黑龙江中医药大学研究生学院
摘要：目的 观察“冠心宁注射液”对骨保护素（OPG）及核因子-κB受体活化因子配基（RANKL）mRNA表达的影响，探讨其治疗股骨头坏死的作用机制及效果。方法 小白鼠90只，随机分为2组，即：正常组（30只）、试验组（60只）。试验组行液氮冷冻股骨头坏死动物模型复制。3周后检测OPG/RANKL的mRNA表达水平，计算出OPG/RANKL比值。结果 血清OPG/RANKL 检测结果试验组与对照组比较，OPG水平较正常组增高，RANKL较正常组减低，OPG/RANKL比值增高，较正常组有明显的差异，差异有统计学意义，（P<O．O5）结论 “冠心宁注射液”通过调节OPG、OPG/RANKL水平来抑制破骨细胞活性。
关键词：冠心宁注射液；关节腔灌注；股骨头；骨坏死；OPG；RANKL
股骨头缺血性坏死（INFH）是目前骨科临床常见的疾病，多见于青中年[1]。祖国医学称之为“骨痹”等，又称不死的癌症。患者大部分存在不同程度的疼痛、活动受限等障碍，使其劳动力丧失、经济负担加重，给家庭及社会带来沉重的负担。迄今为止，临床对股骨头缺血性坏死尚无特效治疗方法，多数患者不得不接受人工全髋关节置换术。非创伤性股骨头坏死早期是目前认为保存患者自身关节治疗的最佳时期[2]，寻找股骨头缺血性坏死非手术治疗的有效方法，是治疗股骨头缺血性坏死治疗的方向[3]。本试验采用髋关节腔内注射药物，直接作用患处促进软骨再生和增加血运，促进骨的爬行替代，加速患处的愈合，具有疗程短、疗效高等很多优点。同时关节腔内穿刺给药操作简单、微创、痛苦少，因此易于被大多数患者接受[4]，“冠心宁注射液”通过关节腔内灌注给药，本实验选择进展期股骨头坏死再生为研究对象，旨在探讨“冠心宁注射液”对OPG及RANKL的影响，以明确其对于治疗股骨头坏死疾病的作用机制。现将结果报告如下：
1 材料与方法
1、1.1 动物分组和造模 小白鼠90只。随机分为2组，即：正常组（30只）、试验组（60只）。试验组行液氮冷冻股骨头坏死动物模型复制。再用抽签法随机分为2组：对照组及试验组30只动物。
1.2 药物的制备及用量：“冠心宁注射液”。实验动物给药剂量（ml）=人的给药剂量（ml）*（小白鼠的体形系数/人的体形系数）*（人的平均体重/实验动物平均体重）2/3≈0.06966ml，若计算损耗基本可定为0.07ml。
1.3 血清OPG/RANKL 检测 采用实时荧光定量PCR仪检测小白鼠骨组织中OPG和RANKL的mRNA表达水平。
1.4 干预方法：正常组正常喂养，不给予任何药物治疗。对照组给予0.9%生理盐水0.07ml/次，每三日一次髋关节灌注。试验组给予“冠心宁注射液”每三日一次髋关节灌注0.07ml/次。造模组术后2周后开始分组治疗，各组按1周、3周、6周、9周、12周时间点分批处死动物，每批每组处死6只，进行检测。
1.5 统计学处理 采用SPSS19.0统计软件，全部试验数据均以均数 标准差表示，3组均数统计学处理采用LSD-t检验，P<0.05示具有统计学意义。
2 结果
3 讨论
骨保护素（OPG）又称破骨细胞分化抑制因子（OCIF），核因子κB受体活化因子配基（RANKL），也称破骨细胞分化因子，是对破骨细胞的分化成熟、增殖、活性起着重要作用的一对调节因子，[5]OPG具有抑制骨吸收的功能[6]，RANKL具有诱导破骨细胞成熟，促进骨吸收的作用。作为OPG/RANK/RANKL系统成员之一，OPG在体外抑制破骨细胞的前体细胞分化、存活、融合，同时还能起到阻止成熟破骨细胞的活化并引起破骨细胞凋亡的作用[7][8]。OPG是一种可溶性的诱饵受体，它的作用是中和或结合可溶性的OPG配基及成骨细胞、基质细胞结合的RANKL，和其他TNF配体的家族成员（TRANKL），竞争性地拮抗细胞核因子-κB受体活化因子（RANK）和RANKL的结合。RANK与RANKL结合后，可以刺激破骨细胞前体细胞的分化、融合和存活，同时可以活化为成熟破骨细胞[8]OPG/RANK/RANKL组成了OC的三角关系调控系统，在骨组织的动态骨重建过程中，OPG/RANK/RANKL系统是调控骨形成和骨吸收过程中最重要的分子系统之一[9]。本研究发现股骨头坏死发生，引起血清OPG、OPG/RANKL水平下降。中药“冠心宁注射液”可通过调节破骨细胞分化调控因子OPG、RANKL的表达，来实现对破骨细胞的抑制作用而达到“活骨”的作用。髋关节腔内注射药物可直接发挥作用，促进软骨再生和增加血运促进骨的爬行替代加速愈合。试验组的血清OPG、OPG/RANKL水平均高于对比组，提示“冠心宁注射液”通过调节OPG、OPG/RANKL水平来抑制破骨细胞活性，促进成骨。
参考文献：
[1]Chamberlain JR，Schwarze U，Wang PR，et al.Gene targeting instem cells from individuals with osteogenesis imperfecta.Science.2004；303（5661）：1198-1201.
[2]吴亚东 齐晓艳，中药配合手术治疗塌陷前期非创伤性股骨头坏死的临床研究[J]，中国中医骨伤科杂志，2O14。22（8），30.
[3]王胜军，赵文海.中医药治疗股骨头缺血性坏死临床研究[J].长春中医药大学学报。2008.24（8）。402.
[4]贾全章 姜洪和 张承敏 郑 军• 邓福树，中药治疗早期股骨头缺血性坏死的临床研究，中医正骨1999.11.11
[5]Kim H K，M0rgan—BagIey S，Kostenuik P．Rankl inhibition：anovel strategy to decrease femoral head deformity after ischemicosteonecrnsls[J]．J Bone MinerRes，2006，21（12）：1946—1954．
[6]Schoppet M，Preissner K T，Hofbauer L C．Rank ligand andosteoprotegerin：paracrine regulators of bone metabolism and vascu]arfunction[J]．Arterioscler Thromb Vasc Biol，2002，22（4）：549—553．
[7]SAKAI D，NAKAMURA Y，NAKAI T，et a1．Exhaustion of nu—dens pulposus progenitor cells with ageing and degeneration of theintervertebral disc[J]．Nat Commun，2012，3：1264．
[8]熊晓芊，邵增务，裴洪，等．可控轴向压力致兔腰椎间盘退变模型的建立及评价[J]． 中国病理生理杂志，2008，24（10）：2077—2080．
[9]刘继中，纪宗玲，陈苏民，等．OPG／RANKL／RANK系统与骨破坏性疾病[J]．生物工程学报，2003；19（6）：655-60．
论文作者:李晓丰,张晓峰
论文发表刊物:《健康世界》2015年21期
论文发表时间:2016/3/9
标签：注射液论文; 细胞论文; 因子论文; 缺血性论文; 关节论文; 股骨头论文; 作用论文; 《健康世界》2015年21期论文;