肺结核涂阴患者外周血结核T细胞检测的临床应用论文_王渊能1,洪丽娟2,王燕如2

(1福建医科大学附属漳州市医院检验科 福建漳州 363000)

(2福建医科大学附属漳州市医院朝阳分院检验科 福建漳州 363000)

【中图分类号】R521 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)02-0175-02

结核病是危害人们健康的呼吸道传染病,快速准确检测结核分枝杆菌感染是控制结核病流行的关键。细菌学检查是诊断肺结核的金标准,但临床上因痰涂片检测阴性、痰培养检测周期长和敏感性低等因素,而影像学、结核菌素试验、结核抗体和分子诊断技术均存在局限性给临床诊断带来困难。因此寻求新方法对肺结核早期诊断具有重要临床意义。近年建立在以T细胞为基础的结核分枝杆菌特异性γ-干扰素释放试验已列入欧美等国家结核病诊疗指南,本试验主要探讨外周血结核T细胞检测在肺结核涂阴患者诊断中的临床价值。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年7月-2017年11月在我院呼吸科或朝阳分院感染科诊治的患者。人选标准:患者有咳痰、咳嗽等呼吸道症状,CT检查或X片显示肺部有阴影。排除标准:妊娠,SLE、风湿等自身免疫性疾病,艾滋病,器官移植、使用免疫抑制剂等患者。肺结核诊断主要依据痰涂片检查、影像学和临床症状并参照肺结核的诊断标准排除其他疾病后确诊。将人选患者分为两组:肺结核组96例(含涂阳25例和涂阴71例),其他肺部疾病组60例,包括肺炎34例,肺气肿9例,肺癌11例,慢性阻塞性肺疾病6例。两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

人选患者分别痰涂片抗酸染色、外周血结核T细胞检测、结核抗体(胶体金法)和PPD试验。

1.2.1外周血结核T细胞检测体外释放酶联免疫法采用北京万泰生物公司试剂盒,检测方法及判断结果按说明书。以T管与N管含量差值即(T-N)>14,并且≥N/4,结果判定为阳性。

1.2.2结核菌素试验采用成都生物制品研究所生产的试剂(BCG-PPD,50IU/ML)。硬结<5MM为阴性,5~9MM为弱阳性,10~19MM为阳性反应,≥20MM(或<20MM但有水泡或坏死时)为强阳性。本研究以硬结直径≥10MM时,判定为阳性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行处理,计量资料以(x-±s)表示,采用t检验,计数资料以n(%)表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 TB-IGRA试验、结核杭体和PPD试验对涂阴肺结核诊断的评价指标分析由公式:灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)可知,在涂阴肺结核组中TB-IGRA试验敏感性为90.1%[64/(64+7)],与血清结核抗体和PPD试验的敏感性相比,差异均有统计学意义(χ2=16.7,8.7,P<0.01)。由公式:特异性=真阴性(真阴性+假阳性)可知:TB-IGRA试验在涂阴肺结核诊断中的特异性为91.7%[55/(55+5)],明显高于结核抗体(73.3%)和PPD试验(68.3%),差异有统计学意义(χ2=7.0,10.2,P<0.01)。见表1。TB-IGRA试验对涂阴肺结核诊断的阳性预测值为92.8%,与血清结核抗体、PPD试验相比,差异均有统计学意义(χ2=9.9,9.2,P<0.01)。TB-IGRA试验对涂阴肺结核诊断的阴性预测值为88.7%,与血清结核抗体和PPD试验相比,差异有统计学意义(χ2=13.1,9.0,P<0.01)。

表1 TB-IGRA试验、结核抗体和PPD试验对涂阴肺结核诊断的评价指标比较

3 讨论

肺结核是种常见且难以进行病原学诊断的疾病,对肺结核患者早期诊断和治疗是控制结核病播散的重要环节。痰涂片抗酸染色比培养快,能早期为呼吸道感染的诊断和治疗提供重要信息,但受制于痰液中分枝杆菌的数量,敏感性低,本研究阳性率仅为26.0%(25/96)。目前诊断痰菌涂阴的肺结核患者主要依靠典型的临床症状、PPD试验或经纤维支气管镜的肺组织活检、肺部影像检查的特征性改变等,但仍有部分患者缺乏典型的临床症状和肺部影像学改变、PPD试验呈阴性或弱阳性、不愿接受纤支镜检查或病情重不能耐受者,因此给涂阴肺结核的诊断带来困扰。本研究以硬结直径10mm作为诊断临界值,特异性仅为68.3%。外周血结核T细胞的γ-干扰素释放试验建立在以T细胞为基础的体外IFN-γ测定方法,评估患者的T淋巴细胞是否被结核分枝杆菌特异性抗原致敏。本试验采用体外释放酶联免疫法原理衡量特异性抗原介导的细胞免疫反应强度。主要使用两种特异性抗原,分别是ESAT-6和cFP-10,刺激结核分枝杆菌感染者特异性T淋巴细胞并使其增殖,释放γ-干扰素。微孔条上预包被的IFN-γ抗体可与标本中的IFN-γ结合,再加入酶标试剂进行二次混育。当标本中存在IFN-γ时,将形成“包被抗体一IFN-γ-酶标抗体”复合物,然后进行ELISA显色,通过酶标仪检测吸光度,计算标本中的IFN-γ含量,从而判断患者是否具有针对结核分枝杆菌特异性的T细胞免疫反应,可用于结核分枝杆菌潜伏感染或活动感染的辅助诊断。本试剂盒采用的致病性结核分枝杆菌有卡介苗、其他分枝杆菌没有的缺失区域1(RD1)中两种基因的重组抗原。因此结果不受卡介苗接种和非结核分枝杆菌的影响,国内相关研究结果显示该试验对结核感染有较高的诊断价值。由表1可知,TB-IGRA试验对于涂阴肺结核诊断的敏感性(90.1%)、特异性(91.7%)均较高,阳性预测值为92.8%,阴性预测值为88.7%,与其他肺部疾病组相比存在显著性差异,与同组的PPD试验、血清结核抗体相比也存在显著胜差异。因此在指导涂阴结核的诊断方面具有重要的临床意义。

论文作者:王渊能1,洪丽娟2,王燕如2

论文发表刊物:《心理医生》2018年2期

论文发表时间:2018/1/29

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肺结核涂阴患者外周血结核T细胞检测的临床应用论文_王渊能1,洪丽娟2,王燕如2
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