(广东省湛江中心人民医院检验科,广东湛江 524037)
林伟华:通讯作者,主任技师,13729187868@139.com,(一定保留通讯作者)
[摘要] 目的 探讨三种因素对凝血因子活性测定的可靠性分析。方法 采用不同稀释剂、不同盐离子浓度制品和校准品不同复溶时间对凝血因子V、VII、VIII、IX活性测定的分析。 结果 生理盐水、纯水及配套稀释液对因子V、VII、VIII活性有显著性差异(P<0.01);含1mol/L氯化钠的样品中因子V、VIII活性显著低于含0.25mol/L氯化钠的样品(P<0.05),VII、IX无显著性差异(P>0.05);4小时、24小时测定校准品时V、VII、VIII、IX活性有显著性差异(P<0.01)。 结论 三种因素对凝血因子活性测定有影响,应正确严格按照凝血因子活性测定的条件,保证检测结果具有最佳的准确性和可靠性。
[关键词] 凝血因子V、VII、VIII、IX;凝血因子活性(FV:C、FVII:C、FVIII:C、FIX:C);盐离子浓度;稀释剂;校准品
凝血因子活性检测操作要求严格、结果会受到许多因素的影响,常见有稀释剂、盐离子浓度和不断复溶校准品等,凝血因子活性的准确测定对校准品质量控制及临床疗效研究具有重要意义,现就可靠性分析如下。
1 材料和方法
1.1 试剂 法国STA-R型凝血分析仪配套试剂,STA-Deficient V 、STA-Deficient VII、STA-Deficient VIII、STA-Deficient IX;STA-Caphascreen, STA-Owren-Koller, STA-CaCl20.025M,NaCl 1M,STA-System Control 。
1.2 仪器 法国STA-R Compact血凝分析仪。
1.4 方法
1.4.1 凝固法,用%为单位报告,严格按项目操作要求进行检测。
1.4.2 分别采用稀释剂纯水、生理盐水、配套稀释液稀释标准品进行检测。
1.4.3 分别采用氯化钠浓度为1mol/L、0.5mol/L 、0.25mol/L对校准品进行检测。
1.4.4 分别在溶解校准品后,取1份4小时内进行检测,另1份置2-80C保存24小时再进行检测。
1.5 统计学处理
采用t检验进行差异显著性检验,以0.05和0.01作为显著性水平。
2结果
参考值:60-150%。检测上限:200%,下限:1.5%。 结果见表1,2,3
从表3可以出看出,再次复溶标准品后,4种凝血因子活性都降低,只有FV:C测定值无显著性差异(P>0.05),FVII:C 、FVIII:C 与FIX:C测定值差异显著(P<0.01)。
3 讨论
外源性凝血系统凝血因子是反映血浆中凝血酶原及因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平,内源性凝血系统是反映血浆中Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子的水平,是较为敏感的指标和常用的筛选实验 [1] 。
在测定外因子时,采用纯水或者配套稀释进行检测,不同的稀释处理会影响因子活性检测的准确性,且差异显著[3]。对于FIX:C检测,采用纯水、生理盐水及配套稀释液进行检测,其结果无显著性差异。
NaCl 浓度对凝血因子活性的影响具有重要意义[4],通过上述结果可得,较高浓度盐溶液会使凝血四种因子活性降低,但是在检测的过程中,FIV和FIX在0.25mol/L NaCl盐离子浓度下因子活性反而低于0.5mol/L NaCl及1mol/L NaCl,但无显著性差异。
在实际检测中,为了节约校准品的用量,尝试将溶解的标准品分成二份,一份及时检测,另一份置2-80C保存第二天再进行检测,4种因子都降低,FV无显著性差异,其他因子均有显著性差异。
要杜绝该误差就必须加强培训,制定标准化的操作规范[5]。STA—R型凝血分析仪自动吸样,我们的实验数据表明,相比无显著性差异外,其他均有统计学意义,此实验数据与王氏报道相符[6]。凝血因子测定的重复性不理想,操作人员不规范,从而引起系统性的误差。
综上所述,影响凝血因子检测的因素很多,所以检验人员在检测的全过程中必须注意,严格按操作规范,保证检测结果具有最好的可靠性和准确性。
参考文献
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[2] 叶应妩,王毓,申子瑜,等.全国临床检验操作规程[M].第3版,南京:东南大学出版社,2006: 211-223.
[3] 田倩,曹海军,曹雅,等.人凝血酶原复合物中凝血因子活性测定的影响因素研究[J].中国生化药物杂志,2014,34(2)17-19.
[4] 沈永才,王锐利,舒颖,等.影响凝血酶原复合物制备的几种因素[J].中国预防医学杂志,2014,9(10)921-923.
[5] 朱忠勇.凝血功能测定标准化[J].中华医学检验杂志,2012,21(5),308.
[6] 王远杰,刘家瑞.凝血实验结果的影响[J].中国输血杂志,2014,14(6)376.
论文作者:陈华英 林伟华,洪流 许景宁 高发平
论文发表刊物:《医师在线》2017年10月上第19期
论文发表时间:2017/12/22
标签:因子论文; 凝血论文; 活性论文; 差异论文; 浓度论文; 凝血酶原论文; 稀释液论文; 《医师在线》2017年10月上第19期论文;