（四川医科大学附一院呼吸内一科 646000）
【摘 要】目的：探讨信必可及联合孟鲁司特对小鼠慢性哮喘模型气道重塑的调控作用及可能机制。方法：50只C57bL/6小鼠随机分成对照组，哮喘组，信必可组，孟鲁司特组组，信必可联合孟鲁司特组，每组10只。观察肺组织病理改变，计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞数等指标。结果：组间比较，联合用药组抑制气道重塑作用显著肺组织中IL-6、TGF-β1升高（P<0.05），T-AOC含量显著减少（P<0.05）。结论：信必可及孟鲁司特均能够抑制哮喘小鼠气道重塑，其机制可能与抑制IL-6、TGF-β1的表达，增加抗氧化能力有关。
【关键词】哮喘；气道重塑；T-AOC
【中图分类号】R562.25 【文献标识码】A 【文章编号】1004-6194（2015）02-0030-02
Effects of combining Budesonide/Formoterol with
Montelukast on the airway remodeling of asthma in rats.
Deng jun, Jin ming zhe, liang yu jia，Liu chun feng,Xiong ying, Wang song ping.
（Department one of Respiratory Medicine，The Affiliated Hospital of Luzhou Medical college，Luzhou 646000 ，China）. Corresponding author：WANG song ping
【Abstract】Objective：To evaluate the Effects of combining Budesonide/Formoterol with Montelukast on the airway remodeling of asthma in rats and its possible mechanism. Methods：50 C57bL/6 mice were randomly divided into the control group, the asthma group, the letter must be set, and the group of the group of 10 rats in each group. The pathological changes of lung tissue were observed, and the number of cells in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was counted. Result：In group comparison, IL-6 and beta 1 (P<0.05) and T-AOC (P<0.05) were significantly decreased in the combined treatment group (TGF-). Conclusion：Both Budesonide/Formoterol and Montelukast could inhibit the airway remodeling of the asthma mice，which maybe associated with decreased the expression of IL-6、TGF-β1 and elevation of T-AOC.
【Key words】asthma; IL-6; TGF-β1；T-AOC
支气管哮喘是由多种细胞和多种细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾病[1]，为此，我们采用通过卵清蛋白法复制慢性哮喘模型，观察信必可及孟鲁司特对TGF-β1、IL-6和T-AOC的表达，探讨其对哮喘气道重塑的影响及相关机制，为治疗哮喘提供部分实验依据。
1 材料与方法
1.1 动物分组及模型复制
清洁级雌性C57bL/6小鼠50只，体重17～20g，，随机分为对照组（A组）、哮喘组（B组）、信必可组（C组）孟鲁司特组（D组）、信必可联合孟鲁司特组（E组），每组10只。复制模型，并稍做改进，模型组于第0和14天腹腔注射致敏液0.2mL，致敏后第24天开始每天雾化吸入2.5％OVA 35 min，持续30天；信必可组造模同模型组，每次激发前0.5小时雾化吸入信必可一喷；孟鲁司特组造模同模型组，每次激发前0.5小时予以孟鲁司特孟鲁司特灌胃；对照组以0.9%氯化钠溶液雾化吸入和蒸馏水1ml灌胃[2,3]。
1.2 标本收集及细胞计数
末次激发24小时后处死小鼠，结扎右侧肺门，左侧肺缓慢注入磷酸盐平衡溶液（PBS）1ml进行灌洗，反复注入回抽3次，回收量＞80%，-4℃储存。然后分离出右肺，置于新鲜配制的10％中性甲醛固定，作病理分析。将回收的部分肺泡灌洗液（BALF）离心，行刘氏染色分类计数细胞。
1.3 肺组织中细胞因子测定
采用双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-6和TGF-β1的浓度；总抗氧化能力检测试剂试剂盒测定总抗氧化能力（T-AOC），具体操作按照试剂盒说明书进行。
1.4统计学处理
采用SPSS17.0进行分析，数据用均数±标准差表示，组间比较采用F检验及方差分析、两两比较法（SNK法），以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 BALF中细胞计数
模型组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、多型核白细胞、中性粒细胞分类计数较与对照组明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；经干预后与模型组相比，孟鲁司特组、信必可组、信必可联合孟鲁司特组BALF中细胞分类计数明显下降，差异有统计学意义（P均<0.05），但以联合组效果显著（P<0.05）。表1。
2.2肺组织形态学分析
干预组间比较显示，联合用药组降低明显（P＜0.05）。如表1所示。
注*与正常对照组比较P<0.05；△与模型组比较P<0.05；※与联合用药组比较P<0.05
3 讨论
本研究采用OVA作为变应原制作哮喘模型。结果显示，模型组小鼠在激发后出现烦躁不安、喷嚏、流涕、呼吸急促、大小便失禁，甚至出现俯伏不动，肺组织病理显示支气管管腔狭窄，支气管粘膜上皮明显脱落，气道平滑肌增厚，管腔周围可见以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主的炎性细胞浸润，管壁及血管周围胶原沉积明显增多，提示哮喘小鼠模型构建成功。
TGF-β1是哮喘气道重塑的负性调节因子，可抑制B细胞、肥大细胞和嗜酸性粒细胞、树突状细胞等多种炎症细胞的功能。本研究显示，经过信必可及孟鲁司特干预后，各组气道炎症、气道胶原沉积和肺组织中IL-6、TGF-β1表达明显降低，T-AOC显著升高。但经组间比较，差异具有显著性（P<0.05），说明不同的干预措施的疗效不同，信必可联合孟鲁司特组抑制作用更加明显，可显著抑制气道炎症细胞聚集、细胞因子释放，这就提示信必可及孟鲁司特均可抑制哮喘气道重塑，其机制可能与抑制IL-6、TGF-β1的表达，提高抗氧化能力有关，且联合应用可能具有协同作用。
参考文献：
[1]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南[J].中华结核 和呼吸杂志，2008；31（3）:177-185
[2]Makinde T, Murphy RF, Agrawal DK. The regulatory role of TGF-beta in airway remodeling in asthma.Immunol Cell Biol, 2007, 85:348-356.
[3]沈华浩,王绍斌.布地奈德干预对卵白蛋白致敏小鼠抗原激发后气道炎症及气道重塑的影响[J].中华结核和呼吸杂志,2005,28(3):154-159.
通讯作者：
王宋平
论文作者:邓俊,金明哲,梁宇佳,刘春凤,熊瑛,王宋平
论文发表刊物:《中国慢性病预防与控制》2015年8月第2期供稿
论文发表时间:2016/3/18
标签：哮喘论文; 气道论文; 小鼠论文; 细胞论文; 模型论文; 必可论文; 抑制论文; 《中国慢性病预防与控制》2015年8月第2期供稿论文;