曹巧华（ 临洮县中医院 甘肃临洮 7 3 0 5 0 0 ）
【摘要】目的：本文对比化学法和免疫法两种隐血实验，辩证分析其阴阳性结果的优缺点和适应范围。方法：选取临床病人消化道出血疾病患者50 例，非消化道疾病未出血组患者50 例，两组分别在相同条件下应用化学法和免疫法进行检测。结果：免疫法灵敏度，特异性和抗干扰能力均高于化学法，免疫法阳性率低于化学法。结论：粪便隐血试验的检查应将化学法和免疫法联合应用以提高阳性的检出率，降低假阳性和假阴性结果。因此不能仅靠粪便隐血阴阳性结果就判断患者消化道是否真正出血，应复检观察并进行其他进一步检查，综合辩证分析。
【关键词】 粪便隐血 方法 分析【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）36-0050-01粪便隐血试验(fecal occult blood test,FOBT) 是临床上诊断消化道出血及筛查肠道恶性肿瘤最常用的指标之一，多年来使用传统的化学方法，如邻甲苯胺法, 其为1983 年中华医学会全国临床检验方法学学术讨论会推荐的方法，易受饮食、药物等诸多因素的影响，易出现假阳性[1]，并对操作人员有一定的危害。胶体金免疫法不受饮食、药物等因素的干扰，灵敏度高、特异性强，是一种很理想的检测便隐血的方法。现就对邻甲苯胺法和胶体金免疫法分别对临床病人消化道出血疾病患者50 例，非消化道疾病未出血组患者50 例标本检测结果进行分析比较。
1.材料与方法1.1 试剂1.1.1 胶体金单克隆抗体和多克隆抗体试纸：万华普曼生物工程有限公司生产的“消康保”便隐血检测试纸( 简称WH 试纸条）。
1.1.2 化学法：自配10g/L 邻甲苯胺- 冰醋酸溶液、3% 过氧化氢液。
1.2 标本来源标本来源：选取临床病人消化道出血疾病患者50 例，非消化道疾病未出血组患者50 例，两组分别在相同条件下应用化学法和免疫法进行检测。消化道出血病人均作了胃镜，直肠镜等检查。
1.3 方法1.3.1 胶体金法：按操作说明将配制好的样本加入小试管中，将试纸条MA X 线一端插入小试管中，1m i n -3m i n 观察结果（最长不超过5m i n），出现两条红线为阳性，只有控制线显色为阴性，控制线不显色为无效。
1.3.2 邻甲苯胺法：用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉签上或白瓷板上，滴加10g / L 邻甲苯胺- 冰醋酸溶液2-3 滴于粪便上, 再滴加3%过氧化氢2-3 滴，立即观察结果，在2min 内显兰色为阳性。
2.结果表1 50 例消化道出血病人粪便标本结果比
讨论大便隐血实验是诊断各种原因引起的消化道出血及筛选诊断胃肠道肿瘤及消化道出血的简便易行的重要手段。粪便中血红蛋白的检测可作为胃肠道出血的一个指标，现在国内外出现了很多检测大便潜血的方法，不同方法的特异性及敏感性均有一定的差异。本次是对邻甲苯胺法和免疫法进行了方法学比较。从表1 显示邻甲苯胺隐血法和“消康保”便隐血一步检测法的阳性结果中，邻甲苯胺法50 例均为阳性，阳性率为100%；而“消康保”便隐血一步检测试纸法50 例中，48 例为阳性，2 例为阴性，阴性的2 例标本均系“柏油样”便，经过稀释后再进行检测，此时，免疫法即显示阳性。以上显示，免疫法“消康保”便隐血一步检测法由于前带现象，在标本处理前阳性率为96.0%；标本处理后阳性率为100%，因此，在标本处理得当的前提下，二者在方法学上无显著差异。
表2 中50 例阴性标本邻甲苯胺法则12% 的假阳性。分析原因邻甲苯胺法对食物（如瘦肉，猪肝，动物血）、药物等其他一些物质可导致假阳性；“消康保”隐血便试纸条的特异性强，不易受其他因素的干扰，同等条件下比较“消康保”法，其影响因素少，反应灵敏度高，通过两样品检验比较差异存在显著性（P<0.05), 所以，消康保”法便隐血试验优于邻甲苯胺法。
化学法的试验原理是根据红细胞中血红蛋白具有的过氧化酶作用能催化过氧化物，释放出新生态的氧，与色原性底物反应而显色。只要是具有过氧化物酶特性的食品、药物如铁剂、铋剂、中药等均可产生造成粪便呈黑色、维生素C、过氧化物酶、各种动物的肉、血、肝脏富含叶绿素食品等均可产生此化学反应，干扰实验，造成假阳性，假阳性率高达30% [2]。因此检测前须禁食肉类及相关药品、食品三天。联甲苯胺为治癌物，对人体危害极大，其特异性较低。因其方法简单，成本低，有些医院还在使用。免疫法采用抗人体血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异性的针对粪便中的人血红蛋白，免疫法不受动物血红蛋白的干扰，具有高度的特异性和准确性，能诊断消化道是否有出血，且在试验前不须禁食肉类及相关药品、食品。经试验和临床验证，免疫法对动物血红蛋白检测隐血均为阴性，对食用动物类血红蛋白的人的粪便进行隐血测试，结果也为阴性[3]，此时若用化学法隐血试验则为阳性。胶体金单克隆抗体法灵敏度比邻甲苯胺隐血法高，检出最低浓度为0.2ug/ml,而化学法最低检出浓度为1.0u g / m l，其敏感度低，会对人体无症状的消化道出血便样被漏诊，因此采用单克隆法检测粪便隐血更有助于早期发现肿瘤性消化道出血，特别是早期直肠癌、结肠癌。
免疫胶体金法只特异地针对人血红蛋白抗原表位，基本排除了饮食和药物干扰，灵敏度和特异性均高于化学法。胶体金法也存在一定的不足，一是最高检出浓度为2000ug/ml, 当大于2000ug/ml 时，由于前带反应可出现假阴性，当患者大便呈柏油样或血便时，此时胶体金检测会呈假阴性，其原因是试纸条包被的抗体量是一定的，一旦超出检测范围，会出现假阴性，故检测柏油样便出现假阴性结果时，应充分稀释后进行检测或联合化学法进行检测。二是部分上消化道出血或口腔出血的患者，血红蛋白在消化道内存留的时间太长，被肠道内细菌分泌的酶所将解，使其免疫原性被破坏而失去与抗体结合的能力，可导致假阴性结果。三是少数粪便标本含一定量的蛋白时隐血呈阴性[4]。四是标本处理不当，如放置过久、高温、潮湿、未能及时送检等，造成抗原性的改变。在粪便形成的过程中，少量的消化道出血不一定与之混合均匀，且消化道出血具有间断性[5]。因此，胶体金粪便隐血试验不能对胃肠道出血疾病做出最后的诊断，只能作为筛查或辅助诊断，判断患者消化道是否真正出血，应动态连续检验观察并进行其他进一步检查，综合辩证分析。
检验科在日常工作中也不能仅仅根据单一的化学法或免疫法结果来判断病人消化道是否出血。应与临床医师加强沟通多次检查或及时复查标本, 大肠癌或隐匿性消化道出血的患者应连续追踪隐血试验3-4 次[6].对于粪便隐血试验的检查应将化学法和免疫法联合应用以提高阳性的检出率，降低假阳性和假阴性结果。
参考文献[1] 熊立凡. 临床检验基础[M]. 北京：人民卫生出版社，2004:243-244.[2] 叶应妩. 王毓三. 申子瑜主编. 全国临床检验操作规范[M]. 第三版，南京：东南大学出版社.2006:310-311.[3] 魏明竟主编. 临床检验学[M]. 北京: 科学技术文献出版社,1994:208-210[4] 仇祝强, 官凌娟, 刘学琴. 触珠蛋白对便潜血单克隆抗体法检测的影响[J]. 上海医学检验杂志,2000,15(1):25[5] 李学峰，王厚照. 胶体金法检查粪便隐血假阴性的分析[J]. 国际检验医学杂志,2011,32(17):2041[6] 王晓萍, 杨云帆. 粪便潜血不同方法的试验效果观察[J]. 国际检验医学杂志,2010,31(4):389
论文作者:曹巧华
论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年36期
论文发表时间:2014-4-2
标签：隐血论文; 消化道论文; 粪便论文; 阳性论文; 阴性论文; 免疫论文; 甲苯论文; 《中外健康文摘》2013年36期论文;