【摘要】目的 探讨乙型肝炎病毒e抗原阴性肝硬化患者检测血清病毒DNA水平的临床价值。方法 选择我院2016年6月至2017年10月收治的乙型肝炎病毒e抗原阴性肝硬化患者128例，分别运用普通PCR技术和磁珠法高敏感试剂盒检测HBV DNA阳性率。结果 普通荧光定量检测HBV DNA阳性时未抗病毒治疗组的检出率显著高于抗病毒治疗组，但差异无统计学意义（P>0.05）；两种方法HBV DNA总检出率在抗病毒组与未抗病毒组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 慢性乙型肝炎后肝硬化患者在接受抗病毒治疗的过程中，当常规检测不能再检出HBV DNA时，建议采用高敏感的方法确定患者是否还存在低水平的HBV DNA复制，对临床治疗具有指导意义，减少肝硬化的发生。
【关键词】乙型肝炎；病毒e抗原阴性；肝硬化；血清病毒DNA；临床意义
To study the clinical significance of detecting serum viral DNA level in patients with hepatitis B virus E antigen negative cirrhosis
Objective To investigate the clinical value of detecting serum viral DNA level in patients with hepatitis B virus E antigen negative cirrhosis. Methods 128 cases of hepatitis B virus E antigen negative cirrhosis admitted to our hospital from June 2016 to October 2017 were tested for positive rate of HBVDNA using normal PCR and magnetic beads high sensitivity reagent kits.
Results The detection rate of non-antiviral therapy group was significantly higher than that of antiviral treatment group, but there was no significant difference(P> 0.05); The total detection rate of HBVDNA in the two methods was statistically significant between the antiviral group and the non-antiviral group(P<0.05）。Conclusion In patients with liver cirrhosis after chronic hepatitis B, when HBVDNA can no longer be detected during the course of antiviral treatment, it is recommended to use a highly sensitive method to determine whether there is still a low level of HBVDNA replication in patients, which is of guiding significance for clinical treatment. Reduce the incidence of cirrhosis.
[Keywords] Hepatitis B; Virus E antigen negative; Liver cirrhosis; Serum viral DNA; Clinical significance
肝硬化临床常见消化系统疾病的一种。慢性乙型肝炎后肝硬化在我国肝硬化分类中位居首位。抗病毒药物于最近10余年陆续上市，给HBV感染慢性乙型肝炎患者带来了福音，抗病毒治疗不但可以对患者体内病毒的复制发挥了明显的抑制效果，更进一步阻止了肝纤维化的发展，使肝硬化的形成进度缓慢[1]。对HBeAg阴性肝硬化患者无论ALT水平高低只要检出HBV DNA者均建议抗病毒治疗，因此，抑制HBV复制对肝硬化的治疗和延缓均意义重大。临床检测HBV DNA对于指导慢性乙型肝炎的治疗具有很重要的意义。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆通过对HBeAg阴性肝硬化患者的HBV DNA表达水平进行分析，并探讨其在病情发展中的意义，现做如下报告：
1资料与方法
1.1一般资料 选择我院2016年6月至2017年10月收治的乙型肝炎肝硬化患者128例，其中男性72例，女性56例，年龄18-72岁，平均年龄（51.9±7.3）岁；所有患者均为HBeAg阴性，HBsAg阳性，其中89例采用核苷酸类似药物抗病毒治疗，39例未采用抗病毒治疗, 两组患者在年龄、性别等一般资料方面比较，差异无统计学意义，P>0.05，具有可比性。
1.2方法
1.21.仪器与设备 仪器主要为AB7900HT荧光定量PCR仪和AB Stepolqepluse荧光定量PCR仪。
1.2.2检测方法 采用实时荧光定量PCR技术进行普通HBV DNA定量检测，试剂盒由上海之江生物科技股份有限公司提供，试剂盒检测下限设为1000IU/mL，磁珠提取高敏感HBV DNA检测，采用湖南圣湘生物技术公司生产试剂盒，试剂检测下限设为20IU/mL。普通HBV DNA检测，取血清50ul加入等体积的DNA抽提液100℃煮沸10min，离心12000转/min，半径为5.5cm，离心10min，取上清液2mL进行PCR检测，试剂配比及反应条件严格按照试剂说明书进行。磁珠高敏HBV DNA采用自动核酸纯化仪进行，具体操作严格按照试剂说明书进行。
1.3统计学处理 运用SPSS17.0统计学软件分析处理所得数据，并计数资料率的比较，采用卡方检验，当P﹤0.05时，认为差异有统计学意义。
2结果
2.1HBeAg阴性慢性乙型肝炎后肝硬化患者血清HBV DNA检测结果 运用普通PCR技术检测，128例患者中，39例HBV DNA阳性，占30.47%；对其余89例运用磁珠法高敏感试剂盒检测，43例HBV DNA阳性；两种方法共检出82例HBV DNA阳性，检出率64.06%。
2.2抗病毒和未抗病毒治疗患者HBV DNA检测结果比较 89例经过抗病毒治疗患者中，普通荧光定量试剂盒检出HBV DNA阳性者25例，占28.90%，其余64例采用磁珠提取高敏感试剂检出29例HBV DNA阳性，共计检出54例，检出率为60.67%。39例未抗病毒治疗患者普通荧光定量试剂盒检出HBV DNA阳性者14例，占35.90%；其余25例运用磁珠提取的高敏感试剂又检出18例HBV DNA阳性，共计检出32例，检出率82.05%。普通荧光定量检测HBV DNA阳性时未抗病毒治疗组的检出率显著高于抗病毒治疗组，但差异无统计学意义（P>0.05）；两种方法HBV DNA总检出率在抗病毒组与未抗病毒组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）。
3讨论
HBeAg是代表病毒复制免疫指标的一种，当体内HBeAg表达时，说明存在HBV DNA的复制，当体内病毒复制能力低或静止时，为HBeAg转阴时[2]。本研究结果显示，运用普通PCR技术检测，128例患者中，39例HBV DNA阳性，占30.47%；对其余89例运用磁珠法高敏感试剂盒检测，43例HBV DNA阳性；两种方法共检出82例HBV DNA阳性，检出率64.06%，提示普通荧光定量PCR存在漏检或是敏感度过低；普通荧光定量检测HBV DNA阳性时未抗病毒治疗组的检出率显著高于抗病毒治疗组，但差异无统计学意义（P>0.05）；两种方法HBV DNA总检出率在抗病毒组与未抗病毒组间比较，差异有统计学意义（P<0.05），提示抗病毒治疗可预防肝炎纤维化的形成，降低肝硬化发生率，我国慢性乙型肝炎防治指南都对肝硬化的治疗有了明确的规范，对肝硬化患者如发现体内存在病毒复制应尽早采用抗病毒治疗[3]。普通HBV DNA定量试剂盒在检测低水平的HBV DNA时存在一定的漏检，建议在有条件的实验室采用磁珠提取的高敏感试剂进行HBV DNA检测。
综上所述，慢性乙型肝炎后肝硬化患者在接受抗病毒治疗的过程中，当常规检测不能再检出HBV DNA时，建议采用高敏感的方法确定患者是否还存在低水平的HBV DNA复制，对临床治疗具有指导意义，减少肝硬化的发生。
参考文献
[1]亚太肝病学慢性乙型肝炎治疗共识工作组.亚太地区慢性乙型肝炎治疗共识(2012最新版)[J]临床肝胆病杂志，2012，28:1-21.
[2] 沈瞍，龙璐，邓中平，等．新型国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的质量评价[J]中华检验医学杂志，2013，36：280-285．
[3]谢蕾，潘克女，骆欣，等.乙型肝炎病毒e抗原阴性肝硬化患者检测血清病毒DNA水平的临床意义[J].国际流行病学传染病学杂，2014，41（3）：213-214.
论文作者:陈涛
论文发表刊物:《世界复合医学》2018年第08期
论文发表时间:2018/10/30
标签：抗病毒论文; 检出论文; 肝硬化论文; 乙型肝炎论文; 患者论文; 阳性论文; 定量论文; 《世界复合医学》2018年第08期论文;