益阳市中心医院病理科 湖南益阳 413000
【摘 要】目的：研究探讨细胞块切片联合免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用及效果。方法：选取2015年2月～2016年2月我院收治的90例胸腔积液门诊患者并随机分组，实验组患者采用细胞块切片联合免疫组化染色方法，对照组采取常规细胞涂片法，观察两组患者的阳性率以及疾病诊断的相关指标，并比较。结果：实验组细胞块切片联合免疫组化染色法检出的阳性率为100%，对照组常规细胞涂片法检出的阳性率为55.6%，实验组的阳性率明显高于对照组，经SPSS17.0软件分析得P＜0.05，即存在统计学意义。另外观察染色结果显示肺腺癌细胞中CEA和CK7的表达较高，证明这两种抗体是该细胞的特异性抗体；间皮瘤细胞中WT-1、Calretinin、Desmin以及CK5/6的表达较高，证明这4种抗体是该细胞的特异性抗体。结论：细胞块切片联合免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中有很高的应用价值，为临床诊断肺腺癌和间皮瘤提供了可靠的依据，值得在临床上广泛推广。
【关键词】细胞块切片；免疫组化染色；胸腔积液；病理诊断
胸腔内的积液主要来源于肺腺癌和间皮瘤，因此可以作为诊断两种疾病的依据，临床传统诊断方法是细胞涂片法，但该方法不能很好地区分肺腺癌和间皮瘤两种疾病，这给诊断工作带来了很大的麻烦[1]。近年来随着医学人员的深入研究发现，细胞块切片与免疫组化染色联合应用能很好地区分这两种疾病，具有很高的灵敏度且诊断准确率较高，为临床诊断提供了可靠的依据，现报道如下。
1资料与方法
1.1临床资料
选取2015年2月～2016年2月我院收治的90例胸腔积液的门诊患者，将患者随机分为实验组和对照组，实验组：男性患者27例，女性患者18例；年龄18～73岁，平均年龄（41.7±8.2）岁。对照组：男性患者24例，女性患者21例；年龄17～77岁，平均年龄（43.1±7.4）岁，观察两组患者的一般资料没有明显区别，经SPSS17.0分析数据P＞0.05，即不存在统计学意义。
1.2纳入标准
①患者没有严重的肝病、心肺疾病②所有患者均符合胸腔积液的诊断标准
③进行研究前均取得患者的同意并签署保证书④患者没有精神病或精神病史。
1.3方法
1.3.1制备标本
由专业医护人员采集患者处于空腹状态下的胸腔积液，共采集100 ml，将其平均分装于4个试管，每管25ml，在2500 r/min的条件下离心13min，弃上清液后取部分沉淀进行常规细胞涂片；向剩余的沉淀中加入3ml戊二醛进行固定[2]，在2500 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将剩余的沉淀用滤纸包好进行脱水，石蜡包埋切片后分别用HE染色和免疫组化染色。
1.3.2 HE染色
所有实验的操作过程均由专业的医生进行，根据送检标本的细胞形态、黏附性以及核不典型性来判断结果，具体标准如下：良性：是指实验结果出现了反应性增生间皮细胞，细胞有较好的弥散性，细胞核没有不典型性且细胞形态比较温和；恶性：细胞成团生长，核具有明显的不典型性，细胞形态严重不温和；不确定：细胞弥散，核的不典型性处于恶性与良性之间[3]。
1.3.3免疫组化染色
采用Maxvision快捷S-P法进行染色，Maxvision试剂盒（购买于福州迈新生物技术开发有限公司）和DAB显色试剂盒（购买于北京索莱宝科技有限公司），另外选择CEA、CK7、WT-l、Desmin、CK5/6以及Calretinin6种抗体检测两种细胞，染色过程中严格按照试剂盒说明书进行。
1.4判断标准
通过以下现象判断：CEA和CK7在细胞浆或细胞膜上出现黄色则为阳性；WT-1使细胞核呈现棕黄色颗粒表示为阳性；Calretinin在细胞浆、细胞核和细胞膜呈现棕黄色为阳性[4]；另外间皮细胞或肺腺癌细胞占总数的10%以上，则诊断为阳性。
1.5检测方法
运用SPSS17.0软件处理试验中得到的数据，试验中记录患者的所有数据用（x±S）方式表示并进行t检验和χ2检验，只有P＜0.05时才具有统计学意义。
2结果
2.1两组阳性率比较
对照组常规细胞涂片法检出阳性25例，阴性20例，阳性率为55.6%；实验组细胞块切片联合免疫组化染色法检出阳性45例，阴性0例，阳性率为100.0%，详情见表1。
3讨论
近年来，由于中国的经济水平和科学技术快速发展，人们的生活水平有了很大提高，因此人们更加关注自己的健康问题，而环境卫生、社会压力带来的健康隐患使得胸部肿瘤出现的概率越来越高，严重影响了患者的心理和生理健康[5]，并给患者带来了沉重的经济压力。胸腔积液作为胸部肿瘤最常见的并发症，由于从胸腔积液中能很方便地采集样本细胞，且制备过程比较容易，因此引起了医学研究人员的广泛关注。
胸腔积液会使患者的间皮细胞和肿瘤细胞浸泡于其中，若长期受到刺激会导致两种细胞的生理形态发生改变，采用常规检测方法很难将两种细胞区分开来，这给临床诊断带来了很大的难题[6]。传统对患者进行诊断的方法是细胞涂片法，但由于两种细胞的形态结构很相似，而细胞涂片法的灵敏度较低且准确度不高，尤其不能准确地诊断胸腔积液患者。近年来随着医学研究的深入，医学人员提出对胸腔积液患者进行诊断时，可以将细胞块切片与免疫组化染色联合应用，能显著提高诊断率[7]。细胞块切片免疫组化染色法是指用体外标记的特异性抗体来检测细胞内的未知抗原，通过抗原抗体的特异性反应以及酶产生的显色反应来检测细胞的活性以及分布情况。该方法能准确判断阳性物质的位置且具有很高的特异性，另外操作过程相对简单并且弥补了细胞涂片法的不足，不会使样本细胞受到损害，从而保证了细胞的完整性。
本次研究选取了90例胸腔积液门诊患者并采用两种方法进行诊断，发现用6种抗体进行的免疫组化染色法的实验组显示CEA和CK7是腺癌细胞的特异性抗体，而WT-1和Calretinin、Desmin和CK5/6是间皮性肿瘤细胞的特异性抗体，该方法能显著提高诊断胸腔积液的阳性率，该实验结果与李中祥[8]等学者的研究结论一致。
综上所述，细胞块切片联合免疫组化染色法对胸腔积液病理诊断的准确率较高，能准确地诊断胸腔积液患者，值得广泛推广。
参考文献：
[1]侯刚，尹燕，韩丹，等.胸腔积液脱落细胞免疫组化染色对肿瘤来源鉴别诊断价值的探讨[J].中华肿瘤防治杂志，2012，19（21）：1647-1648.
[2]唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等.胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理诊断价值[J].第三军医大学学报，2012，34（15）：1568-1569.
[3]斯向东，李庆.细胞块切片及免疫组化在恶性浆膜腔积液诊断中的应用体会[J].中国现代医生，2012，49（28）：114-115.
[4]谢深科，舒千玉，姚军，等.细胞块免疫标记在胸腹水细胞病理诊断与鉴别诊断中的价值[J].中国医疗前沿，2012，6（4）：73-74.
[5]尚士宣，赵晓丹，肖月英.细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学诊断中的应用[J].肿瘤基础与临床，2010，23（6）：514-515.
[6]杨红敏，李振芬.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值[J].中外医疗，2014，1（57）：179-181.
[7]余卫东，蔡育波，刘琼茄，等.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用[J].中国现代医生，2014，52（12）：127-129.
[8]李中祥.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值[J].河南医学研究，2015，24（4）：88-89.
论文作者:戴中江
论文发表刊物:《航空军医》2017年第1期
论文发表时间:2017/2/24
标签：细胞论文; 胸腔论文; 免疫论文; 患者论文; 切片论文; 积液论文; 阳性论文; 《航空军医》2017年第1期论文;