大，乙醇的极性较小。乙醇的水溶液随乙醇含量的增加极性逐步下降。由于乙醇的溶解性能好，穿透细胞能力强。乙醇浓度对提取效果有一定的影响，当乙醇浓度达到70%后提取率有所下降，最佳乙醇浓度确定为70%。
2.4正交试验
通过单因素试验，选定微波辐射时间、料液比、乙醇浓度等因素进行正交实验设计以确定最佳的提取条件，试验结果见表2.1。
表2.1正交实验因素水平表
表2.2正交实验设计及结果
表2.3方差分析表
3结论
由表2.3分析可以看出，影响总蒽醌的提取效果各因素的主次顺序为C（乙醇浓度），B（料液比），A（微波辐射时间）。经验证确定最优实验条件为A3B1C3，即按1：80（g/mL）的料液比加入80%乙醇溶液，微波辐射为20min，提取为最优。按此条件进行微波辐射提取大黄总蒽醌的提取试验，经过计算得到总蒽醌的提取率为5.21%。找到最优提取条件后方可进行大黄粉中物质如大黄酸和芦荟大黄素及抗氧化性的研究进一步提供科学依据。
参考文献
【1】 李秀才. 大黄的研究进展[J ]. 中国药学杂志,1998 ,33 (10) :581-584.
【2】 郭澄,张纯,邵元福. 大黄蒽醌类成分含量测定方法的探[J ]. 时珍国药研究,1998 ,9 (3) :223-224.
【3】 魏凤玲,齐敏超,钟加胜.大黄蒽醌类成分提取工艺优选[J ].中国中药杂志,1998 ,23(10) :609-611.
【4】 孟洁,杭湖.虎杖提取物的抗氧化活性及稳定性研究[J].中国中药杂志,2000,(8):418-421.
论文作者:荣晓夙,周红亮
论文发表刊物:《医师在线》2018年2月上第3期
论文发表时间:2018/5/7
标签：微波论文; 乙醇论文; 大黄论文; 蒽醌论文; 浓度论文; 正交论文; 光度论文; 《医师在线》2018年2月上第3期论文;