段新芬[1]2003年在《补肾化痰，益气活血法对脑缺血酶学、神经生长因子表达影响的实验研究》文中研究指明目的：探讨补肾化痰，益气活血法预防缺血性中风的立法依据，并科学论证其对脑缺血损伤的预防性神经保护作用和作用机理。方法：采用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血损伤模型，运用形态学、生物化学、免疫组织化学等方法，从整体、细胞、分子水平动态观察补肾化痰，益气活血法对脑缺血损伤的预防性神经保护作用和作用机理。结果：以补肾化痰，益气活血法确立的地黄饮子加减中药能显着降低缺血脑组织MDA含量；保护缺血脑组织Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活性；提高缺血脑组织的SOD活性；增强缺血脑组织NGF的表达。结论：补肾化痰，益气活血法是预防缺血性中风的重要原则。依法而立的地黄饮子加减对脑缺血损伤有良好的保护作用。其保护机理可能与其防治脑水肿，抗脂质过氧化反应，增强缺血后NGF的表达有关。这一研究结果科学论证了中药复方预防缺血性中风的可行性及可贵前景。
徐伟[2]2014年在《益气活血法与补肾生髓法对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响》文中提出目的本研究基于中医“气血—脑髓”、“肾精—脑髓”相关理论，以神经干细胞增殖分化Notch信号调控通路为切入点，建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型，通过益气活血法和补肾生髓法及其代表方药对模型大鼠进行干预，观察模型大鼠Notch信号调控通路基因差异及差异蛋白的表达变化，探讨益气活血法和补肾生髓法的作用机制，为临床治疗缺血性中风提供实验依据。方法健康Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，雄性，月龄4个月，体重280-320g。随机分为假手术组、模型组、益气活血组和补肾生髓组，每组15只。改良线栓法建立MCAO/R大鼠模型，同时以益气活血法代表方-脑络欣通和补肾生髓法代表方补肾生髓方取中等剂量，分别按8.54g/kg、12.87g/kg，益气活血组和补肾生髓组在复制MCAO/R模型前30min灌胃给药1次，持续给药7天，假手术组和模型组按同样方法予以等量生理盐水灌胃。采用基因芯片技术测定MCAO/R各组大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路基因表达变化。免疫组化Envision二步法检测各组大鼠缺血侧额顶叶皮质区β-catenin、Krt1蛋白的平均光密度值的表达变化。Western-Blot检测Nr4a2的相对灰度值的表达变化。数据采用SPSS17.0进行统计分析。统计图表绘制采用EXCEL2007软件。结果基因芯片共检测Notch信号通路91个基因。与假手术组比较，模型组14种基因（Axin1、Ctnnb1、Fzd2、Gsk3b、Krt1、Lmo2、Lrp5、Map1b、Ncstn、Notch4、Ptcra、Smo、Supt6h、Tead1）表达有显着差异，其中Notch4基因表达显着下调(P<0.05)，其它13种基因表达显着上调(P<0.05)。与模型组比较，益气活血组17种基因（Cflar、Chuk、Ctnnb1、Fosl1、Fzd4、Hes1、hr、Krt1、Map2k7、Notch3、Notch4、Nr4a2、Pdpk1、Psen1、Rbpjl、Rfng、Zic2）表达有显着差异，其中Ctnnb1、Krt1、Nr4a2基因表达显着下调(P<0.05)，其它14种基因表达显着上调(P<0.05)。与模型组比较，补肾生髓组20种基因（Aes、Cflar、Chuk、Ctnnb1、Fos、Fzd1、Fzd2、Fzd4、Hey1、hr、Map2k7、Mycl1、Notch4、Nr4a2、Numb、Pdpk1、Rfng、Sel1l、Stat6、Tead1）表达有显着差异，其中Ctnnb1、Fzd1、Fzd2、Hey1、Mycl1、Nr4a2、Sel1l、Tead1基因表达显着下调(P<0.05)，其它12种基因表达显着上调(P<0.05)。与补肾生髓组比较，益气活血组7种基因（Cflar、Ctnnb1、Fzd2、Fzd5、Hes1、Mycl1、Zic2）表达有显着差异，其中Fzd2、Fzd5、Hes1、Mycl1、Zic2基因表达显着上调(P<0.05)，Cflar、Ctnnb1基因表达显着下调(P<0.05)。阴性对照组β-catenin、Krt1蛋白均未见表达，假手术组β-catenin、Krt1蛋白可见表达,主要表达于神经细胞胞浆。与假手术组比较，模型组β-catenin和Krt1蛋白表达显着升高(P<0.05)；与模型组比较，益气活血组β-catenin和Krt1蛋白表达显着降低(P<0.05)，补肾生髓组β-catenin蛋白表达显着降低(P<0.05)；益气活血组β-catenin蛋白表达显着低于补肾生髓组(P<0.05)。与假手术组比较，模型组Nr4a2蛋白表达显着增加(P<0.01)；与模型组比较，益气活血组和补肾生髓组Nr4a2蛋白表达显着减少(P<0.01)；与补肾生髓组比较，益气活血组Nr4a2蛋白表达显着减少（P<0.01)。结论在前期研究证实益气活血法能够促进局灶性脑缺血后神经干细胞的增殖分化，补肾生髓法具有促进脑缺血后突触重塑和神经细胞轴突再生作用的基础上，本实验发现益气活血法及其代表方脑络欣通和补肾生髓法及其代表方补肾生髓方能影响脑缺血再灌注后Notch信号调控通路部分基因表达，能通过降低皮质β-catenin、Krt1和Nr4a2蛋白的表达，对Notch信号通路产生调控作用，进而对脑缺血后内源性NSCs增殖分化产生影响。
李文英[3]2003年在《“补肾化痰益气活血”法预防脑缺血神经保护作用的实验研究》文中认为本文系统回顾和总结了古代医家对脑缺血的认识和现代医学对脑缺血的研究进展，认为本病的基本病机是肾精亏虚，痰阻血瘀，属本虚标实之证。本虚为肾精不足，髓海空虚，标实为痰浊瘀血阻窍，而且本虚与标实常可相互影响，互为因果，形成病理上的恶性循环。基于此，我们根据脑缺血的病因病机，结合导师多年的临床经验，确立了“补肾化痰，益气活血”的治疗法则，并将古方地黄饮子予以化裁，用以预防脑缺血。 为进一步探讨加减地黄饮子预防脑缺血的作用机理进行了动物实验研究。本实验采用栓线法制作局灶性大鼠脑缺血模型(MCAO)，观察脑缺血24小时加减地黄饮子对一氧化氮合酶(NOS)活性，一氧化氮(NO)和血糖含量的影响，免疫组化法观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)的表达。结果显示：加减地黄饮子能降低脑缺血后大鼠脑组织NOS活性，减少NO的生成和释放；抑制脑缺血后血糖的应激性升高；增强脑组织中bFGF及FGFR1的表达，从而保护神经组织并促进其功能修复。
李霁敏[4]2014年在《两种中医治法对脑缺血再灌注大鼠神经干细胞增殖分化wnt/β-catenin信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响》文中提出目的：本实验基于“肾精和脑髓”藏象理论与缺血性脑卒中“气虚血瘀”病机理论，应用新安名老中医经验治法益气活血法和补肾生髓法及其代表中药复方，研究局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内源性神经干细胞增殖分化Wnt/β-catenin信号通路变化及其调控机制,部分揭示“肾精和脑髓”藏象理论及“气虚血瘀”病机理论物质基础与调控的生物学机制及“补肾生髓法”与“益气活血法”的作用机制，为中风的治疗和康复技术开发以及药物的研究思路与方法提供实验依据。方法：健康雄性SD大鼠136只，随机分为正常组，模型组，补肾生髓法组，益气活血法组，每组又分为再灌注3d、7d2组，每组17只。根据Zea Longa法加以改进建立MCAO/R动物模型。实验一选取大鼠新鲜缺血侧额顶叶皮质，采用基因芯片技术分别检测3d组和7d组MCAO/R大鼠缺血侧额顶叶皮质wnt/β-catenin信号通路基因表达的变化，用ΔΔCt统计方法分析结果。实验二选取大鼠内固定的脑组织，做脑部冠状切片，采用免疫组织化学二步法测定大鼠脑皮质wnt7a和mmp7蛋白的表达，用图像分析系统和SPSS17.0软件处理，两组之间比较用t检验分析结果。结果：1实验一结果基因芯片检测结果显示再灌注3d、7d，MCAO/R大鼠缺血侧脑皮质wnt/β-catenin信号转导通路上的多个基因表达发生变化，3d组模型与正常比较，下调基因有TCF3,wnt10a, wnt2, wnt7a, wnt9a，7d组模型与正常比较，上调基因有Mmp7, Wnt3a，下调基因有vangl2, DKK1, fzd2, myc,nkd1,sfrp5,wisp1, wnt7a。经益气活血方和补肾生髓方干预后，wnt/β-catenin信号转导通路上的不同功能多个基因发生上调下调的变化，3d益气活血组与模型组比较，上调基因有wnt7a；3d补肾生髓组与模型组比较，上调基因有RGD1561440,TCF3,wnt1,wnt7a,wnt9a,wnt9b；3d益气活血组与补肾生髓组比较，上调基因有Gsk3a,sfrp1,wnt9a,下调基因有wnt7b。7d益气活血组与模型组比较，上调基因有wnt2，下调基因有Fzd9, Mitf, Mmp7, Wnt1；7d补肾生髓组与模型组比较，上调基因有Vangl2,Sfrp2, Tle1, Wnt7b,下调基因有Cby1, Wnt8b, Actb；7d益气活血组与补肾生髓组比较，上调基因有Dkk3, Mmp7,RGDC，下调基因有Wnt8b,Wnt9a。并且再灌注7d时的基因变化数量比再灌注3d时增多。2实验二结果免疫组织化学实验结果显示，与3d正常组比较，3d模型组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度明显增加（P<0.01，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组3d比较，3d益气活血组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度显着增加（P<0.01，P<0.01或P<0.05，P<0.05）；与模型组3d比较，3d补肾生髓组wnt7a平均光密度值增加（P<0.05），阳性面积增加无统计学意义（P>0.05），mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05）；3d益气活血组与3d补肾生髓组比较，wnt7a阳性面积增加（P<0.01），平均光密度值增加无统计学意义（P>0.05），mmp7表达的阳性面积和平均光密度值差异不明显（P>0.05，P>0.05）。与正常组7d比较，7d模型组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组7d比较，7d益气活血组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组7d比较，7d补肾生髓组wnt7a平均光密度值增加（P<0.05），阳性面积增加无统计学意义（P>0.05），mmp7阳性面积和平均光密度值增加（P<0.05，P<0.05）；7d益气活血组与7d补肾生髓组比较，wnt7a阳性面积增加（P<0.05），平均光密度值增加无统计学意义（P>0.05），mmp7表达的阳性面积和平均光密度值增加（P<0.05，P<0.05）。益气活血组和补肾生髓组均能不同程度增加wnt7a的表达，降低mmp7的表达，但是在不同灌注时间段两组复方对指标的影响存在差异。结论：课题组在前期开展了一系列益气活血法和补肾生髓法防治缺血性脑卒中的理论和实验研究，论证了两种治法可以参与到脑缺血后炎症反应、凝血纤溶系统、细胞凋亡、神经可塑性等多个方面发挥脑保护的作用，并最终可促进神经干细胞的增殖分化。本实验研究在前期工作的基础上，发现益气活血方组、补肾生髓方组在再灌注两个时间点能使Wnt/β-catenin信号转导通路的多个基因表达发生变化，上调基因以wnt配体，转录因子，调控神经、血管和细胞发育分化的基因为主，下调基因以β-catenin摧毁器组分、拮抗因子、降解细胞外基质基因以及与细胞周期和凋亡相关的基因为主。并且两种中药复方能增强脑缺血侧额顶叶皮质wnt7a的表达，降低mmp7表达，但在不同灌注时间点存在差异。免疫组织化学的实验结果与PCR芯片的结果基本吻合，两种复方可能通过调节wnt7a和mmp7的表达，调控Wnt/β-catenin信号转导通路的功能，促进局灶性脑缺血再灌注后内源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖分化。
郭明冬[5]2007年在《补肾益气活血法治疗血管性痴呆的临床观察与实验研究》文中研究表明随着人们寿命的延长，血管性痴呆的发病率呈明显上升趋势，已成为人类衰老过程中常见的难治性疾病，而中西医均缺乏理想的治疗效果。积极开展对本病的研究具有重要的现实意义。本研究以中医理论为指导，对治疗该病的补肾益气活血法进行了临床观察和实验研究。1临床研究目的：在前期研究的基础上，进一步规范化观察补肾益气活血法治疗轻度血管性痴呆的临床疗效，并探讨其部分作用机制。方法：采用区组随机、双盲、对照的设计原则，将入选病例70例分为治疗组(50例)和对照组(20例)。治疗组给予口服参芎补肾胶囊，每次5粒，每天3次；对照组给予口服吡拉西坦胶囊(由吡拉西坦片经重新包装而成)，每次5粒，每天3次。两组均观察用药2个月，1／3病例随访1个月。主要观察患者的认知能力(MMSE)、日常生活活动能力(ADL)、神经功能缺损(NFDS)、中医证候、生存质量(WHOQOL-SF36)、脑电图、脑神经递质(乙酰胆碱和单胺类神经递质)及相关安全性指标。结果：补肾益气活血法对轻度VaD患者在认知能力、日常生活活动能力、中医证候叁方面的总有效率分别为74.46％、80.85％和85.11％，其中中医证候方面治疗组优于对照组(P＜0.05)。对以上叁方面的模糊综合疗效评价结果显示治疗组明显优于对照组。结果还显示：该治法对患者总体认知能力及除语言外的各项积分均有明显改善作用，其中对总积分及计算积分的改善作用较对照组明显(P＜0.05)；对日常生活活动能力ADL、IADL积分有明显改善作用，其中对PSMS积分的改善作用较对照组明显(P＜0.05)；对中医证候积分改善明显，且优于对照组(P＜0.05)；对患者总体生存质量改善明显，且优于对照组(P＜0.01)，对生存质量各维度积分均有明显改善作用，且对生理功能(PF)、生理职能(RP)、活力(VT)诸维度的改善作用优于对照组(P＜0.05)；对脑神经递质乙酰胆碱、多巴胺和去甲肾上腺素改善明显，且对乙酰胆碱、去甲肾上腺素的改善作用较对照组明显(P＜0.05)；对患者神经功能缺损积分和脑电图也有一定改善作用。安全观测显示该治法所用药物安全、无毒副作用，适宜患者长期服用。结论：补肾益气活血法对轻度VaD有较好的临床治疗效果，对患者认知能力、日常生活活动能力、中医证候、生存质量、神经功能缺损、脑电图、脑神经递质诸方面都有较好改善作用。其部分作用机制与改善患者脑内部分神经递质水平有关。2实验研究目的：进一步探讨补肾益气活血法对血管性痴呆的部分作用机制。方法：实验采用bEnd．3小鼠脑微血管内皮细胞株制作缺氧复氧VaD病理模型。取换培养液后的bEnd．3脑微血管内皮细胞株，随机分为7组，除正常对照组外，分别加上适量事先制备的正常大鼠血清或含药血清(参芎补肾含药血清或吡拉西坦含药血清)，孵育24小时后，PBS冲洗一遍，再换上新的培养液，分别加上述含药血清，放置于自制的缺氧袋中，缺氧7小时后复氧1小时，然后取上清检测NO、ET和VEGF的含量。结果：对NO、ET的检测结果表明，模型组bEnd．3脑微血管内皮细胞株分泌的NO较正常对照组减少，而ET则增多，NO／ET比值变小，差异均有显着的统计学意义(P＜0.01)。参芎补肾组和吡拉西坦组对缺氧复氧造成bEnd．3脑微血管内皮细胞的缩血管功能增强有明显的改善作用(P＜0.01或0.05)，能够促进bEnd.3脑微血管内皮细胞株分泌NO，而减少ET的分泌，提高NO／ET比值，其中参芎补肾A、B、C叁个剂量组的改善作用明显优于吡拉西坦(P＜0.01或0.05)。对VEGF的检测结果表明，模型组bEnd．3脑微血管内皮细胞株分泌的VEGF较正常对照组明显减少(P＜0.01)。与模型组相比，参芎补肾与吡拉西坦含药血清均有明显促进缺氧bEnd．3脑微血管内皮细胞株分泌VEGF的作用(P＜0.01)；但参芎补肾各剂量组的改善作用均明显优于吡拉西坦(P＜0.01)。结论：补肾益气活血法能够促进缺氧复氧后脑微血管内皮细胞释放NO、VEGF，同时减少释放ET，从而改善血管内皮功能状态、促进血管再生，并直接和间接地保护脑神经。这可能是该治法治疗血管性痴呆的作用机制之一。
孙志升[6]2008年在《清热解毒益气活血法治疗2型糖尿病并脑梗塞的理论与临床研究》文中研究指明目的:探讨2型糖尿病并脑梗塞的病机和治法,提出2型糖尿病并脑梗塞的主要病机为“气虚血瘀-瘀热生毒-毒损脑络”,其中“毒损脑络”为其病机关键,清热解毒、益气活血法可能成为改善糖尿病并脑梗塞疾病结局的有效疗法的假说;观察中药复方益消复瘫汤治疗2型糖尿病并脑梗塞的临床疗效,探讨其对2型糖尿病并脑梗塞进行干预治疗的生物学机制,为中医药防治2型糖尿病并脑梗塞提供新的理论依据和有效方药。方法:1.理论研究方法:采用文献学,逻辑分析方法对2型糖尿病并脑梗塞的病理机制进行理论探讨;2.临床研究方法:以30例2型糖尿病并脑梗塞患者为研究对象,口服益消复瘫汤8周,按积分记录症状体征,检测疗效指标:包括中医证候疗效,神经功能缺损(NIHSS)水平,认知功能障碍(MMSE)水平,日常生活活动能力(Barthel),生存质量评估(QLI),血糖,糖化血红蛋白(HbA1c),胰岛素敏感指数,血脂指标(TC、TG、HDL、LDL),血液流变指标(全血比粘度、血浆比粘度、纤维蛋白原),内皮功能(ET、NO),血清炎性指标(C反应蛋白)等。同时监测血、尿、大便常规、肝、肾功能等安全性指标。并与30例补阳还五汤对照组作比较研究。结果:1.理论研究结果根据导师学术思想,认为2型糖尿病并脑梗塞是在2型糖尿病的基础上发展而来,脾气亏虚是2型糖尿病的主要病机,气虚日久瘀血内阻于络脉,瘀久化热生毒,毒损脑络,出现糖尿病并脑梗塞。所以气虚血瘀是2型糖尿病并脑梗塞的基本病机,毒损脑络是其病机关键。本着标本同治的原则,以“络脉”和“毒邪”为重点,以清热解毒,益气活血为治法。临床应用强调清热解毒,活血通络;培补元气,调理气血;虫类走窜,搜邪剔络等方药的应用;尤其重视药物归经入脑、兼顾标本两病的药物作用和清热解毒药的层次性选择问题。2.临床研究结果经益消复瘫汤治疗8周后,患者的中医证候积分较治疗前明显下降,半身不遂、肢体麻木、口干、多饮、多尿、气短、乏力、自汗改善最为明显(P<0.01),口舌歪斜积分也有下降(P<0.05)。神经功能缺损水平,认知功能障碍水平,日常生活活动能力等各项检测指标明显改善(P<0.01),综合生活质量明显改善(P<0.01)。血糖水平、糖化血红蛋白及胰岛素敏感性明显改善,血糖、糖化血红蛋白较治疗前明显下降(P<0.01),胰岛素敏感指数升高(P<0.05);血液粘度较治疗前明显下降(P<0.01);降低血脂水平,以TC最明显,治疗后血脂水平明显下降(P<0.01),LDL也有下降(P<0.05)。血管内皮功能得到明显改善,血浆ET水平明显降低(P<0.01),NO水平明显上调(P<0.01)。降低C反应蛋白水平,治疗前后有显着性差异(P<0.01)。统计表明,治疗组在改善中医证候、神经功能缺损、改善认知功能、日常生活能力、血糖、糖化血红蛋白、胰岛功能、血流变、血脂、内皮功能、清除血清炎性标记物等各项指标方面均优于补阳还五汤对照组,具有显着性差异(P<0.05)。结论:经益消复瘫汤治疗8周后,2型糖尿病并脑梗塞患者从临床症状到各项化验指标都有明显改善,具体表现在:减轻和改善神经系统和内分泌系统的临床症状和体征;改善血糖、糖化血红蛋白、胰岛功能、血液流变学状态及血脂水平;保护血管内皮细胞功能;减轻炎症反应。统计表明,治疗组各项指标改善情况均优于补阳还五汤组,具有显着性差异(P<0.05)。表明益消复瘫汤具有确切的糖尿病及脑血管治疗保护作用。本研究证实,气虚血瘀、毒损脑络是2型糖尿病并脑梗塞的主要病机,清热解毒、益气活血通络是2型糖尿病并脑梗塞的重要治法。益消复瘫汤具有显着的临床疗效,是治疗2型糖尿病并脑梗塞的有效复方。
韩义皇[7]2017年在《益气活血法对MCAO-R大鼠海马神经干细胞增殖分化JAK-STAT信号通路的影响》文中研究指明目的通过益气活血法效验方脑络欣通治疗脑缺血再灌注(MCAO-R)模型大鼠的实验研究,探究益气活血法对MCAO-R大鼠模型JAK-STAT信号转导通路和神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响,重点从细胞分子层面阐述益气活血法复方脑络欣通的作用机制,通过多层面、多途径的研究进一步完善益气活血法复方脑络欣通的生物学调控网络。方法1.采用线栓法建立大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO-R)大鼠模型。分别从整体、系统、器官、组织、细胞等层面观察和评估MCAO-R模型。具体方法包括:观察记录各组动物术前和术后7天的基本生理体征及体重变化。通过对缺血开始后5h、1d、3d、7d几个关键时间点的MCAO-R模型大鼠进行神经功能缺损评分,观察评估大鼠神经系统功能缺失情况。取正常大鼠和模型1d大鼠端脑,通过TTC染色观察脑组织大脑中动脉供血区缺血情况,计算缺血面积百分比,验证模型成模情况。通过鼠脑海马层面冰冻切片Nissl染色,观察MCAO-R模型大鼠海马锥体细胞层病理形态变化。2.通过整体、系统、器官、组织、细胞等层面观察和评估益气活血效验方脑络欣通的药效。具体方法包括:观察记录各组动物造模前及术后7天基本生理体征及体重变化。通过对造模后5h、1d、3d、7dMCAO-R模型大鼠进行神经功能缺损评分,观察评估大鼠神经系统功能恢复情况。通过TTC染色观察缺血后正常大鼠及1d、3d、7d大鼠脑组织大脑中动脉供血区缺血情况,计算缺血面积百分比、进行统计分析,验证大鼠脑缺血改善情况。通过鼠脑海马层面石蜡切片HE染色,观察MCAO-R模型大鼠海马锥体细胞层病理形态变化。3.通过免疫荧光染色检测nestin、NF-H、GFAP、Gc蛋白表达,观察给药7d大鼠海马各区神经干细胞增殖分化情况。采用信号通路PCR基因芯片按Fold-Change值>2或<-2标准筛选 JAK-STAT 通路差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)。WB蛋白电泳对筛选出的差异基因FCGR1α、PRLR、IFGNR1、SOCS1进行蛋白水平的验证。结果1.MCAO-R大鼠模型具有气虚血瘀症状,造模手术后前3天体重持续减轻,第4天开始逐渐增长,正常组和假手术组大鼠组间体重指数比较,术后第1、2、4、5、6、7天,组间差异有统计学意义(P≤0.05);术后第3天组间差异有统计学意义(P≤0. 01)。模型组大鼠神经功能缺损明显,与假手术组比较差异有显着性意义。选择评分1-3分的大鼠纳入实验。TTC染色MCAO-R模型大鼠脑缺血面积在术后5h最大,随时间推移逐渐减小,与假手术组比较,各个时间点组间差异均极显着(P<0. 001)。NISSL染色观察到MCAO-R模型大鼠海马病理变化明显。2.给药组MCAO-R大鼠模型气虚血瘀症状较模型组改善快。给药组大鼠体重,在造模手术后持续增长,第3天涨幅增大,与模型组和假手术组大鼠组间体重指数比较,术后第1、3天,组间差异有统计学意义(P≤0.05)。神经功能缺损在第7天取材前与模型组相比,差异无统计学意义。造模术后第7天TTC染色显示,脑缺血面积,给药组和模型组比较,P=0.002<0. 01,差异有统计学意义。HE染色显示,模型组细胞排列散乱,锥体细胞数量减少,胶质细胞增生明显;给药组锥体细胞排列比较规则,在多个区域数量明显增多,甚至有迁移趋势,偶见胶质细胞。说明脑络欣通可能有促进锥体细胞增殖、迁移,调控胶质细胞分化的作用。2.通过JAK-STAT信号通路PCR基因芯片检测,按Fold-Change值>2或<-2标准得到以下差异表达基因:FCGR1α、PRLR、IFGNR1、SOCS1、IL10rα。WB蛋白电泳对筛选出的差异基因FCGR1α、PRLR、IFGNR1、SOCS1进行蛋白水平的验证,得到给药组PRLR蛋白与模型组有显着性差异的结果。通过免疫荧光染色检测nestin、NF-H、GFAP、Gc蛋白表达,观察到给药7天nestin、NF-H、GFAP、Gc阳性表达明显增加,各个海马区表达量有所不同。结论1.通过线栓法成功建立制作了 MCAO-R大鼠模型,为后续试验提供可靠的研究基础。2.益气活血法效验方脑络欣通中等剂量灌胃给药7天时,能够促进MCAO-R大鼠整体机能恢复、促进其神经运动功能恢复、促进其脑缺血面积减小,改善MCAO-R大鼠海马区病理改变对MCAO-R大鼠脑损伤有治疗作用。3.益气活血法效验方脑络欣通可能通过抑制MCAO-R模型大鼠JAK-STAT信号转导通路中PRLR蛋白的表达调控MCAO-R模型大鼠海马区神经干细胞的增殖分化迁移,促进脑缺血后神经功能的恢复。
许文辉[8]2002年在《益气活血法治疗缺血性中风急性期临床研究》文中指出缺血性中风，是临床常见病，其发病率和致残率均很高，严重威胁者人民的健康。因此开展对缺血性中风的研究，减少缺血性中风的致残率是医学研究的一项重要课题。本文的目的旨在通过对缺血性中风急性期临床辨证分析，发现其规律，并在此基础上，对益气活血法治疗缺血性中风急性期进行研究，观察临床疗效，并采用现代科学技术指标，对其治疗机理及防治缺血性中风作初步探讨。辨证规律研究部分通过对204例患者临床辨证分型，结果发现，气虚血瘀型所占比例最大，约为46.08%，同时发现，既往疾病，伴发疾病及合并症中以高血压病、冠心病、高血脂、糖尿病为多。疗效观察部分对辨证为气虚血瘀的60例患者，进行随机分组，治疗组40例，应用自拟益气活血消栓汤。对照组20例，用低分子右旋糖酐治疗，治疗28天，采用全国第二次脑血管病学术会议制定的功能缺损 评定标准进行评定，结果，治疗组总有效率87.5%，对照组55%，两组间有统计学差异（P＜0.05）两组治疗前后神经功能缺损评分变化，发现治疗组积分减少明显多于对照组(P＜0.05)二组临床主要症状改善情况方面，治疗组和对照组均存在显着性差异（P＜0.05-P＜0.01）。实验室指标测定部分：对益气活血法对脂代谢，血液动力流变学、微循环的影响进行了观察，并同低分子右旋糖酐进行了对照分析，结果表明，益气活血消栓汤可降低血清胆固醇，甘油叁脂，低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白，同时可降低全血粘度，血浆粘度，红细胞刚性指数。对微循环障碍有明显改善作用。而对照组除对低切全血粘度有显着改善外，余无明显变化。本研究结果提示：益气活血法不仅可以明显，改善神经功能缺损，保护脑缺血引起的损伤，又可改善缺血性中风的病理基础，推测其与以下因素有关：（1）通过改善血液粘稠度，降低全血粘度，减少红细胞聚集性，增强红细胞变形能力，改善血液高粘状态，促进微血管开放数目增加，保护微血管内皮细胞，对抗氧自由基，减轻脑水肿。（2）通过改善脂代谢，血液流变性及微循环，改善脑组织供血供氧，调节失衡，使诱发缺血性中风病的因素不复存在，起到防治动脉粥样硬化作用，此作用是体现了中医辨证论治的优势，益气活血法，作为缺血性中风的有效治疗方法，值得进一步探讨和研究。
赵福臣[9]2013年在《温肾益气活血法治疗缺血性中风病痉挛性偏瘫的临床研究》文中进行了进一步梳理目的：本课题拟通过观察温肾益气活血法治疗缺血性中风病痉挛性偏瘫的临床疗效，探讨本方法在治疗缺血性中风病痉挛性偏瘫中的作用机理，并结合现代临床评价方法，探索缺血性中风病痉挛性偏瘫更有效的治疗方法。方法：选择符合缺血性中风病痉挛性偏瘫肾阳虚、气虚血瘀证诊断标准的病例60例，并按就诊先后随机分为治疗组和对照组，各组30例。对照组给予西医常规治疗，治疗组在对照组治疗基础上给予自拟温肾益气活血汤，水煎服，日一剂；两组均以治疗4周为一疗程。分别记录两组患者治疗前后的神经功能缺损程度、BrunnStrom偏瘫功能分级情况、日常生活能力评分、中风病证候评分分级、痉挛程度和病残程度。疗程结束后进行疗效评价，并对治疗前、后的各项观察数据进行对比分析。结果：治疗组总有效率96.8%，对照组总有效率86.0%，两组比较有显着性差异(P＜0.01)。中医证候疗效治疗组总有效率96.3％，对照组总有效率75.6％，两组比较有显着性差异(P＜0.01)。治疗组在神经功能缺损的改善程度、BrunnStrom偏瘫分级改善程度、日常生活能力的提高程度、中风病证候改善方面、痉挛程度及病残程度的改善均明显优于对照组。且本方法在观察治疗中未发现毒副作用。结论：温肾益气活血法对缺血性中风病痉挛性偏瘫的临床治疗效果明显，且安全可靠，无任何毒副作用。值得进一步深入研究并临床推广应用。
佚名[10]2002年在《《中医杂志》2002年第43卷总索引》文中认为学术探讨辨证论治的成因、特征与境界··························……孟庆云(885)通络法历史沿革剖析················,···················……茅晓(48引论叶天士方剂气味配伍规律及实践价值……程昭
参考文献：
[1]. 补肾化痰，益气活血法对脑缺血酶学、神经生长因子表达影响的实验研究[D]. 段新芬. 黑龙江中医药大学. 2003
[2]. 益气活血法与补肾生髓法对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响[D]. 徐伟. 安徽中医药大学. 2014
[3]. “补肾化痰益气活血”法预防脑缺血神经保护作用的实验研究[D]. 李文英. 黑龙江中医药大学. 2003
[4]. 两种中医治法对脑缺血再灌注大鼠神经干细胞增殖分化wnt/β-catenin信号转导通路基因及差异蛋白表达的影响[D]. 李霁敏. 安徽中医药大学. 2014
[5]. 补肾益气活血法治疗血管性痴呆的临床观察与实验研究[D]. 郭明冬. 中国中医科学院. 2007
[6]. 清热解毒益气活血法治疗2型糖尿病并脑梗塞的理论与临床研究[D]. 孙志升. 山东中医药大学. 2008
[7]. 益气活血法对MCAO-R大鼠海马神经干细胞增殖分化JAK-STAT信号通路的影响[D]. 韩义皇. 北京中医药大学. 2017
[8]. 益气活血法治疗缺血性中风急性期临床研究[D]. 许文辉. 北京中医药大学. 2002
[9]. 温肾益气活血法治疗缺血性中风病痉挛性偏瘫的临床研究[D]. 赵福臣. 山东中医药大学. 2013
[10]. 《中医杂志》2002年第43卷总索引[J]. 佚名. 中医杂志. 2002