（四川卫生康复职业学院基础医学部 四川自贡 643030）
【摘要】目的：探讨RhoA在胃癌患者中的表达及与临床病理的关系。方法：选择2016年3月—2018年2月收治的58例胃癌患者为研究对象，分别取其胃癌组织和癌旁组织，采用免疫组化测定取获的病灶组织标本中RhoA表达阳性率，同时查阅患者病理，分析不同病理因素下胃癌患者RhoA表达情况。结果：胃癌组织中RhoA表达阳性率显著高于癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；免疫组化结果显示RhoA在胃癌组织中高表达，且主要定位于胞质中，但在癌旁组织中亦有表达；胃癌组织中RhoA表达阳性率与性别、年龄差异无统计学意义（P＞0.05），与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及分化程度有统计学意义（P＜0.05）。结论：RhoA蛋白在胃癌患者中呈高表达，且表达阳性率与临床病理存在紧密的联系，加强RhoA测定有助于评估患者预后，为临床诊疗提供依据和参考。
【关键词】RhoA蛋白；胃癌；临床病理；免疫组织化学法
【中图分类号】R735.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）35-0171-02
胃癌是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，好发于50岁以上人群，与患者的饮食结构、工作压力及幽门螺杆菌感染等有关，且胃癌发生率呈上升、年轻化趋势[1]。研究表明，胃癌的发生与人体多种基因和蛋白表达相关，其中就包括RhoA蛋白[2]。RhoA蛋白属于Ras超家族的Rho家族蛋白，具有GTP活性，能与效应蛋白处于解离状态，实现其特定的生化功能，但是RhoA在胃癌患者中的表达及与患者病理因素关系缺乏研究。在本文中，笔者探讨了RhoA在胃癌患者中的表达及与临床病理的关系，现报道如下。
1.资料与方法
1.1 临床资料
选择2016年3月—2018年2月治疗的胃癌患者58例为研究对象，其中男性34例、女24例，患者年龄31～82岁，平均（68.83±4.61）岁，肿瘤直径1～8cm，平均（4.61±0.64）cm。有淋巴结转移27例、无淋巴结转移31例，低分化23例、中分化20例、高分化15例，Ⅰ～Ⅱ期30例、Ⅲ～Ⅳ期28例，肠型胃癌23例、弥漫型胃癌23例、混合型胃癌12例。分别取患者的胃癌组织和癌旁正常组织作为标本，进行免疫组化分析。
1.2 方法
（1）RhoA表达阳性率。采用免疫组织化学法检测获得的胃癌组织及癌旁组织中RhoA表达。向标本中加入蒸馏水与30.0%的H2O2，常温下加入内源性酶并灭火10min，PBS洗涤3次，每次5min；获得的切片放置在0.01M枸橼酸盐缓冲液中，加入生理盐水调节pH至6.0；电炉加热至煮沸，间隔5min后再次煮沸，常温下冷却，PBS洗涤2次，每次5min；最后加入5%BSA封闭液并加入1滴RhoA蛋白（稀释浓度为1:100）一抗，加完毕后PBS洗涤3次；在1mL底物中加入1滴RhoA蛋白二抗，混合后常温下显色，苏木素复染后封片，倒置显微镜下观察细胞数量，每份标本测定三次，取平均值[3]。参考奥尔雷德评分标准分别从细胞的阳性数量（阳性细胞数≤25.0%记0分，26%～50.0%记1分，51%～75%记2分，＞75%记3分）、染色强度（不着色0分，黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分）完成免疫组化染色评分，总分16分，阳性率越高。（2）RhoA与临床病理因素关系。查阅病理，统计并记录胃癌患者性别、年龄、分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移情况，分析不同病理因素下胃癌患者RhoA表达情况。
1.3 统计分析
采用SPSS18.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（x-±s）表示，P＜0.05差异有统计学意义。
2.结果
2.1 不同组织中RhoA表达阳性率比较
胃癌组织中RhoA表达阳性率62.07%（36/58）显著高于癌旁组织12.07%（7/58），差异有统计学意义（χ2=6.397，P＜0.05）。免疫组化结果表明RhoA在胃癌中呈高表达，且主要定位于胞质中，但是在癌旁组织中亦有表达。
2.2 胃癌患者不同临床病理RhoA表达阳性率比较
胃癌组织中RhoA表达阳性率与性别、年龄差异无统计学意义（P＞0.05），与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及分化程度具有统计学意义（P＜0.05），详情见表。
表 胃癌患者不同临床病理RhoA表达阳性率比较[n（%）]
3.讨论
胃癌是临床上常见的恶性肿瘤，其发生、发展是一个多步骤、多因素及多阶段过程，具有不同分子亚型与组织学亚型。寻找新的与胃癌发生发展以及患者生存时间有关的生物学指标有重要的临床意义。RhoA在细胞信号的传导中发挥了重要的作用，通过调节重建肌动蛋白细胞骨架调整生物学行为，影响细胞的形态、黏附性、凋亡，从而引起肿瘤细胞发生侵袭、转移。研究显示，RhoA在乳腺癌、肺癌和结肠癌中均有不同程度的高表达，因此可能在胃癌中也会存在异常表达[4]。
本研究发现胃癌组织中RhoA表达阳性率显著高于癌旁组织（P＜0.05）；免疫组化结果也显示RhoA在胃癌组织和癌旁组织中均高表达，且主要在胃癌细胞胞质中高表达，提示胃癌患者中RhoA呈高表达，能直接参与疾病的发生、发展。临床研究也表明，在正常上皮细胞中RhoA能帮助上皮细胞的极性产生、连接的建立与功能，影响肿瘤进展期上皮细胞的破坏。RhoA的活化能抑制其下游钙黏蛋白引导能动表型，而在肿瘤环境中众多生长因子将会激活RhoA，使得细胞从G1期向S期转换[5]。本研究结果亦表明，胃癌组织中RhoA表达阳性率与性别、年龄差异无统计学意义（P＞0.05），与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及分化程度具有统计学意义（P＜0.05），提示胃癌组织中RhoA表达水平受到的影响因素较多，积极采取有效的措施抑制RhoA能抑制肿瘤细胞进展，为胃癌临床诊疗提供新的靶点。
综上所述，RhoA在胃癌患者中呈高表达，且表达阳性率与临床病理存在紧密联系，加强RhoA测定有助于患者预后评估。
【参考文献】
[1]郑运江，胡晓峰，陈庆青，等.脓毒症患者血清诱导血管内皮细胞通透性相关因素研究[J].中国临床药理学杂志，2016，32(12):1059-1062.
[2]廖山婴，刘超，王蓓蓓，等.RhoA/ROCK信号通路在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系[J].胃肠病学和肝病学杂志，2017，26(3):251-255.
[3]吴孟孟，孙亚红，孙子雯.RhoA的作用机制及其在胃癌中的研究进展[J].肿瘤研究与临床，2017，29(7):494-498.
[4]董锐增，郭剑民.RhoA信号通路在胃癌中的研究进展[J].医学综述，2018，24(5):884-888.
[5]廖山婴，刘超，王蓓蓓，等.RhoA/ROCK信号通路在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系[J].胃肠病学和肝病学杂志，2017，26(3):251-255.
论文作者:谢文贤
论文发表刊物:《心理医生》2018年35期
论文发表时间:2019/1/7
标签：胃癌论文; 患者论文; 组织论文; 病理论文; 肿瘤论文; 统计学论文; 阳性率论文; 《心理医生》2018年35期 论文;