（上海市黄浦区疾病预防控制中心 上海 200023）
【摘要】目的：利用电感耦合等离子体光谱法同时测定人血清中的钙、铜、铁、镁、锌五种金属元素。方法：采集志愿者血清样品，湿法消化处理，利用电感耦合等离子体光谱法分析血清中的元素。通过标准曲线计算其含量。结果：各测定元素的线性关系良好，相关系数（r）均在0.999以上，钙、铜、铁、镁、锌的检出限分别为2.05ng/mL、9.26ng/mL、0.62ng/mL、0.73ng/mL、0.53ng/mL，相对标准偏差（RSD）分别为0.94%、1.54%、0.26%、0.92%、0.46%；通过对有证标准物质进行检测，各元素检测结果均在证书示值范围内。结论：该方法具有线性范围宽、检出限低，分析效率高、准确、精密度高的特点；适合作为人血清中多种金属元素的含量测定方法。
【关键词】电感耦合等离子体光谱法；血清；必需元素
【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）33-0372-02
Determination of five kinds of essential elements in serum by ICP-OES method
Ding Yu, Cao Yun, Zhou Rui.
Luwan district center for the disease control & prevention ,Shanghai 200023,China
【Abstract】Objective To determinate calcium, copper,iron,magnesium and zinc content in serum by ICP-OES method.Methods Collected the serum samples from volunteers,digested by nitric acid + perchlorate (4 + 1) ,then determinateed those elements content by ICP-OES method.Results The calibration curves showed good linearities in the range of 20.0 ng/mL~3000.0 ng/mL, r were all above 0.999,the detection limit of Ca was 2.05 ng/mL, Cu was 9.26 ng/mL, Fe was 0.62 ng/mL, Mg was 0.73 ng/mL, Zn was 0.53 ng/mL, RSD were Ca 0.94%, Cu 1.54%, Fe 0.26%, Mg 0.92% , Zn 0.46%.Based on the standard material for testing, the results of each element were all in the range of the certificate value. Conclusion This method was convenient, sensitive, accurate, reliable and Suitable for determinating those metals element contentint in serum.
【Key words】ICP-OES;Essential elements;Serum
必需元素是指在维持机体生长发育及生命活动中，具有显著的营养作用和生理功能而不可缺少的元素[1]，其摄入过量、不足、不平衡或缺乏，都会不同程度地引起人体生理的异常或发生疾病[2]。例如钙、铁元素，主要是保证骨骼的生长、维持造血功能、各组织脏器的正常发育[3]；镁是促进骨骼生长，调节神经和肌肉活动的必须元素，人体缺乏镁时，可引起各种症状，包括低钾血症、低钙血症、出血症状和神经症状等；锌能促进儿童生长发育，维持味觉功能正常，增进食欲，促进伤口愈合，提高机体免疫力，有助于大脑发育及智力的提高[4]；铜缺乏可引起，营养不良，毛发褪色，风湿性关节炎[5]，甚至造血功能和代谢功能紊乱[6]。
本文主要是希望利用ICP-OES方法对人血清中多种微量元素进行同时检测，建立一套准确、精密便于操作，提高实验室工作能力和技术水平。
1.材料与方法
1.1 仪器
岛津ICPE-9000等离子电感耦合发射光谱仪、IKA小型控温加热板、离心机。
1.2 试剂
胎牛血清（GIBCO公司，货号10099-141），硝酸（优级纯，国药集团，批号20150515），高氯酸（优级纯，国药集团，批号20150420）。等离子发射光谱分析混合离子标准物质0.010 g/L（GBW(E)060670，批号160423）。本实验用水皆为去离子水。
1.3 ICP测定条件
微型矩管，轴向观测，氩气气压496.00KPa，高频功率1.2KW，等离子体流量10.00L/min，载气流量0.70L/min，辅助气体流量0.60L/min，真空度7.0Pa，曝光时间30s，溶剂清洗10s，样品清洗10s。
1.4 测定方法
1.4.1标准溶液的制备 将等离子发射光谱分析混合离子标准物质0.010g/L（GBW(E)060670），用1%硝酸逐级稀释至20.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL、500.0ng/mL、1000.0ng/mL、2000.0ng/mL标准曲线使用液。考虑到血清中各元素的含量不同及各元素的检出限不同，在测试时针对各元素，选择不同的线性范围。
1.4.2样品采集和处理 采集220名健康志愿者空腹肘前静脉血5mL，静置后待红细胞凝结，3000r/min离心5min，准确吸取血清0.5mL，加入小烧杯中，加入10mL硝酸+高氯酸消化液（4+1），放置过夜。于电热板上160℃消解至透明。用去离子水少量多次洗涤烧杯并转移至10mL比色管中，准确定容至5.0mL，作为待测液，同时做平行对照和样品空白。另外根据血清中不同元素的含量，再进行适当比例的稀释，上机测试。
2.结果与讨论
2.1 标准曲线的绘制及检出限
选择最佳实验效果的各待测元素共振波长，作为检测的波长条件。结果发现，各测定元素在20.0～2000.0ng/mL范围内，线性关系良好，相关系数（r）均在0.999以上；按照检出限公式D=3s/b[7]（式中：s——空白溶液连续测定10次的信号响应值的标准差；b——斜率），得到钙、铜、铁、镁、锌的检出限分别为2.05ng/mL、9.26ng/mL、0.62ng/mL、0.73ng/mL、0.53ng/mL，（表1）。方法的检出限可以满足样品中各待测元素的分析需要。
表1 各元素的标准曲线
3.讨论
ICP-OES虽不及ICP-MS在多种元素分析中检出限低，但是针对人体中含量相对较高的几种必需元素，还是具有较好的适应性。本方法取血量小，稳定性好，回收率高，操作简便，省时省力的优点，适合相关样品的检测分析。
对于健康志愿者的血清分析，结果经统计学处理，钙、镁、锌在不同性别志愿者的血清中含量不存在统计学意义，P>0.05。男性志愿者血铁含量显著高于女性志愿者，血铜含量显著低于女性志愿者，P<0.05，具有统计学意义。提示尽管是处于健康状态的成人，依然不可忽视体内各种金属元素的平衡。男性成年人应注重对铜的膳食补充，多食用含铜较多的食物，如坚果、肉类(特别是内脏)及甲壳类，尤以牡蛎含量最为丰富，另外豆类含铜量也较高。女性成年人则应多食用含铁高的食物，比如蛋黄、菜泥、铁强化食品等，增加动物铁的摄入量(心肝、肾等食物)并辅以水果汁或Vc强化饮料。通过注重饮食营养，调整作息时间，适当有氧锻炼，可以使人体内各元素含量平衡，较好地维护自身健康。
【参考文献】
[1]杨克敌.微量元素与健康[M].北京：科学出版社，2003：1-2.
[2]王颖，郭艳丽，袁洪林，等.凝胶电泳与激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱联用测定蛋白质中微量元素的应用进展[J].光谱学与光谱分析，2012，32(1)：223-228.
[3]卫娟，张秀真.宁夏石嘴山大武口地区儿童血中钙磷铁元素含量测定结果分析[J].中外女性健康研究，2016，2(2)：232-233.
[4]宁亮生.锌与运动[J].中国临床康复2006.36（10）：128-130.
[5]孙长颢.营养与食品卫生学[M].北京：人民卫生出版社，2007，35-51.
[6]韩俊锋.儿童微量元素医学检验的实践分析[J].大家健康2014.8（12）：72.
[7]李昌厚.原子吸收分光光度计仪器及应用[M].北京：科学出版社，2006：26-27.
论文作者:丁宇,曹云,周睿
论文发表刊物:《医药前沿》2017年11月第33期
论文发表时间:2018/1/4
标签：元素论文; 血清论文; 检出论文; 含量论文; 等离子体论文; 电感论文; 标准论文; 《医药前沿》2017年11月第33期论文;