大理大学 基础医学院 云南大理 671000
摘要：目的：了解云南大理地区女性性工作者与健康人群生殖道假丝酵母菌对两种抗真菌药物的敏感性，为相关疾病防治提供依据。方法：测定两组菌对氟康唑、5氟胞嘧啶的最小抑菌浓度（MIC）。结果：两组人群对FCZ的耐药率无差异，对5-FC的耐药率有差异。白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC的敏感性无统计学差异，剂量依赖敏感性无差异，耐药性有差异；对FCZ的耐药率有差异，对5-FC的耐药率无差异。结论：健康人群生殖道假丝酵母菌对5-FC耐药，其中的非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC耐药，白假丝酵母菌对FCZ的耐药。
关键词：假丝酵母菌；女性性工作者；药物敏感性
女性性工作者（Female sex workers，FSWs）作为女性的特殊群体，是通过性途径感染性传播疾病（STD）或者AIDS的主要高危人群，而且成为STD与AIDS从高危人群传向一般人群的重要桥梁人群[1-3]。FSWs作为艾滋病传播的高危人群，其感染状况及行为直接影响该地区艾滋病的流行强度[4]。
假丝酵母菌（Candida），俗称念珠菌。其中白假丝酵母菌致病力最强，是院内真菌感染最主要的致病菌 [5]。白假丝酵母菌是机会致病菌。近年来，随着广谱抗生素及免疫抑制剂的广泛使用干扰了机体内菌群平衡状态和侵入性操作及置入性治疗装置的运用，使得以白假丝酵母菌为代表的真菌感染呈上升趋势，并且有着极高死亡率[6]。以白假丝酵母菌感染为主的阴道念珠菌病是妇女最常见的阴道炎症之一，严重的影响了妇女健康和生活质量，并且可通过性行为传播。
女性性工作者性活动频繁，且具有多个性伙伴，在阴道微生态失衡的条件下，性传播疾病病原体及假丝酵母菌携带率均高于健康人群。且常见的STD间存在着关联，一种病原体感染可以成为另一种病原体感染的危险因素，特别是增加HIV的感染的危险性[7]。
本实验试图研究云南大理地区女性性工作者与同地区健康人群生殖道假丝酵母菌对两种常用抗真菌药物氟康唑（Fluconazole，FCZ）、5氟胞嘧啶（5-Fluorocytosine，5-FC）的敏感性以及之间的关系，为临床用药及相关疾病的防治提供理论依据。
1 研究对象及研究方法
1.1 研究对象 2013年12月-2014年3月分离自云南大理地区娱乐场所女性性工作者生殖道假丝酵母菌44株和同时期同地区体检健康人群生殖道假丝酵母菌44株。实验菌株由大理大学病原生物学综合实验室分离、鉴定和保存。
1.2 研究方法 采用美国临床和实验室标准化研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推荐的《酵母菌液基稀释法抗真菌药物敏感性实验批准方案M27-A2》，即微量液基稀释法，测定两组假丝酵母菌对两种常用抗真菌药物氟康唑（Fluconazole，FCZ）、5氟胞嘧啶（5-Fluorocytosine，5-FC）的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC），研究两种来源假丝酵母菌对两种抗真菌药物敏感性之间的关系。
1.3 主要试剂 氟康唑（中国药检），氟胞嘧啶（中国药检）。
1.4 质控菌株 ATCC10231白假丝酵母菌，ATCC90029白假丝酵母菌，均由大理大学病原生物学综合实验室提供。
1.5 统计学方法 采用SPSS15.0统计软件进行数据分析。
2 结果
2.1 两组假丝酵母菌构成比 见表1
实验组白假丝酵母菌占82%，光滑假丝酵母菌占11%，克柔假丝酵母菌占7%。对照组白假丝酵母菌占32%，光滑假丝酵母菌占48%，克柔假丝酵母菌占18%，热带假丝酵母菌占2%。
2.2 质控菌株对抗真菌药物的敏感性
质控菌株ATCC10231和ATCC90029，重复3次进行FCZ和5-FC的药敏测定，其MIC值变化不超过两个药物浓度梯度。FCZ对ATCC10231的MIC范围是0.125μg/ml～0.25μg/ml，FCZ对ATCC90029的MIC范围是0.25μg/ml～0．5μg/ml；5-FC对ATCC10231的MIC范围是0.25μg/ml～0.5μg/ml，ATCC90029对5-FC耐药。质控菌株的MIC值范围符合CLSI M27-A2方案关于质控菌株标准的要求[8]。
2.3 两种常用抗真菌药物对两种来源假丝酵母菌的敏感性（MIC值） 见表2-3。
2.4 两种来源不同的假丝酵母菌耐药率的比较
关于假丝酵母菌对抗真菌药物的敏感性判断，CLSI M27-A2方案仅对氟康唑（FCZ）和伊曲康唑作了规定，其它抗真菌药物未做规定。本文参照文献[9-10]根据最低抑菌浓度（MIC）值的范围，将假丝酵母菌对抗真菌药物敏感性分为敏感（susceptible，S）、剂量依赖性敏感（susceptible dose-dependent，SDD）和耐药（rsistant，R）3种（见表4），据此标准将两组菌对两种抗真菌药物的耐药率做出比较（见表5）。
FCZ的MIC值范围是0.125～64μg/ml，大多小于0.564μg/ml，实验组44株菌和对照组44株菌各有1株对FCZ耐药；5-FC的MIC值范围是0.125～64μg/ml，实验组和对照组各有1株和5株对5-FC耐药。
经检验，两组人群对FCZ的耐药率，P=1.000，无统计学差异；经fisher精确检验，两组人群对5-FC的耐药率，Fisher=3.882，P=0.179，p<0.5，差异具有统计学意义。
2.5 白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌假丝酵母菌耐药率的比较
为了进一步描述两组人群对FCZ和5-FC的敏感性差异是否是由两组假丝酵母菌构成比之间的差异引起的，将白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对两种抗真菌药物的敏感性做比较（见表6-7）。
两组菌中，有白假丝酵母菌50株，非白假丝酵母菌38株。其中，有2株非白假丝酵母菌对FCZ的耐药，各有3株白假丝酵母菌及非白假丝酵母菌对5-FC耐药，耐药率分别是6.0%及7.9%。各有1株白假丝酵母菌及非白假丝酵母菌对5-FC剂量依赖性敏感。
比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC的敏感性，经检验，S=0.007，P=1.000，无统计学差异；比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC的剂量依赖敏感性，无差异；比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC的耐药性，经检验，PR=0.464，差异具有统计学意义；比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对FCZ的耐药率，P=0.184，差异具有统计学意义；比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对5-FC的耐药率，Fisher=0.524，P=1.000，无统计学差异。
3 讨论
目前，假丝酵母菌的体外药物敏感试验比较常用的两种方法是E-Test法和微量液基稀释法。CLSI M27-A2方案推荐的微量液基稀释法，操作简单、消耗低廉、重复性高、操作标准，是各实验室广泛认可的体外抗真菌药物敏感性试验方案。本试验采用了CLSI M27-A2方案推荐的微量液基稀释法，对分离自云南大理地区女性性工作者生殖道假丝酵母菌44株和健康人群生殖道假丝酵母菌44株，测定两种常用的抗真菌药物FCZ和5-FC的药物敏感性。取得了较好的试验结果。
通过研究发现，在云南大理地区，无论是女性性工作者还是健康人群的生殖道假丝酵母菌，对FCZ和5-FC等2种常用的抗真菌药物敏感，但均存在不同程度的耐药菌株，且不同来源的菌株对FCZ的耐药性没有差异，而健康人群对5-FC耐药。其中的白假丝酵母菌对常用的两种抗真菌药物都敏感，非白假丝酵母菌对FCZ和5-FC耐药。白假丝酵母菌对FCZ的耐药。
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论文作者:刘红英,白丽
论文发表刊物:《健康世界》2016年第14期
论文发表时间:2016/8/29
标签：酵母菌论文; 敏感性论文; 药物论文; 两种论文; 大理论文; 人群论文; 差异论文; 《健康世界》2016年第14期论文;