新疆和田地区维吾尔医医院 848000
【摘 要】复发性口腔溃疡（Recurrent Oral Ulcer，ROU），又称“复发性口疮”、“复发性阿弗他溃疡”（Recurrent Aphthous Ulcer，RAU）或“复发性阿弗他口炎”（Recurrent Aphthous Stomatitis，RAS），是专指一类原因不明，具有周期性反复发作但又具自限性的局限性口腔粘膜溃疡性损伤。相关的文献研究表明，在慢性胃癌病患者口腔牙菌斑、唾液中以及胃内能同事检测出幽门螺旋菌（Helicobacter pylori，HP），而伴有HP感染的复发性口腔溃疡（recurrent oral ulcer，ROU）患者的消化道疾病的发病率也明显上升，提示口腔为Hp重要的聚集地之一，Hp感染与ROU发病之间可能存在一定的内在联系。
【关键词】复发性；溃疡；微生态
材料和方法
一、唾液菌群涂片观察收集临床唾液标本共62例。将其分为溃疡组、愈合组及正常对照组三组。溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的20例ROU患者，其中男性6例，女性14例，平均年龄24.7±3.13岁；愈合组为临床确诊并处于愈合期的21例ROU患者，其中男性9例，女性12例，平均年龄25.9±6.67岁；对照组为无ROU病史的21位健康成年人，其中男性9例，女性12例，平均年龄23.3±2.27岁。所有受试者均符合以下纳入标准：所有受检查者取样前1周内未服用任何抗生素、铋剂、抗酸剂及H_2受体拮抗剂，1月内未服用类固醇药物或非类固醇类抗炎药，如阿司匹林等；无其他系统疾病；无其他口腔黏膜病：无中、重度牙周病。方法：唾液标本直接涂片，革兰氏染色，在显微镜10×100油镜下，选取分布均匀的5个视野，分别计数各视野下细菌中革兰氏阳性球菌（简称G~+c）、革兰氏阴性球菌（简称G~-c）、革兰氏阳性杆菌（简称G~+b）、革兰氏阴性杆菌（简称G~-b）所占的构成比，然后求其均值。分析了不同菌群间的比值及构成比的变化。统计学分析：用SPSS13.0统计学软件，对不同组别四类细菌的构成比及不同菌群间的比值采用单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Dunnett T3法进行两两比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。二、复发性口腔溃疡口腔唾液中链球菌、韦荣氏菌及奈瑟氏菌的定量分析收集符合纳入标准的临床标本，共95例。纳入标准参考第一章。将其分为溃疡组、愈合组及正常对照组三组。溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的39例ROU患者，其中男性13例，女性26例，平均年龄26.3±7.76岁；愈合组为临床确诊并处于愈合期的35例ROU患者，其中男性11例，女性24例，平均年龄25.3±5.47岁；对照组为无ROU病史的21位健康成年人，其中男性9例，女性12例，平均年龄23.3±2.27岁。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆方法：用引物设计软件Primerprimer 5.0设计三种常见口腔细菌（链球菌、韦荣氏菌及奈瑟氏菌）16S rRNA基因扩增引物，并验证其特异性；采用改良CTAB/NaCl法提取细菌标本DNA；通过实时荧光定量PCR检测链球菌、韦荣氏菌及奈瑟氏菌三种常见口腔细菌的含量。统计学分析：用SPSS13.0统计学软件，对不同组别三种细菌的含量采用单向方差分析（One-way ANOVA），采用Dunnett T3法进行两两比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。三、基于细菌16S rRNA基因分析的复发性口腔溃疡口腔细菌构成差异分析分别收集符合纳入标准的唾液标本30例，纳入标准参考第一章[1]。将其分为溃疡组、愈合组及正常对照组三组，每组10例。溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的ROU患者；愈合组为临床确诊并处于愈合期的ROU患者；对照组为无ROU病史的健康成年人。
二、方法：采用改良CTAB/NaCl法提取细菌标本DNA，并且制备成混合标本。用细菌16S rRNA通用引物扩增混合标本，琼脂糖凝胶电泳，用AlphaEaseFCStand Alone软件行凝胶图像分析。选择回收纯化差异较明显的条带，测定片段序列并在GenBank中比对，分析差异条带的种属源性。
实验结果：
一、唾液菌群涂片观察溃疡组、愈合组及对照组G~+c构成比分别为：45.16±6.99、43.38±6.92及42.96±4.69；G~+b构成比分别为：3.95±3.12、3.04±1.38及2.65±1.71；G~-b构成比分别为：4.94±2.43、3.79±2.16及4.35±2.96。溃疡组、愈合组及对照组G~+c、G~+b及G~-b构成比差异无统计学意义（P=0.499、P=0.160、P=0.352）。溃疡组、愈合组及对照组G~-c构成比分别为：45.94±5.42、49.79±6.22及50.09±4.65；三组间G~-c构成比差异具有显著性（P=0.032）；溃疡组G~-c构成比较愈合组及对照组分别下降了3.85及4.15个百分点。溃疡组、愈合组及对照组球菌构成比均在90%以上，三组总球菌的构成比分别为：91.10±4.83、93.17±2.57及93.05±4.38；总杆菌的构成比分别为：8.89±4.83、6.83±2.57及7.00±4.37。三组间G~+/G~-、Gc/Gb差异均无统计学意义（P=0.130、P=0.323）。
二、复发性口腔溃疡口腔唾液中链球菌、韦荣氏菌及奈瑟氏菌的定量分析溃疡组链球菌及韦荣氏菌含量的对数值分别为7.30±0.89和8.29±0.77，均显著低于对照组（8.15±0.55和8.93±0.76，P＜0.01），链球菌及韦荣氏菌含量分别较对照组降低了66%和86%；溃疡组与愈合组间链球菌及韦荣氏菌的含量的对数值差异均无统计学意义（P=0.64、P=0.17）；愈合组链球菌含量的对数值为7.51±0.81，显著低于对照组（8.15±0.55，P＜0.01），菌量较对照组降低67%，愈合组与对照组间韦荣氏菌含量的对数值差异统计结果P=0.056；奈瑟氏菌含量的对数值在三组间的差异均无统计学意义（P=0.921）。
结论
1、溃疡组、愈合组及对照组唾液菌群以球菌为主，溃疡组革兰氏阴性球菌构成比减少，表明复发性口腔溃疡唾液菌群构成发生了变化[2]。
2、复发性口腔溃疡患者唾液中链球菌、韦荣氏菌含量发生了减少性变化，提示构成口腔微生态的重要球菌菌群链球菌和韦荣氏菌含量的改变与复发性口腔溃疡的发生发展有关。
3、概言之，复发性口腔溃疡患者口腔菌群构成比及含量均发生了变化，提示复发性口腔溃疡的发生发展与口腔微生态的变化有关。临床上对复发性口腔溃疡的治疗应注意口腔微生态的调整和改善。
参考文献：
[1]AKINTOYE，S.O.，GREENBERG，M.S.. RecurrentAphthousStomatitis[J]. 2014，2（2）：281-297.
[2]宛鹏程. 复发性口腔溃疡口腔微生态的研究分析[J]. 医学美学美容（中旬刊），2014，（7）：192-192，193.
论文作者:帕提古丽·努日洪
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年5月下第10期
论文发表时间:2018/10/18
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