（大兴安岭呼中区人民医院检验科 165036）
摘要：探讨支原体的检验方法及临床意义。方法 抽选我院2015年5月至2017年2月患者标本146例，进行支原体检验回顾性分析。结果 146例患者通过支原体检验，查出支原体感染，非特异性尿道炎患者36例，支原体尿路感染38例，间质性膀胱炎29例，局限性外阴炎16例，脱屑性阴道炎综合征14例，妊娠合并支原体感染8例，老年人支原体肺炎5例。结论 了解支原体特性、检验方法及临床意义，对支原体感染引起的疾病的防治工作具有重大意义。
关键词：支原体；检验；临床意义
支原体是细胞外生存的最小微生物，是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3～0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状，分枝状等多种态。它不同于细菌，也不同于病毒，种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体，生殖支原体及发酵支脲解支原体属含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性[1]。
支原体检验是检查人体是否受到支原体的感染，为临床诊断与治疗支原体感染患者提供依据的一种检查方法。支原体只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮细胞表面的受体上，而不进入组织和血液。现抽选我院患者标本146例作为研究对象，进行回顾性分析，探讨支原体的检验方法及临床意义，阐述如下。
1一般资料
抽选我院2015年5月至2017年2月患者标本146例，进行支原体检验回顾性分析。本组中男性患者72例，女性患者54例，年龄23～63岁，平均年龄（36.5±3.7）岁。
2致病机理
致病支原体中，肺炎支原体起肺炎，人型支原体，解脲支原体和生殖器支原体主要泌尿生殖道感染。支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，支原体肺炎全年均可发病，以冬季多见，可有小流行，支原体肺炎是学龄前儿童及青年人常见的一种肺炎，支原体肺炎主要通过飞沫传播，潜伏期较长，可达2～3周，支原体肺炎虽然病程较长，肺部病变较重，炎症吸收较慢，但绝大多数预后都是良好的，病原为肺炎支原体，是一种介于细菌和病毒之间的微生物，无细胞壁结构，兼性厌氧，能独立生活的最小微生物。健康人吸入患者咳嗽，打喷嚏时喷出的口，鼻分泌物而感染。病原体通常存在于呼吸道纤毛上皮之间，不侵入肺实质，通过细胞膜上的神经氨酸受体位点，吸附于宿主呼吸道上皮细胞表面，抑制纤毛活动并破坏上皮细胞。合并症亦少，生殖器支原体感染是近年新明确的一种性接触传播疾病，成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分娩时感染，成人男性的感染部位在尿道黏膜，女性感染部位在宫颈，新生儿主要引起结膜炎和肺炎。
3检验方法及过程
3.1分离培养法
分离培养法是支原体检测的金标方法，其检测精确度最高。这种方法是从可疑的细胞培养体系中取样，并接种到最适宜支原体生长的琼脂平板上。如果样本中含有支原体，它们就会在这种琼脂平板上疯狂生长，最终形成明显可见的特征性菌群。分离培养法基本不会出现假阴性结果，因此被誉为支原体检验金标准。
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3.2DNA检测
DNA检测需要将可疑样品与指示细胞共同培养，因此一般需要几天时间。DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞，如果原样本中含有支原体，那么当细胞DNA被荧光染料染色时，就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。
3.3PCR法
PCR法检测支原体只需要几个小时，是最快但也是最不灵敏的支原体检测方法。该方法采用针对支原体DNA的引物用PCR检测可疑样本，其中PCR引物通常针对支原体的16SrRNA基因。在凝胶电泳过程中，支原体DNA会显示为特异性条带，以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体，但谨慎起见最好同时采用另一种检测方法进行验证。
3.4酶学检测和ELISA
酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中，在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化为ATP，随后能利用ATP发光的luciferase酶就可以指示支原体的存在。ELISA也能用于支原体检测，以ELISA法为基础的支原体检测一般使用针对支原体16SrRNA基因的带标记探针或抗体，来检测培养物中是否含有支原体[2]。
4结果
4.1相关疾病
146例患者通过支原体检验，查出支原体感染，非特异性尿道炎患者36例，支原体尿路感染38例，间质性膀胱炎29例，局限性外阴炎16例，脱屑性阴道炎综合征14例，妊娠合并支原体感染8例，老年人支原体肺炎5例。
4.2临床意义
（1）需要检查的人群：疑似有支原体感染的病人。
支原体阳性，见于支原体感染，可见于非淋球菌性尿道炎。
（2）异常结果 尿黄、尿道口微红、尿频、尿不尽、尿道痛，烧灼感、尿滴沥。
5结论
支原体是1898年Nocard等发现的一种类似细菌但不具有细胞壁的原核微生物，能在无生命的人工培养基上生长繁殖，直径50-300nm，能通过细菌滤器。支原体在过去曾称之为类胸膜肺炎微生物（pleuropneumonia-like organism，PPLO）。1967年正式命名为支原体。
支原体（mycoplasma）：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。基因数量为480。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。结构也比较简单，多数呈球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜，故具有较大的可变性。支原体的基因组多为双链DNA，散布于整个细胞内没有形成的核区或拟核。这种细胞内含有DNA、RNA和多种蛋白质，包括上百种酶。支原体可以在特殊的培养基上接种生长，用此法配合临床进行诊断。与泌尿生殖道感染有关的主要是分解尿素支原体和人型支原体两种，约有20-30%的非淋菌性尿道炎的病人，是由以上两种支原体引起的，是非淋菌性尿道炎及宫颈炎的第二大致病菌。在成年人的泌尿生殖道中分解尿素支原体和人型支原体感染率主要与性活动有关，也就是说，与性交次数的多少、性交对象的数量有关，不管男女两性都是如此。据统计女性的支原体感染率更高些，说明女性的生殖道比男性生殖道更易生长支原体。另外，分解尿素支原体的感染率要比人型支原体的感染率为高。
支原体感染临床症状表现为头痛、乏力、肌痛、鼻咽部病变、咳嗽、胸痛、脓痰和血痰，肺部X线表现和化验室检查如冷凝集试验等有助诊断。支原体感染使培养细胞慢慢枯萎，因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1～3个月就应该进行一次支原体检测[3]。将定期支原体检测常规化坚持下去，是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。了解支原体特性、检验方法及临床意义，对支原体感染引起的疾病的防治工作具有重大意义。
参考文献
[1]解丽娜，翁立姝，关园园.肺炎支原体检验的临床意义[J].家庭心理医生，2014：186-186.
[2]刘建萍，李连青.酶联免疫吸附法检测肺炎支原体IgM抗体及临床意义[J].实用医技杂志，2004，11（5）：562-563.
[3]薛琴.肺炎支原体实验室检测的方法及临床意义[J].中国社区医师：医学专业半月刊，2009，11（10）：130-131.
论文作者:刘静
论文发表刊物:《航空军医》2017年第15期
论文发表时间:2017/9/29
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