赵会传 余 强（通讯作者）
（湖北省荆州市第一人民医院病理科 湖北 荆州 434000）
【摘 要】本文分析了传统胸腹水细胞学检查方法的不足，详细介绍了临床胸腹水标本的细胞石蜡块制备过程及其中注意事项，认为细胞块技术简单易操作，可较大提高胸腹水中恶性细胞的检出率，具有传统方法不可比拟的巨大优势。
【关键词】细胞块；胸腹水；免疫组化
【中图分类号】R730.2 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）5-0247-02
胸腹水细胞学检查是临床诊断胸腹腔恶性肿瘤或转移癌的重要辅助检查，传统的离心涂片法阳性细胞检出率与技术人员的制片过程密切相关，常常出现涂片厚薄不均，背景污染等影响诊断的情况。日益普及的液基薄层细胞制片技术(TCT）因其操作简便快捷，背景干净明亮，可以在很大程度上消除人为因素的影响，但由于胸腹水中的间皮细胞形态多样，细胞学制片无法有效观察组织的排列结构，尤其是增生的间皮细胞，与肿瘤细胞难以鉴别，导致漏诊率较高。我们利用胸腹水离心沉淀所得细胞沉渣，应用组织学制片方法，制作细胞石蜡块，经常规切片染色，可获得与组织学切片相似的细胞切片，并可进一步做免疫组织化学检查，大大提高诊断的准确率，现分析如下：
1 材料与方法
1.1材料 选取2014年本院及部分外院送检胸腹水标本，经TCT制片筛选，判断为癌细胞可疑的总计97例，其中胸水69例，腹水28例。患者中男性50例，女性47例，年龄从13岁至84岁，平均年龄59.67岁。
1.2方法 取胸腹水200ml以上，分多根试管放置于离心机中以1500转/分匀速离心10-15分钟，若标本量多，可用玻璃容器盛放静置十分钟，弃一半上清液再离心。若胸腹水含血性成分较多，可在试管中加入适量红细胞破坏液（如50%乙醇等）， 振荡摇匀后再离心。离心完成后弃上清，试管中加入10%中性福尔马林再次离心5分钟，此时细胞沉渣凝固成块状，弃上清，将细胞沉渣用吸管吸出，可用TCT细胞保存液反复冲洗试管，最大程度吸取细胞沉淀物。将所得细胞沉渣用滤纸包好，放于组织包埋盒，固定4-8小时，常规脱水，透明，浸蜡，石蜡包埋，制得细胞石蜡块即可按常规切片，HE染色，镜检。对不能确定来源的恶性肿瘤细胞，可进一步行免疫组化检查。
2 结果
经细胞块技术制片检查，97例胸腹水标本中可确诊为恶性肿瘤胸腹腔转移的有65例，经免疫组化检查能确定来源的有41例，其中来源于肺的21例，来源于卵巢的9例，来源于乳腺的1例，来源于胃肠的2例，来源于胆管细胞的1例，间皮瘤2例，淋巴瘤5例，以上确诊为恶性肿瘤的病例，经追踪调查，16例进行了手术治疗，手术标本行组织学检查与细胞块诊断相符的有13例，诊断符合率81.25%。（见下表）
表一胸腹水总体分析
3 讨论
胸腹水中查找肿瘤细胞是细胞病理学检查的主要项目之一，它具有简便快捷，病人痛苦轻等优点，深受广大临床医师的欢迎，但因制片过程中许多人为因素的影响，其阳性细胞检出率一直不高，离心涂片法和液基薄层细胞技术制出的细胞片所获细胞量均较少，且细胞散在排列，没有正常的组织学结构形态，给肿瘤细胞的鉴别带来许多困难。细胞块技术应用于细胞学检查的文献报道已有多年，开始是利用胸腹水离心沉淀制作石蜡块，近年来亦有报道在尿液，针吸穿刺细胞冲洗液，宫颈TCT等标本中应用细胞块技术获得满意效果[1-3]。与传统涂片及TCT相比，细胞块具有四方面的优势：1细胞石蜡块所获得的细胞量较多，通过固定凝集或支架物网罗吸附，它可收集材料中几乎全部细胞。2石蜡切片中细胞形态为平面形态，而不是涂片中三维立体结构，不会出现厚薄不一，细胞堆积的现象，且细胞块可连续切片，有利于观察细胞形态的变化。3石蜡切片中可见部分组织学结构，这对肿瘤细胞的分类及来源判断意义较大。4细胞块石蜡切片可进一步行免疫组化检查，定位较涂片准确，切片便于保存，有利于多张切片的比较。
细胞块石蜡切片与传统制片相比具有较大优势，但在胸腹水细胞块的制备中，应充分注意以下几个方面的问题，才能获得满意的细胞石蜡切片：1标本的处理时间：原则上胸腹水标本越新鲜越好，在30分钟内即行TCT制片及细胞块制作效果较好，若送检超过1小时再处理，则对诊断结果影响较大[4]。我们建议对临床高度怀疑恶性胸腹腔积液的病例，可TCT制片及细胞块制作同时进行，若标本处理有困难，可临时放置于4℃冰箱。虽然细胞块技术在诊断胸腹腔恶性肿瘤方面有较大优势，但阳性细胞检出率各家报道有较大差异[5]。我们认为细胞块技术的规范化制作可减少人为误差，提高阳性细胞检出率。2血性胸腹水的处理：临床如送检血性胸腹水应高度警惕恶性肿瘤的可能，但因其含较多的红细胞，对材料的处理及诊断均带来较大困难，传统方法是标本中加入蒸馏水，酒精等低渗溶液破坏红细胞，我们经比较发现，应用含冰醋酸的溶液可有效破坏红细胞，且不会对标本中的其他细胞成分造成严重影响，这与一些文献报道结果相符[6]。3细胞的收集方法：目前文献报道较多的有离心固定沉淀法，琼脂吸附法，血浆凝固法等，各种方法均有优缺点，在基层医院开展细胞块技术应做到方法简便易行，材料易得，花费较小。我们推荐胸腹水直接离心固定沉降，虽然此方法无法应用于少量胸腹水的细胞块制备，但如果标本量过少，则会给后期诊断带来较大难度，亦会增加漏诊率。4固定液的选择：细胞块制备过程中标本离心后应立即固定，大多数医院均采用10%中性福尔马林固定液固定标本，这是因为后期制片及免疫组化中此种固定液可取得满意效果。但我们在实践中发现，经10%中性福尔马林固定的细胞块标本其凝固成块状的时间相对较长，如果固定不充分，则细胞沉渣呈松散的泥沙样，不利于制片。在离心完成后加入20%的冰醋酸酒精溶液可使细胞沉渣较快凝集成块，缩短固定及制片时间。
从以上分析可以看出，在胸腹水细胞学检查中可大量开展细胞石蜡块制备技术，此项技术方法简便易行，病人花费少，阳性细胞检出率高，可以弥补传统涂片及TCT制片法的不足，后期行免疫组织化学检查，对确定恶性肿瘤的来源及预后有重要意义。
参考文献：
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作者简介：
赵会传，荆州市第一人民医院病理科主治医师，长期从事临床病理诊断及研究工作，邮箱：675400822@qq.com
通讯作者：
余强 工作单位：荆州市第一人民医院
论文作者:赵会传,余强（通讯作者）
论文发表刊物:《河南中医》2015年5月供稿
论文发表时间:2015/10/14
标签：细胞论文; 胸腹论文; 石蜡论文; 制片论文; 切片论文; 涂片论文; 标本论文; 《河南中医》2015年5月供稿论文;