摘要：目的 对TBX5基因上的rs1895585，rs78441425和rs55646156单核苷酸多态性位点与单纯性先天性心脏病易感性的相关性进行分析和讨论。方法 将本院接收的90例单纯性先天性心脏病患者以及90例正常健康体检患者纳入至本次试验中，并收集患者外周血标本，对基因组DNA进行提取，从Hap Map数据库中对TBX5基因的标签SNP进行选择，采用Illumina Bead Xpress Reader对TBX5基因的标签SNP进行基因分型。结果 采用Hardy-Weinberg分析对照组与病例组，研究结果显示，rs55646156、rs78441425和rs1895585均与哈温平衡相符（P<0.05）；经过分析对照组90例和病例组90例的关联可知，在rs55646156、rs78441425和rs1895585方面，两者之间差异明显，统计学意义成立（P<0.05）结论 经过本次研究发现，TBX5基因上的rs55646156、rs78441425和rs1895585三个位点可能与单纯性先天性心脏病患病风险存在紧密联系。
关键词：单纯先天性心脏病；易感性；TBX5基因多态性
先天性心脏病指的是因为血管以及心脏在胚胎发育期间产生障碍而引起的血管形态、心脏、功能、代谢以及结构等异常。现阶段，临床上，较为常见的一种出生缺陷即为先天性心脏病，此类疾病在活产新生儿发病率中占据大约3%-12%，同时，企业是引发儿童死亡以及围产儿死亡的主要因素[1]。
按照遗传学将先天性心脏病分为多基因病、单基因病、线粒体病以及染色体病四种。据有关资料显示，大部分单纯性先天性心脏病被认为是多基因遗传，仅有少部分认为单纯性先天性心脏病是单基因遗传因素[2]，除此之外，据有关资料显示，先天性心脏病发病期间，在参与遗传因素方面存在明显不同，其中包括种族差异和地区差异。
相关研究表明，心脏正常发育以及形成的关键是心脏转录因子的正常表达。TBX5基因是T-box转录因子基因中的一种。T-box基因家族基因的主要功能是作为转录因子对胚胎的生长发育过程进行调控，对于该类基因大部分是保守片段，此片段在形成以及进化期间存在相对强度的保守型。近些年来，随着各项研究的不断深入研究发现，TBX5基因在心脏发育期间具有关键性作用。此基因于1997年被发现，并且在Holt-Oram综合征中被鉴定和科隆，据国外有关资料显示，TBX5基因突变是引发Holt-Oram综合征以及单纯性先天性心脏的主要因素。本次研究主要针对TBX5基因多态性与单纯性先天性心脏病易感性的关联进行分析和讨论，现将探究内容以如下报告形式呈现。
1 研究资料与方法
1.1 研究资料
将本院接收的单纯性先天性心脏病患者90例纳入至病例组中，将同期健康体检人员90例纳入至对照组中，对照组中，50例男性，40例女性，年龄最大74岁，最小20岁，均值（52.13±9.54）岁；病例组中，49例男性，41例女性，年龄最大73岁，最小21岁，均值（52.47±9.65）岁，组间年龄以及性别等基础资料差异较小，无统计学意义（P>0.05）。入组标准：①本次研究所选患者均在自愿的前提下签署了知情研究协议书；②此次试验经过伦理委员会批准；④排除标准：①重大心理以及精神疾病患者；②伴有心脏、肝、肾等严重器官功能不全患者；③伴有肢体、言语功能障碍患者；④中途选择退出患者；⑤拒绝参与本次试验患者；⑥中途选择退出患者。
1.2 方法
1.2.1 收集与保存血标本
在无菌环境下，抽取患者3-5ml空腹静脉血，并将注入到含有EDTA（乙二胺四乙酸）抗凝采血管中，均匀摇晃，然后分别放置在装有已经灭菌的2mlEppendorf（EP）管中，每个试管装入0.5ml，然后变化，并将其置于零下20℃的低温冰箱中保存。
1.2.2 外周血DNA提取
采用酚氯仿法对被细胞中的基因组DNA进行提取，并将其置于零下80℃的冰箱内部保存。
1.2.3 测定DNA浓度
应用核酸分光光度计对DNA浓度进行检测，吸光度A260/A280，比值处于1.8-2.0之间，将每份DNA样本分两次进行单独测量，将平均浓度视为最后确定的浓度，并将DNA的OD值记录袭来，最后将其置于零下80℃的冰箱中进行保存。
1.2.4 基因分型
从HapMap数据库中将TBX5基因的标签SNP选出来，通过BeadXpress Reader基因分析仪分析TBX5基因类型。为了保证基因分型结果的准确性，随机抽取10%的样本进行多次试验，确保结果的准确性和相同性。
1.3 观察指标
对TBX5基因多态性与单纯先天性心脏病易感性的关联进行分析，并记录相关数据和内容。
1.4 统计学方法
本次试验数据的处理均采用统计学软件SPSS19.0，均数±标准差（?x?x±s）表示计量资料，计数资料的表示方法为率（%），检验值分别是t和x2，组间比较经P值判定，P<0.05则表示差异呈统计学意义。
2 结果
采用Hardy-Weinberg分析对照组与病例组，研究结果显示，rs55646156、rs78441425和rs1895585均与哈温平衡相符（P<0.05）；经过分析对照组90例和病例组90例的关联可知，在rs55646156、rs78441425和rs1895585方面，两者之间差异明显，统计学意义成立（P<0.05），详情如下表1：
3 讨论
T-box转录因子基因家族中较为重要的一部分是TBX5，其通过独特的T-box结构与下游靶基因结合，并且能够对胚胎早期阶段的生长发育造成影响[3]，其主要在上肢以及心脏发育行程中起着关键性作用。TBX5基因突变使得TBX5转录因子异常表达造成影响，TBX5转录因子缺陷表达以及过度表达均会对其心脏发育造成影响，甚至畸形，最终导致房室腔功能以及结构异常。
通过本次研究结果可知，TBX5基因rs55646156、rs78441425和rs1895585位点多态性与单纯性先天性心脏病的发生存在紧密联系，其发生机制如下所示[4]：①rs55646156、rs78441425和rs1895585位点多态性能够使降低TBX5转录因或者过高表达，TBX5转录因子异常表达将会对多种下游基因的表达造成影响，而这些均在心脏传导系统以及心脏发育期间具有重要作用。②在地域、种族以及不用人群的影响下，基因多态性很容易受到影响，因此，在对研究人员进行选择时，影响较大的因素包括rs55646156、rs78441425和rs1895585位点多态性。
对于单纯先天性心脏病患者而言，其发病机制较为复杂，截止到目前为止，其遗传机制尚不明确，需要不断对该疾病发生的分子遗传机制进行探索，以便及早治疗和预防奠定基础。
参考文献
[1] 杨景晖，许小艳，米弘瑛，等.NKX2.5基因和TBX5基因在先天性心脏病试管婴儿中的突变检测[J].中国当代儿科杂志，2017，19（6）：652-657.
[2] 黄雄，仇小强，曾小云，等.Nkx2.5、GATA4和TBX5基因多态性与广西壮族、汉族儿童室间隔缺损的关系研究[J].中国妇幼保健，2016，31（12）：2508-2513.
[3] 王力，汤楚中，朱智明.心脏发育的信号调控与先天性心脏病的关系[J].解放军医学杂志，2013，38（11）：952-956.
[4] 胡易池，杨毅宁.NKX2.5和TBX5与先天性心脏病的研究进展[J].医学综述，2012，18（13）：1986-1989.
论文作者:王琪
论文发表刊物:《航空军医》2018年14期
论文发表时间:2018/10/26
标签：基因论文; 先天性论文; 心脏病论文; 多态性论文; 单纯性论文; 心脏论文; 转录论文; 《航空军医》2018年14期论文;