（1东南大学医学院 江苏 南京 210009）
（2江苏省南京市六合区人民医院 江苏 南京 211500）
【摘要】目的：探讨PD-L1蛋白在胃癌患者癌组织中具体表达情况及研究价值。方法：选择胃癌患者40例，均为我院2015年2月至2017年2月收治，设为观察组，应用胃癌根治术治疗，并对癌组织进行留取，制作石蜡标本；选择同期胃癌患者40例，设为对照组，取与肿瘤组织距离>5cm的癌旁组织，应用免疫组织化学染色技术，对两组病理组织中PD-L1的表达进行检测，就PL-1在胃癌中的表达特点及与病理特征间的关系展开探讨。结果：结合免疫组化研究结果，PD-L1阳性表达多见于细胞质、细胞膜，主要为胞膜处。PD-L1阳性表达率在观察组胃癌组织中为52.5%（21/40），其中7例为中度阳性表达，占17.5%；2例为强阳性表达，占5%。PD-L1阳性表达率在对照组癌旁组织中为22.5%（9/40），未检出阳性表达和强阳性表达的病例。观察组PD-L1阳性表达率明显高于对照组，具统计学差异（P<0.05）。在胃癌患者中，PD-L1蛋白同肿瘤细胞的浸润、分化程度具紧密相关性，差异有统计学意义（P>0.05）。结论：针对临床收治的胃癌患者，对其癌组织中PD-L1进行检测，结果示呈高表达显示，且其高表达同肿瘤细胞的侵润、分化程度等具密切相关性，可作为对胃癌发生侵袭和分化进行反映的指标，为临床治疗方案的制定提供有力参考依据。
【关键词】胃癌组织；PD-L1；表达；价值
【中图分类号】R735.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）36-0040-03
【Abstract】Objective To investigate the expression and research value of PD-L1 protein in gastric cancer patients. Methods Forty patients with gastric cancer were selected. All of them were treated in our hospital from February 2015 to February 2017, and were treated as radical gastrectomy. Gastric cancer patients were treated by radical gastrectomy. Paraffin specimens were obtained from patients with gastric cancer. 40 cases were selected as the control group. The expression of PD-L1 in the two groups was detected by immunohistochemical staining. The expression of PL-1 in gastric cancer was detected by immunohistochemical staining Characteristics and pathological features of the relationship between the explored. Results According to the results of immunohistochemistry, the positive expression of PD-L1 was more common in the cytoplasm, the cell membrane and the main cell membrane. The positive rate of PD-L1 in the observation group was 52.5% (21/40), of which 7 cases were moderately positive, accounting for 17.5%; 2 cases were strongly positive, accounting for 5%. The positive expression rate of PD-L1 in control group was 22.5% (9/40), and no positive or strong positive expression was detected. The positive rate of PD-L1 in the observation group was significantly higher than that in the control group, with statistical difference (P<0.05). In patients with gastric cancer, PD-L1 protein was closely related to the infiltration and differentiation of tumor cells, with statistical significance (P> 0.05). Conclusions PD-L1 was detected in cancer tissues of patients with clinically-treated gastric cancer. The results showed high expression, and the high expression of PD-L1 was closely related to the invasion and differentiation of tumor cells, Occurrence of invasion and differentiation to reflect the indicators for the clinical treatment program to provide a strong reference.
【Key words】Gastric cancer; PD-L1; Expression; Value
临床恶性肿瘤领域，胃癌为常见且严重危及患者生命安全的病理类型，其有极为复杂的病理机制，由多基因、多步骤共同参与，对临床病理特征展开分析，可为治疗方案的制定提供有力参考依据。程序性死亡配体1(PD-L1)在分子生物学层面属B7家族，也可将其称为B7-H1，可在T细胞膜上结合自身受体即程序性死亡受体1（PD-1）,对T细胞增殖和细胞因子的分泌发挥有效的负调节作用，进而为肿瘤细胞提供防护屏障，降低被免疫杀伤风险。临床已有多项研究证实PD-L1在多种恶性肿瘤类型中均呈高达，如食管癌、非小细胞肺癌竺，同病理、预后均具密切相关性[1-2]。本次研究针对所选胃癌病例，探讨PD-L1蛋白在胃癌组织中的表达情况，旨在为临床治疗提供参考依据。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选择胃癌患者40例，均为我院2015年2月至2017年2月收治，设为观察组，应用胃癌根治术治疗，并对癌组织进行留取，制作石蜡标本；选择同期胃癌患者40例，设为对照组，取与肿瘤组织距离>5cm的癌旁组组，待测。两组均自愿参与本次实验，依据美国癌症癌症联合委员会分期标准行TNM分期。
1.2 方法
用10%甲醛对病理组织标本做有效的固定处理，在完成包埋操作后，行规格为4μm连续切片操作。依据此项目具体的实验流程，予以有效的脱蜡水化，在室温条件下，于3%过氧化氢中放置，安排10min的孵育操作，以将内源性过氧化物酶所具有的生物活性有效消除；应用PBS洗液予以清洗操作，共3次，单次用时为5min。后在柠檬酸缓冲液（pH=6）中有效放置，经微波加热，对抗原作合理、精确的修复，待其呈自然冷却状态。再取PBS洗液予以清洗操作，共3次，取免抗人PD-L1单克隆抗体滴加，于4℃条件下，安排孵育过夜；采用BPS洗液完成3次的冲洗操作，滴加二抗，于室温条件下，安排孵育20min；采用BPS洗液完成3次冲洗操作，用DAB显色，取实验用材料苏木素予以有效复染，后用1%氯水完成返蓝环节，在脱水后，于光镜下对组织特征展开细致的观察。
1.3 观察指标
单个研究样本对10个高倍视野（×400）做精准选取，单个高倍视野对100个细胞予以有效计数。其中阳性染色为细胞呈棕色及黄色，对1000个细胞所呈现出的阳性细胞率进行统计。阴性染色：阳性细胞率经测定<10%；弱阳性染色：阳性细胞率经测定为10%～30%；中度阳性染色：阳性细胞率经测定为30%～60%；强阳性染色：阳性细胞率经测定>60%。两组相关操作均通过双盲法实施。
1.4 统计学分析
涉及数据均输入spss19.0，组间PD-L1在胃癌组织的表达应用Wilcoxon秩和检验，其表达和病理间的关系行χ2检验，P<0.05具统计学差异。
2.结果
2.1 胃癌组织中PD-L1表达情况结合免疫组化研究结果，PD-L1阳性表达多见于细胞质、细胞膜，主要为胞膜处。PD-L1阳性表达率在观察组胃癌组织中为52.5%（21/40），其中7例为中度阳性表达，占17.5%；2例为强阳性表达，占5%。PD-L1阳性表达率在对照组癌旁组织中为22.5%（9/40），未检出阳性表达和强阳性表达的病例。观察组PD-L1阳性表达率明显高于对照组，具统计学差异（P<0.05）。
2.2 胃癌组织中PD-L1表达及与病理关系在胃癌患者中，PD-L1蛋白同肿瘤细胞的浸润、分化程度具紧密相关性，差异有统计学意义（P>0.05）。而与患者性别、年龄等个人基线资料及肿瘤所处位置、大小等无关，且相较I期、II期，III期、IV期有更高的PD-L1表达(P<0.05)。见表。
3.讨论
PD-L1在生物学中为一种较为典型的共刺激分子，在直肠癌、非小细胞肺癌、肺质母细胞瘤等多种类型的恶性肿瘤中均有表达。结合本次研究结果示，相较在对照组癌旁组织中的表达情况，PD-L1在观察组胃癌组织中居更高水平，提示恶性肿瘤的形成同PD-L1的表达存在一定相关性，在胃癌的病发、病情进展中可能发挥着较为重要的作用。进一步分析PD-L1同胃癌患者病理特征的关系，也对此结果有所证实。胃癌患者浸润和分化程度不同，在PD-L1阳性表达上也存在较大差异，而肿瘤所处的位置、大小及患者年龄、性别等基线资料同PD-L1阳性表达无明显关联，表明PD-L1可用于对胃癌的侵袭和分化进行反映。需引起重视的是，就临床分期而言，且相较I期、II期，III期、IV期有更高的PD-L1表达(P<0.05)。但因此次选取的样本量有限，无法排除非相关的可能，需临床展开深入的研究，予以更精确的论证[3-4]。
在肿瘤的发生和病程进展中，肿瘤微环境所起作用重大，当将PD-1/PD-L1信号有效阻断后，对肿瘤所具有的免疫微环境具有效的逆转作用，可使机体抗肿瘤免疫效率呈明显增强显示[5-6]。对PD-1/PD-L1信号通路特征展开分析，其含呈相互作用关系的3条性质不同的抑制型分支，有别与抗PD-1抗体，抗PD-L1抗体可将PD-L1蛋白同CD-80、PD-1的结合有效阻断，却不具备将PD-1同PD-L2的结合有效阻断的能力[7]。最新报道指出，MPDL3280A，属于靶向于PD-L1蛋白的一种抗体，在治疗转移性膀胱癌时，效果较为理想，可将肿瘤体积明显缩小，甚至可起到治愈成效[8-9]。
综上，针对临床收治的胃癌患者，对其癌组织中PD-L1进行检测，结果示呈高表达显示，且其高表达同肿瘤细胞的侵润、分化程度等具密切相关性，可作为对胃癌发生侵袭和分化进行反映的指标，为临床治疗方案的制定提供有力参考依据。
【参考文献】
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论文作者:黄魁,陈洪,李玉震
论文发表刊物:《医药前沿》2017年12月第36期
论文发表时间:2018/3/20
标签：胃癌论文; 阳性论文; 组织论文; 细胞论文; 患者论文; 肿瘤论文; 病理论文; 《医药前沿》2017年12月第36期论文;