三七丹参复合物对小鼠免疫作用的研究论文_屠馨仪 赵忠芬 杨成海

三七丹参复合物对小鼠免疫作用的研究论文_屠馨仪 赵忠芬 杨成海

文山象鹿喜商贸有限公司 屠馨仪 赵忠芬 杨成海摘要:目的:探讨三七丹参复合物对小鼠免疫力的影响。方法:将SPF级昆明种雌性小鼠200只随机分为5个实验组,每个实验组再随机分为低、中、高剂量(0.33、0.66、2.0g/kg bw)组及对照组。连续给药30天,分别进行迟发型变态反应实验、抗体生成细胞数、小鼠巨噬细胞碳廓清实验、NK细胞活性实验。结果:0.66、2.0g/kg bw剂量组能增加小鼠迟发型变态反应能力,能增加小鼠NK细胞活性,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);3个剂量组对小鼠体重、脾脏/体重比重、胸腺/体重比值、巨噬细胞谈廓清吞噬能力均无明显影响(P>0.05)。结论:三七丹参复合物具有增强免疫力功能的作用。

[关键词]三七;丹参;免疫;小鼠

[中图分类号]R93 [文献标识码]A [文章编号]1439-3768-(2019)-5-ZYM

丹参活血化瘀,养血安神,三七止血化瘀,化瘀而不伤气血。丹参和三七经常配对使用[1]。有较多研究二者配伍对肝病、急性心缺血等方面的研究,本实验研究二者配伍对免疫的影响,为日后研究及应用提供一定的依据。

1 材料与方法

1.1 药物 试食样品为自制,以丹参粉和三七粉以3:1混合制成。

1.2 动物 SPF级昆明种雌性小鼠,由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,体重为19.0-21.9g,实验动物生产许可证号为SCXK(沪)2013-0016。

1.3仪器 动物台秤;分析天平;离心机;氧化碳培养箱;离心机;恒温水浴锅;酶标仪、显微镜等

1.4动物分组与给药方法 试验动物随机分为5组,每组40只,分别进行;小鼠巨噬细胞碳廓清试验;迟发型变态反应试验;脏体比值、抗体生成细胞数测定;ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活测定。5组再随机分为低、中、高剂量组和对照组,每组10只。低、中、高剂量组分别为0.33、0.66、2.0g/kg bw,灌胃体积0.02ml/g BW,对照组给予等体积蒸馏水,连续灌胃30天。

2 方法

2.1 本实验以0.33、0.66、2.0g/kg bw三个剂量经口给予小鼠一个月,进行小鼠细胞免疫功能,单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性测定。方法参照《保健食品检验与评价技术规范》2003版。

2.2 统计学方法 先对数据进行方差齐性检验,若方差齐,采用单因素方差分析进行总体比较,发现差异再用Dunnett-t法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换,满足方差齐性检验后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到方差齐性,则改用秩和检验,发现总体比较有差异,则采用不要求方差齐性的Tamhane’s T2检验进行两两比较,检验水准为α=0.05。

3 结果

3.1 三七丹参复合物对小鼠体重的影响 5组试验小组各剂量组试验初期、试验中期、试验末体重及实验期间体重增长与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

3.2 三七丹参复合物对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响 三七丹参复合物各剂量组对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1

表1小鼠脏器/体重比值测定结果

组别 动物数(只) 胸腺/体重(mg/g) 脾脏/体重(mg/g) 阴性对照组 10 2.14±0.25 5.24±1.16 低剂量组 10 2.16±0.52 5.39±1.42 中剂量组 10 2.15±0.31 6.14±1.23 高剂量组 10 2.22±0.37 5.57±1.12 3.3三七丹参复合物对小鼠小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响 三七丹参复合物低剂量组小鼠足跖肿胀度对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。三七丹参复合物中、高剂量组小鼠足跖肿胀度大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2

表2三七丹参复合物对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

组别 动物数(只) 注射后24h足跖肿胀度 阴性对照组 10 0.529±0.062 低剂量组 10 0.589±0.058 中剂量组 10 0.584±0.098* 高剂量组 10 0.576±0.094* 注:*表示与对照组比较P<0.05

3.4三七丹参复合物对小鼠抗体生成细胞数的影响

对小鼠抗体生成细胞数的影响 三七丹参复合物低、高剂量组小鼠抗体生成细胞数,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。三七丹参复合物高剂量组小鼠抗体生成细胞数增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆见表3

表3 三七丹参复合物对小鼠抗体生成细胞数的影响

组别 动物数

(只) 溶血空斑数(脾细胞/106个)

阴性对照组 10 109±37 低剂量组 10 139±46 中剂量组 10 156±53 高剂量组 10 172±45* 注:*表示与对照组比较P<0.05

3.5 三七丹参复合物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响

对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清的影响 三七丹参复合物各剂量组对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力无明显影响,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表4

表4 三七丹参复合物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响

组别 动物数

(只) 吞噬指数(a)

阴性对照组 10 5.18±1.72 低剂量组 10 5.49±1.55 中剂量组 10 5.63±1.57 高剂量组 10 5.86±1.29 3.6三七丹参复合物对小鼠NK细胞活性的影响 三七丹参复合物低剂量组小鼠NK细胞活性,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。三七丹参复合物中、高剂量组能增加NK细胞活性,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表5

表5 对小鼠NK细胞活性的影响

组别 动物数

(只) 吞噬率/% 吞噬率平方根反正弦转换值 阴性对照组 10 24.2±7.4 29.3±4.7 低剂量组 10 27.0±6.6 31.2±4.3 中剂量组 10 28.3±6.8* 32.0±4.4* 高剂量组 10 29.0±8.9* 32.4±5.6* 注:*表示与对照组比较,P<0.05.

4结论

三七含有丰富的皂苷类物质,三七皂苷可增强MK细胞活性,促进巨噬细胞的吞噬能了、迟发型变态反应[2]。丹参酮具有消炎、抗菌作用,丹参多糖提高单核巨噬细胞的吞噬功能可调节免疫功能[3]。本研究表明三七丹参复合物对细胞免疫、细胞吞噬能力和NK细胞活性有较强的促进作用,具有增强免疫力功能的作用。

参考文献

1.郑琴,彭常春,沈美兰,等.丹参和三七的配伍研究概况[M].中国实验方剂学杂志.2009年2月,15(2):83-86

2.赵鹏,李彬,等.三七皂甙对小鼠免疫功能影响的实验研究[J].中国热带医学.2004年8月,4(4):522-524

3.汤伟、彭求贤、蔡红兵,等.丹参多糖对免疫抑制小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响.时珍国医国药.2011年,22(10):2484-24854

4.中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[M].北京:中华人民共和国卫生部,2003:4.

论文作者:屠馨仪 赵忠芬 杨成海

论文发表刊物:《药物与人》2019年5月

论文发表时间:2019/7/19

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