王润生[1]2000年在《（-）黄皮酰胺的抗细胞凋亡作用及其作用机制研究》文中指出老年性痴呆(Alzheimer’s disease，AD)已经成为当今社会危害老年人生命和生活质量的重要疾病之一。在已发现的AD致病因素中，如β-淀粉样肽，过氧化损伤，低能量代谢等都可以导致神经细胞凋亡的发生。许多研究也显示凋亡是AD脑组织中神经元丢失的重要机制之一。AD脑组织易损区存在着DNA断裂损伤，凋亡小体，染色质凝集及凋亡相关的基因表达改变。说明凋亡确实参与了AD脑中的病因及发病过程。神经元损伤预示着细胞修复和保护机制的的缺陷和不足。因此寻找有效的抗凋亡剂对AD及其他神经退行性病变的治疗有重要意义。 随着研究的深入，人们发现在细胞凋亡过程中Bax(Bcl-2associated X protein)蛋白及线粒体损伤起着极其关键的作用。Bax蛋白可以诱导线粒体释放细胞色素c。从线粒体中释放出来的细胞色素c可以进一步激活下游的caspase蛋白酶，从而导致细胞凋亡过程的发生。AD脑组织中有Bax表达水平的增加，早老素分子与Bcl-2家族分子之间也存在着复杂的相互作用。 黄皮酰胺是我所从芸香科植物黄皮叶中(Clausena Lansium Lour Skells)中分离出来的有效成分，部分结构类似脑复康，现已能人工合成。我室以前的研究表明(_)黄皮酰胺可以逆转FeSO4-半胱氨酸和Vc-NADPH系统通过增加氧自由基生成而造成的细胞膜流动性降低。从而使膜通道，受体等发挥正常的功能，并有明显的抗细胞凋亡作用。本文进一步探讨了(_)黄皮酰胺的抗细胞凋亡作用及相关的作用机制。
王润生, 张均田[2]2000年在《Baxα高表达PC12细胞系的建立及(-)黄皮酰胺抗细胞凋亡作用机制的研究》文中提出目的 用Baxα高表达的PC12细胞研究了 (- )黄皮酰胺的抗细胞凋亡作用。方法 先将BaxαcDNA从原核载体 pBluescriptSK克隆到真核载体 pcDNA3。用脂质体转染的方法将 pcDNA3 Baxα导入PC12细胞。以 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)诱导Baxα高表达PC12细胞的凋亡。结果 (- )黄皮酰胺 (0 1～ 10 μmol·L-1)可使细胞凋亡率显著降低。结论 (- )黄皮酰胺可以抑制细胞凋亡 ,对神经退行性病变有一定应用前景
张均田, 段文贞, 刘少林, 王润生[3]2001年在《(-)黄皮酰胺的抗老年痴呆作用》文中认为目的 :研究 (-)黄皮酰胺对记忆障碍、神经可塑性、神经细胞凋亡和脑内蛋白磷酯酶活性的影响。方法 :采用Morris水迷宫、电生理、生化学等方法以及在三种凋亡模型上观察 (-)黄皮酰胺的上述作用。结果 :(-)黄皮酰胺能改善 β 淀粉样肽 (2 5 3 5 )引起的空间辨别障碍 ,同时提高脑皮层的胆碱乙酰转移酶 (ChAT)活性。在麻醉和自由活动大鼠 ,(-)黄皮酰胺能诱导LTP的形成和增加高频电刺激 (HFS)引起的LTP的幅度。给断乳小鼠和成年大鼠口服 (-)黄皮酰胺 2 8和 10d ,能使海马突触密度和苔藓神经纤维末梢发芽数增加。在三种凋亡模型上 (-)黄皮酰胺均显示明显的抗细胞凋亡作用。 (-)黄皮酰胺还能提高脑内蛋白磷酸酯酶Calcineurin和Calpain的活性。结论 :(-)黄皮酰胺有望开发成为抗老年痴呆新药。
楚世峰, 张均田[4]2014年在《一种新型的抗老年痴呆剂:左旋黄皮酰胺的化学、生物学活性和作用机制研究》文中认为从芸香科植物黄皮叶中分离出具有五种不同骨架的七个新酰胺类化合物,其中之一的黄皮酰胺的γ-内酰胺与具有促智作用的脑复康(piracetam)呈现相同的骨架,其分子中有4个不对称中心,应有16个对映体。在鉴定出16个对映体的绝对构型之后,用黄量教授设计的仿生路线先后完成了16个对映体和光活黄皮酰胺的不对称合成,在这一研究中解决了立体化学和合成中的一些难点,大大缩短了合成步骤,提高了总得率,生产工艺日趋成熟,其合成规模可满足临床试用和日后治疗疾病的需要。使用多项模型和指标也已证明(-)黄皮酰胺是有效对映体,(+)黄皮酰胺为劣对映体。黄皮酰胺对映体的代谢(血药浓度、吸收、分布、排泄、血浆蛋白结合、肝脏首过效应)和酶促动力学也都存在立体选择性差异。(-)黄皮酰胺的主要药理作用是改善认知功能和抑制Aβ毒性。药理作用的显著特点是提高突触效能和结构的可塑性,为国际上近年提出的"突触丢失是老年痴呆的主要原因"的新学说提供了有力的支持,也为当前AD治疗的新策略提供了有良好前景的新药。
蒋祝昌, 毕桂南, 石胜良[5]2005年在《黄皮酰胺对高血压局灶性脑缺血-再灌注大鼠Bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的影响》文中提出目的观察黄皮酰胺对肾性高血压大鼠(RHR)脑缺血-再灌注后Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响,探讨其脑保护作用机制。方法75只RHR被随机分成假手术组、单纯缺血-再灌注组和黄皮酰胺组。采用线栓法制作局灶性脑缺血-再灌注模型,假手术组不造成缺血。用免疫组化法和原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL法)分别观察缺血2h后再灌注6、12、24、48和72h脑细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡细胞数。结果①再灌注6h即可见Bcl-2蛋白表达较多,24h达高峰,此后逐渐下降。与单纯缺血-再灌注组比较,黄皮酰胺组Bcl-2蛋白表达于再灌注后各时间点均明显增高,差异均有显著性(P均<0.01)。②再灌注6h后有较多凋亡细胞,于72h达高峰。与单纯缺血-再灌注组比较,再灌注6-24h黄皮酰胺组凋亡细胞均显著减少(P均<0.01),但再灌注48h后细胞凋亡的抑制作用不明显(P均>0.05)。假手术组及缺血-再灌注组的非缺血侧无Bcl-2阳性细胞,仅见0-2个凋亡细胞。结论局灶性脑缺血-再灌注后Bcl-2表达显著增高,细胞凋亡参与了脑缺血-再灌注损伤的过程。黄皮酰胺能显著上调Bcl-2表达,抑制细胞凋亡,并可能与Bcl-2协同抑制细胞凋亡,这可能是黄皮酰胺脑保护作用的机制。
段文贞[6]1998年在《（-）黄皮酰胺的促智机理及左右旋体作用的比较研究》文中研究指明脑功能的研究是人类面临的最重要课题之一，这是由于认知障碍并不限于人的任何特定年龄阶段，无论是童年期，青壮年期还是老年期，均存在以学习记忆能力丧失为特征的认知障碍。再者，人类智能虽已日益成熟，但就人类每一分子来说，均只利用大脑潜力的十分之一、二。因此，无论是防治衰老，治疗记忆障碍症，还是提高正常人的智能，揭开“记忆之谜”，充分发掘和利用大脑潜力，找出增进学习记忆功能的药物，已成为世界各国科学家孜孜以求的共同愿望。 目前，影响学习记忆功能的药物种类繁多，或因疗效不确切，或因毒副作用大而未能得到广泛应用。黄皮酰胺是从芸香科植物黄皮叶(Clausena Lansium lour.skeels)中提出的化学成份，现已能人工合成。在其结构中有类似促智药脑复康的药效结构基团，我所和德国拜尔公司在行为学实验中均证明它的促智作用比脑复康强。因其结构中具有手性活性中心，我所化学工作者已将其拆分为左，右旋体。研究对映体药物的药理作用是当前药物研究的重要方向之一。具有光学活性的一对对映体，药效不仅存在量的差别，还可能有质的差异。因此，临床上应用光学活性异构体将是必然的趋势。本研究采用行为学，生化，细胞培养，电生理结合免疫组化和原位杂交，分子生物学等多种实验方法，从与学习记忆关系密切的胆碱神经系统，NMDA受体调节，蛋白质合成代谢，膜流动性，神经元凋亡，LTP相关基因zif／268的表达等多个方面分析比较了(-)，(+)黄皮酰胺作用的异同，并探讨了(-)黄皮酰胺的促智机理，主要结果如下： 一 (-)，(+)黄皮酰胺对胆碱神经系统的影响：
李骏[7]2016年在《黄皮叶中八元内酰胺类化学成分的全合成及其初步构效关系研究》文中认为现代药理学研究表明,黄皮属植物中五元内酰胺及桥环内酰胺类化学成分具有广泛的生物活性,而八元内酰胺类的生物活性却鲜有报道。为了研究含吲哚环的八元内酰胺类化学成分,本论文设计合成了天然产物(+)-balasubramide及其类似物(+)-norbalasubramide,以反式肉桂醛为起始原料,经三步反应,合成得到(+)-balasubramide(总收率为44%,ee值为>99%)和(+)-norbalasubramide(总收率为57%,ee值为>99%)。同时,为了对该类化合物的生物活性进行研究,并从立体结构上初步分析其结构变化对生物活性的影响,以便进一步了解其构效关系,在内酰胺环6位苯环引入电负性不同的取代基,以取代肉桂醛为起始原料,制备(+)-norbalasubramide的衍生物,总收率为35%-54%,ee值为95%-99%。由于黄皮属植物中五元内酰胺类化学成分立体结构对药物影响较大,为了研究八元内酰胺类化学成分的立体构效关系,就以较易合成得到的(±)-norbalasubramide为代表,利用其内酰胺环上的仲羟基,在手性拆分试剂(-)-薄荷醇氧乙酸的作用下,用化学拆分的方法,制备具有光学活性的(+)-norbalasubramide和(-)-norbalasubramide,拆分步骤产率分别为30.0%和30.7%(以(±)-norbalasubramide计),ee值分别为94%和>99%。该拆分方法简单、温和地制备得到两种对映体,为日后进一步研究该类化合物的立体化学构效关系提供方法学基础。参考黄皮属植物中五元内酰胺类化学成分具有的药理活性类型,通过MTT法与ELISA法,对(+)-balasubramide和(+)-norbalasubramide及其衍生物分别进行了神经保护作用、抗氧化作用、抗脑细胞炎症作用以及细胞毒性试验。实验发现,受试化合物对神经细胞保护作用和抗氧化作用很低,而除了苯环3位上以氯原子取代的化合物(3g)外,其余化合物对脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞中炎症因子TNFα的释放有较好抑制作用。其中,(+)-balasubramide与类似物(+)-norbalasubramide的活性相当,说明(+)-balasubramide的3位氮原子上的甲基对活性影响不大。而苯环上以电负性较强的三氟甲基取代的化合物(3c)抗神经炎症作用最强,表明6位苯环上引入取代基的电负性对神经细胞炎症抑制作用影响较大,取代基电负性越大,抗神经炎症作用就越强。同时,通过细胞毒性试验发现,所有受试化合物均无细胞毒性。以上研究结果表明,(+)-balasubramide和(+)-norbalasubramide及其衍生物是一类具有较好抗神经炎症作用且细胞毒性极低的化合物,其中三氟甲基取代的化合物(3c)的抗神经炎症作用较强,是一个较有研究潜力的先导化合物。
胡金凤, 宁娜, 薛薇, 张均田, 陈乃宏[8]2009年在《左旋黄皮酰胺抑制去血清所致神经细胞凋亡及其相关机制的研究》文中研究指明目的观察中药成分左旋黄皮酰胺对去血清所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用形态学观察及MTT法检测左旋黄皮酰胺对去血清所致PC12细胞存活的影响;采用流式细胞术检测左旋黄皮酰胺对PC12细胞凋亡的影响;采用Western blotting及共聚焦显微镜检测左旋黄皮酰胺对GSK-3β、Bcl-2、Bax表达的影响。结果左旋黄皮酰胺1,10μmol/L剂量组可以通过抑制去血清所致PC12细胞的凋亡而增加细胞的存活率,其机制是抑制GSK-3β的表达并增加Bcl-2/Bax的比值。结论左旋黄皮酰胺可能是通过抑制神经细胞损伤而改善学习记忆障碍。
侯软玲, 林军[9]2007年在《黄皮酰胺的研究进展》文中提出实验证明,黄皮酰胺能改善多种原因引起的记忆障碍,对学习记忆功能障碍大鼠在行为学和脑组织病理上有明显的保护作用[1];对胆碱神经系统功能有增强作用,而且能提高突触效能、促进新突触形成和抗神经细胞凋亡作用,还可以提高皮层、海马组织蛋白磷酸酶的活性。现就黄皮酰
侯软玲[10]2008年在《黄皮酰胺对糖尿病大鼠学习记忆障碍机制保护作用的研究》文中进行了进一步梳理目的:以雄性Wistar大鼠为研究对象,在链脲佐菌素STZ(Streptozotocin)诱导的大鼠糖尿病模型上,从行为学以及分子生物学等方面探讨糖尿病大鼠学习记忆障碍机制以及研究黄皮酰胺的保护作用。方法:利用链脲佐菌素(48mg/kg)制备大鼠糖尿病模型,并给予黄皮酰胺干预,给药3个月后,通过Morris水迷宫分析糖尿病大鼠在学习记忆行为学方面的改变;比较各组大鼠血糖和糖化血红蛋白的不同;通过免疫组化及RT-PCR等技术观察大鼠海马的HO(HO-1和HO-2)及COX-2等基因的表达。结果:①3个月后,与正常组相比,糖尿病模型组大鼠的血糖和糖化血红蛋白值明显升高(P＜0.01);而黄皮酰胺Clau(50,25mg/kg)治疗组大鼠的血糖和糖化血红蛋白值与糖尿病模型组相比没有显著性差异(P＞0.05);②Morris水迷宫结果表明,糖尿病大鼠在训练后第4天及第7天第一次穿越目标区域的时间延长、穿越目标区域的次数明显减少(P＜0.01),第一象限的时间和路程也明显降低(P＜0.01),表明糖尿病大鼠的学习记忆功能存在障碍;经Clau(50,25mg/kg)治疗后糖尿病大鼠的第一次穿越目标区域的时间明显缩短、穿越目标区域的次数明显增多、在第一象限的时间和路程成绩,与糖尿病模型组大鼠比较有明显提高(P＜0.01),表明Clau对糖尿病大鼠学习记忆功能有改善作用;③RT-PCR结果显示,糖尿病学习记忆功能障碍大鼠海马的HO-1、HO-2及COX-2 mRNA表达水平明显增加(P＜0.01);而Clau(50,25mg/kg)治疗组大鼠海马的HO-1、HO-2及COX-2 mRNA的表达水平明显降低(P＜0.01),表明Clau可明显抑制糖尿病学习记忆功能障碍大鼠海马的HO-1、HO-2及COX-2 mRNA的表达水平;④免疫组化结果表明,糖尿病学习记忆功能障碍大鼠海马HO-1和COX-2的表达明显升高(P＜0.01),表明HO-1和COX-2蛋白质的异常表达参与了糖尿病学习记忆障碍的过程,而Clau通过抑制HO-1和COX-2的蛋白质表达对糖尿病学习记忆障碍大鼠起到保护作用的。结论:黄皮酰胺对长期糖尿病造成的脑损伤具有一定的中枢保护作用,对糖尿病学习记忆障碍有明显的改善作用,Clau对糖尿病海马损伤保护作用的分子生物学机制可能与抑制HO-1、HO-2和COX-2的表达有关。
参考文献：
[1]. （-）黄皮酰胺的抗细胞凋亡作用及其作用机制研究[D]. 王润生. 中国协和医科大学. 2000
[2]. Baxα高表达PC12细胞系的建立及(-)黄皮酰胺抗细胞凋亡作用机制的研究[J]. 王润生, 张均田. 药学学报. 2000
[3]. (-)黄皮酰胺的抗老年痴呆作用[J]. 张均田, 段文贞, 刘少林, 王润生. 医药导报. 2001
[4]. 一种新型的抗老年痴呆剂:左旋黄皮酰胺的化学、生物学活性和作用机制研究[J]. 楚世峰, 张均田. 神经药理学报. 2014
[5]. 黄皮酰胺对高血压局灶性脑缺血-再灌注大鼠Bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的影响[J]. 蒋祝昌, 毕桂南, 石胜良. 中国危重病急救医学. 2005
[6]. （-）黄皮酰胺的促智机理及左右旋体作用的比较研究[D]. 段文贞. 中国协和医科大学. 1998
[7]. 黄皮叶中八元内酰胺类化学成分的全合成及其初步构效关系研究[D]. 李骏. 广东药科大学. 2016
[8]. 左旋黄皮酰胺抑制去血清所致神经细胞凋亡及其相关机制的研究[J]. 胡金凤, 宁娜, 薛薇, 张均田, 陈乃宏. 中药新药与临床药理. 2009
[9]. 黄皮酰胺的研究进展[J]. 侯软玲, 林军. 广西医学. 2007
[10]. 黄皮酰胺对糖尿病大鼠学习记忆障碍机制保护作用的研究[D]. 侯软玲. 广西医科大学. 2008